Agar Hijau, Yayasan, Penyediaan, Kegunaan

Dia Agar hijau terang Ia adalah medium budaya yang kukuh, dengan tahap pemilihan yang tinggi. Ia digunakan secara eksklusif untuk pengasingan strain genus Salmonella; Walau bagaimanapun, terdapat beberapa pengecualian, seperti spesies Typhi dan parathyphi yang tidak tumbuh dalam medium ini.

Pencarian untuk genre Salmonella kerap dalam sampel najis, air atau makanan. Dalam pengertian ini, medium ini sangat berguna. Agar ini dicipta pada tahun 1925 oleh Kristensen, Lester dan Jurgens, kemudian diubahsuai oleh Kauffmann.

Ia terdiri daripada multiplayones dari peptik tisu haiwan yang dicerna dan kasein digreat, juga mengandungi ekstrak yis, natrium klorida, laktosa, sukrosa, fenol merah, hijau terang dan cengkaman.

Ia dicirikan dengan menjadi medium yang agak tidak ramah untuk kebanyakan bakteria, memihak kepada pertumbuhan Salmonella, namun beberapa koliform mampu wujud di dalamnya, berkembang dengan lemah.

Penting untuk menyerlahkan bahawa dalam medium ini genre Shigella tidak tumbuh dan tidak Salmonella typhimurium, tidak Salmonella Paratyphi. Oleh itu, jika anda ingin mengasingkan mikroorganisma ini, media lain harus digunakan, seperti Agar XLD, antara lain.

Asas

Agar hijau terang

Setiap komponen yang membentuk medium memenuhi fungsi tertentu yang menentukan ciri -ciri dan sifat agar.

Pluripeptons dan ekstrak ragi adalah sumber nutrien di mana mikroorganisma mengambil nitrogen dan mineral yang diperlukan untuk pembangunan mereka. Laktosa dan sukrosa adalah sumber tenaga untuk mikroorganisma yang mampu menanamnya.

Hijau cerah adalah bahan inhibitor yang menghalang perkembangan bakteria positif gram dan sebilangan besar mikroorganisma negatif gram.

Boleh melayani anda: troponin: ciri, struktur, fungsi dan ujian

Natrium klorida memberikan kestabilan osmotik kepada alam sekitar. Walaupun fenol merah adalah penunjuk pH, vira warna yang sama ketika mengesan pengeluaran asid dari penapaian karbohidrat.

Koloni laktosa dan sukrosa yang tidak tumbuh dalam medium warna putih putih atau telus ini, dengan latar belakang merah. Contohnya, bakteria genus Salmonella.

Walaupun bakteria penapaian laktosa atau sukrosa yang mampu berkembang dalam medium ini, mereka menghasilkan warna kuning kuning atau kekuningan, dengan latar belakang kuning kehijauan. Sebagai contoh, Escherichia coli dan Klebsiella pneumoniae.

Varian Agar Hijau Cerah (BGA)

Terdapat variasi lain dari agar hijau terang; Girvobiocin Apar Hijau Hijau Cerah (NBG) dan ketamakan cemerlang Grew Glicerol Avocin Lactose (NBGL).

Glukosa Agar Novobiocin Hijau Cerah (NBG)

Ia mengandungi pertanian kacang soya, ferric ammonium citro.

Ia digunakan untuk mengasingkan koloni salmonella dari sampel najis.

Dalam kes ini, hijau terang dan novobiocin adalah bahan penghambatan yang menghalang pertumbuhan bakteria positif gram dan beberapa mikroorganisma negatif gram.

Natrium thiosulfate adalah sumber sulfur dan sitrat ferrik adalah sumber besi, kedua -duanya perlu untuk mendedahkan pengeluaran hidrogen sulfida melalui pembentukan endapan hitam sulfida ferrik.

Glukosa adalah karbohidrat dan fenol merah yang ditapai adalah penunjuk pH.

Dalam medium ini, koloni Salmonella berkembang besar dengan pusat hitam yang dikelilingi oleh halo kemerahan dan diikuti oleh kawasan yang jelas kelihatan. Beberapa strain Citrobacter freundii menghasilkan koloni yang sama dengan salmonella.

Ia boleh melayani anda: Flora dan Fauna Durango: Spesies Wakil

Glicerol hijau Glicerol hijau avobiocin laktosa gliserol (NBGL)

Medium ini mengandungi pertanian kacang soya, ferric ammonium sitrat, natrium thiosulfate, laktosa, gliserol, hijau terang, novobiocin dan air suling.

Perbezaan dalam medium ini dengan sebelumnya.

Medium juga digunakan untuk mengasingkan spesies Salmonella, koloni berkembang hitam, dengan pengeluaran hidrogen sulfida.

Hanya jajahan yang tidak menghasilkan asid dari gliserol atau laktosa mencapai h₂S mencukupi, kerana pH di bawah mengganggu pembentukan h₂S. Ini menghasilkan koloni tidak berwarna untuk kebanyakan spesies proteus dan cytrobacter.

Penyediaan

-Timbang 58 gram medium dehidrasi yang diperolehi secara komersil. Tambahkannya dalam satu liter air yang berbondong -bondong. Campurkan, biarkan selama beberapa minit dan serahkan penyediaan ke sumber haba sehingga ia larut sepenuhnya.

-Autoclave pada 121 ° C selama 15 minit, jangan melebihi masa pensterilan.

-Biarkan berdiri dan berkhidmat masih panas di plat steril petri. PH akhir mestilah 6.9 ± 0.2.

-Biarkan menguatkan dan simpan di dalam peti sejuk sehingga digunakan. Sebelum menyemai plat, mereka mesti mengambil suhu bilik.

-Serbuk hijau dan disediakan mengambil warna hijau oren-coklat atau kemerahan, bergantung pada pH dan rumah komersial. Warna yang sangat coklat menunjukkan bahawa agar terlalu panas.

-Sebaik sahaja agar tidak disyorkan, tidak disyorkan untuk membina semula, kerana sederhana merosot.

Penggunaan/aplikasi

Medium ini digunakan untuk mencari strain genus Salmonella sampel najis dan makanan tenusu, antara lain.

Boleh melayani anda: Phosphatidilserine: Struktur, Sintesis, Fungsi, Lokasi

Menjadi cara yang agak tidak ramah, adalah dinasihatkan untuk menanam inokulum yang banyak jika sampel langsung digunakan. Jika tidak, pra-pengayaan dan pengayaan spesimen perlu dilakukan sebelum menyemai medium ini.

Oleh kerana beberapa strain Salmonella dihalang atau berkembang dengan kesukaran, adalah dinasihatkan untuk menemani medium ini dengan usia terpilih yang lain untuk Salmonella.

Setiap koloni dengan ciri Salmonella biasa mesti tertakluk kepada ujian biokimia untuk pengenalan muktamad.

QA

Untuk menguji fungsi yang betul dari agar hijau terang. Strain ATCC boleh digunakan untuk memerhatikan perkembangan mereka di atasnya.

Strain yang paling kerap digunakan untuk kawalan kualiti adalah: Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella Flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538.

3 yang pertama mesti memberikan koloni putih merah jambu atau telus dengan latar belakang merah. Salmonella dengan perkembangan yang baik dan proteus dengan pertumbuhan yang terhad atau biasa.

Untuk Klebsiella dan Escherichia, koloni kuning kehijauan dijangka dengan latar belakang kuning dan dalam kes Shigella dan Staphylococcus mereka mesti dihalang.

Medium dehidrasi mesti disimpan pada suhu bilik, di tempat yang kering, kerana mediumnya sangat hygroscopic.

Rujukan

1. Makmal Britania. Agar hijau terang. 
2. Makmal BD. BD Brilliant Green Agar.