Pengasingan mikroorganisma teknikal dan kepentingan

Dia Pengasingan mikroorganisma Ia membayangkan satu set teknik yang digunakan untuk mengekstrak dan memisahkan spesies mikrob yang menarik dari habitat semulajadi mereka ke habitat In vitro. Teknik ini adalah satu set banyak alat asas dan perlu untuk kajian mikrobiologi.

Kebanyakan mikroorganisma yang diketahui dan yang telah ditakrifkan oleh sains, adalah mereka yang dapat diasingkan dan dikekalkan dalam bekas yang mensimulasikan, sebahagiannya, keadaan intrinsik tempat -tempat di mana mereka tinggal.

Imej khas koloni mikroorganisma bakteria yang diasingkan dalam medium pepejal di dalam kapsul petri (imej nadya_il di www.Pixabay.com)

Mungkin salah seorang lelaki pertama yang mengamalkan pengasingan mikroorganisma ialah Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723), yang mengumpulkan dan mengasingkan sampel mikroba dari sejumlah besar tempat dan ekosistem untuk memerhatikannya dengan teliti di bawah beratus-ratus mikroskop yang dia direka.

Walau bagaimanapun, tidak sampai masa saintis Louis Pasteur dan Robert Koch, sepanjang abad kesembilan belas, yang mula melakukan amalan yang ketat yang berfungsi untuk pengasingan mikroorganisma tertentu, semuanya untuk mengkaji secara terperinci secara terperinci.

Tidak seperti Leeuwenhoek, penyelidik ini memberi tumpuan kepada mengasingkan spesies yang ditetapkan dari spesies mikroba alam sekitar yang lain. Di samping itu, ini berminat untuk menjaga mereka hidup selagi mungkin di luar persekitaran semula jadi mereka.

Pada masa ini, teknik yang tepat telah dibangunkan untuk pengasingan dan pertumbuhan pelbagai mikroorganisma yang diperoleh dari hampir semua persekitaran di biosfera.

[TOC]

Teknik pengasingan mikroorganisma

Semua mengasingkan mikroorganisma bermula dengan koleksi sampel di mana mikroorganisma yang menarik didapati. Tempat -tempat ini boleh cedera dalam tisu haiwan atau sayur, tanah atau substrat, lopak, laut, permukaan seperti kulit, dll.

Sampel dibuat dengan menyentuh atau menyokong bekas yang mempunyai medium dengan keperluan yang sesuai untuk pertumbuhan mikroorganisma di permukaan yang dikehendaki. Di dalam bekas ini, anda akan memperoleh apa yang dikenali sebagai "penanaman" mikrob.

Boleh melayani anda: Stentor

Umumnya, tanaman pertama yang diperoleh dari habitat semulajadi tidak diragukan lagi adalah "budaya bercampur", iaitu, terdiri daripada sejumlah besar spesies mikrob yang berlainan.

Walau bagaimanapun, kebanyakan spesies mikroorganisma dapat diasingkan antara satu sama lain di makmal, berusaha untuk mendapatkan budaya mikroorganisma di mana hanya spesies kepentingan atau, dengan kata lain, memperoleh "tanaman tulen" tumbuh.

Pada dasarnya, proses yang dijalankan untuk mendapatkan "tanaman tulen" adalah apa yang dikenali sebagai "pengasingan mikroorganisma".

Terdapat banyak teknik untuk pengasingan mikroorganisma, dan terdapat juga beberapa yang khusus untuk jenis mikroorganisma tertentu. Dalam kes lain, adalah mungkin untuk mendapatkan tanaman tulen hanya mengumpulkan sampel persekitaran semula jadi.

Antara teknik pengasingan yang paling banyak digunakan untuk memisahkan sejenis minat yang terdapat dalam media kultur bercampur adalah:

Calar atau jalur

Mungkin ini adalah kaedah yang paling banyak digunakan untuk pengasingan mikroorganisma. Teknik ini adalah untuk menyediakan medium pepejal steril dengan semua sebatian pemakanan yang diperlukan untuk pertumbuhan mikroorganisma dalam bekas kaca, seperti kapsul Petri.

Menggunakan instrumen yang baik, biasanya menunjuk, ia disentuh pada mikroorganisma yang dikehendaki plat.

Ini dilakukan secara intensif ke belakang dan melalui permukaan medium pepejal atau dipersetujui, seolah-olah ia adalah zig-zag. Biasanya dilakukan sehingga lebih kurang satu pertiga daripada diameter agar di pinggan ditutup.

Gabungan dengan medium atau lapisan

Untuk kaedah ini, pencairan persekitaran dijalankan di mana mikrob yang dikumpulkan ke titik di mana hanya beberapa ratus sel untuk setiap mililiter medium di mana mereka dicairkan.

Boleh melayani anda: Aspergillus fumigatus

Dari pencairan ini beberapa mililiter diambil dan dicampur dengan medium yang akan ditambah dalam bekas sebelum ia menguatkan. Sebagai campuran antara medium yang dipersetujui dan medium cecair di mana mikroorganisma direndam di tengah dan hanya dapat dilihat sehingga mereka berkembang dalam bentuk koloni.

Apabila berkembang sebagai koloni, menjadi lebih mudah untuk memisahkannya dari seluruh mikroorganisma dengan kaedah lain seperti Scratch, sebagai contoh.

Pencairan bersiri

Kaedah ini terdiri daripada pelarutan siri dari medium di mana mikroorganisma dijumpai. Contoh ini adalah pelarut yang dibuat untuk membersihkan Lactococcus lactis Sama ada Lactobacillus acidophilus, Bakteria yang bertanggungjawab untuk pengeluaran keju dan yogurt.

Kira -kira 1 mililiter tiub yang mengandungi susu masam atau yogurt yang telah ditapai sebelum ini diambil dan mililiter ini disuntik dalam susu steril tanpa mikroorganisma. Selanjutnya kira -kira satu mililiter susu tersebut diambil dan prosesnya diulang.

Ini diulangi kira -kira tiga atau empat kali berturut -turut, yang sangat mungkin diperoleh Lactococcus lactis Sama ada Lactobacillus acidophilus dalam medium pencemar terpencil yang boleh mewakili mikrob lain.

Fotografi terperinci tempat dan bahan biasa untuk terpencil mikroorganisma (imej Sintija Valucka di www.Pixabay.com)

Prosedur Pengayaan

Metodologi ini dicapai untuk mengembangkan mikroorganisma dalam media kultur dengan keadaan yang merangsang atau memudahkan pertumbuhan spesies yang menarik dan, dalam banyak kes, dalam keadaan yang menghalang pertumbuhan mikroorganisma mencemarkan lain.

Bakteria genre Salmonella Mereka tumbuh dalam media kultur dengan selenito, kerana mikroorganisma ini mengubah selenit menjadi selenium untuk dapat memetabolisme. Selenito di tengah membuat sukar untuk mengasimilasikan nutrien untuk mikroorganisma lain yang berbeza dari salmonellas.

Teknik tunggal atau eksklusif

Mungkin ini adalah teknik yang paling sukar dan kurang berkesan untuk pengasingan mikrob. Ia menyiratkan meletakkan setitik medium (sampel) di mana mikroorganisma ditempatkan dalam penutup steril, dan kemudian diletakkan di atas plat mikroskop.

Boleh melayani anda: auxotroph

Selanjutnya, semasa diperhatikan, sel tunggal diekstrak dengan bantuan pipet mikro steril. Penurunan diletakkan di penutup steril lain yang diinkubasi pada suhu yang sesuai untuk mikroorganisma. Akhirnya, ia diperhatikan lagi di bawah mikroskop untuk menunjukkan pertumbuhan.

Jika, apabila sel -sel baru telah dibangunkan semula dari sel individu yang diambil, ini ditambah dalam medium budaya steril untuk mendapatkan tanaman tulen yang terpencil sepenuhnya.

Teknik yang diperibadikan

Terdapat mikroba yang tidak berkesudahan di planet bumi yang tersebar oleh hampir semua ekosistem yang diketahui. Beberapa mikroorganisma dikenali sebagai ekstremofil dan memerlukan keadaan eksklusif untuk perkembangan dan pertumbuhan mereka.

Keadaan yang melampau ini adalah berfaedah dan kurang bernasib baik untuk pengasingan, kerana, walaupun mereka hanya membenarkan pertumbuhan mikroorganisma ini, mereka boleh menjadi sukar untuk dicipta In vitro.

Kepentingan

Pengasingan mikroorganisma telah mewakili salah satu kemajuan yang paling penting untuk bidang sains dan perubatan. Ini telah membolehkan manusia mengkaji dan membangunkan rawatan yang berkesan terhadap patogen mikroba yang berbeza.

Pada masa ini sudah pasti bahawa mikroorganisma membentuk bahagian penting dari semua ekosistem, jadi mendapatkan pengasingan sebahagian daripada mereka dengan kepentingan relatif bagi manusia membolehkan penyelidik untuk mengkaji mereka dengan kuat, untuk memahami secara mendalam fungsinya dalam setiap ekosistem.

Rujukan

1. Daripada Kruif, p. (Sembilan belas sembilan puluh enam). Pemburu mikrob. Houchton Mifflin Harcourt.
2. López, m. J., Nichols, n. N., Dien, b. S., Moreno, J., & Kedua -duanya, r. J. (2004). Pengasingan mikroorganisma untuk detoksifikasi biologi hidrolisis lignoselulosa. Mikrobiologi dan Bioteknologi Gunaan, 64(1), 125-131.
3. Spigno, g., Tramelli, l., Galli, r., Pagella, c., & De faveri, d. M. (2005). Biofiltrasi wap diklorometana: pengasingan mikroorganisma.
4. Tresner, h. D., & Hayes, J. Ke. (1970). Metodologi yang lebih baik untuk mengasingkan mikroorganisma tanah. Appl. Persekitaran. Microbiol., 19(1), 186-187.
5. Willey, J. M., Sherwood, l., & Wouretton, c. J. (2009). Prinsip Mikrobiologi Prescott. Boston (MA): Pendidikan Tinggi McGraw-Hill.