Lactosado Broth

Sup lactated dengan keruh. Sumber: Foto yang diambil oleh pengarang MSC. Marielsa Gil

Apa itu sup lactosado?

Dia Lactosado Broth Ia adalah budaya cecair, tidak selektif, terutamanya digunakan sebagai cara pra-pengayaan dalam penebat strain Salmonella, dari analisis mikrobiologi yang dibuat untuk makanan yang diproses, produk tenusu atau air. Ini disyorkan oleh Suruhanjaya Antarabangsa mengenai Spesifikasi Mikrobiologi untuk Makanan (ICMPF).

Medium mengandungi gelatin enzimatik, daging dan ekstrak laktosa, bahan yang diperlukan untuk pertumbuhan bakteria. Di samping itu, laktosa adalah karbohidrat yang boleh ditapai, oleh itu, beberapa koliform dapat membentangkannya dengan pengeluaran gas.

Oleh itu, sup lactosado disyorkan oleh Persatuan Kesihatan Awam Amerika (APHA) untuk kajian yang menganggap bakteria jumlah dan fecal coliform. Ia digambarkan sebagai alternatif yang sangat baik untuk menggantikan sup triptose lauril sulfat dalam teknik standard bilangan yang paling mungkin (NMP), yang digunakan untuk analisis mikrobiologi sampel makanan, susu dan air permukaan, bawah tanah, rekreasi, domestik dan perindustrian.

Asas

Untuk analisis mikrobiologi beberapa sampel, laluan pra-pengayaan adalah penting untuk memulihkan mikroorganisma tertentu yang mungkin dalam kuantiti yang sangat rendah atau dalam keadaan tidak menyenangkan yang melanggar atau meminimumkan daya majunya. 

Begitu juga makanan kering dan diproses, mungkin tercemar dengan Salmonellas sp. Dalam kes ini, jika bakteria hadir, mereka telah mengalami penderaan fizikal dan kimia semasa proses pengeluaran produk.

Sedemikian rupa sehingga mikroorganisma terdedah kepada faktor buruk seperti dehidrasi, pendedahan kepada produk penghalang atau toksik, dan pertindihan yang dihasilkan oleh kehadiran bakteria lain dalam kuantiti yang lebih besar, antara lain.

Dalam pengertian ini, sup lactosado mempunyai kesan pembaikan struktur mikroorganisma yang rosak, menyebabkan ia pulih dan menghasilkan semula, sedemikian rupa sehingga dapat dikesan.

Begitu juga, sup lactosado mempunyai keupayaan untuk mencairkan bahan penghambatan yang boleh menjejaskan daya majunya, yang membolehkan perkembangannya. Di samping itu, komposisi pemakanan sup laktik adalah strategik untuk memihak kepada pertumbuhan Salmonella sp di atas mikroorganisma lain.

Boleh melayani anda: paleobiologi: sejarah, kepakaran, penemuan

Untuk pengenalan akhir, ia mestilah sub-budaya ke arah budaya muktamad yang lain.

Sebaliknya, komposisi medium juga membolehkan untuk mengesan mikroorganisma fermentari laktosa yang menghasilkan gas.

Penyediaan

Untuk menyediakan satu liter sup laktosa, 13 gram medium dehidrasi mesti ditimbang dan dibubarkan dalam 1.000 ml air suling.

Untuk membantu pembubaran medium di dalam air, anda boleh memanaskan penyelesaian sedikit, tetapi tidak terlalu banyak.

Sebaik sahaja homogen, penyelesaiannya disediakan seperti berikut: Jika sup akan digunakan untuk mencari koliform, kejutan dengan tiub ujian disediakan, yang diperkenalkan tiub penapaian Durham ke bawah.

Tiub Durham adalah perincian yang sangat penting, kerana ia akan membolehkan pembentukan gas, data nilai yang sangat baik dalam mencari coliforms.

Menyediakan tiub, 10 ml sup lactosado dibekalkan di dalamnya, jumlah yang mesti mencukupi untuk menutup seluruh tiub Durham.

Sekiranya sup lactosado akan digunakan sebagai sup pra-enrique, tidak perlu meletakkan tiub penapaian durham. Dalam kes ini, lebih banyak medium (225 ml) diperlukan, yang akan dihidangkan dalam balang 500 ml, mulut lebar dan dengan penutup benang tahan haba.

Selanjutnya, tiub atau botol dibawa ke autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit.

Medium mesti berada di pH akhir 6.9 ± 0.2 hingga 25 ° C.

Sup disimpan di dalam peti sejuk sehingga digunakan. Sebelum digunakan, mereka mesti membekalkan suhu bilik.

Sebaliknya, sup lactosado juga boleh disediakan pada kepekatan berganda.

Boleh melayani anda: Herpetologi: Sejarah, Koleksi, Fungsi Herpetologist

Beberapa makmal menambah brome. Dalam kes ini, sup mengambil warna ungu dan jika terdapat perubahan penapaian menjadi kuning.

Aplikasi

Dalam makmal mikrobiologi, sup lactosado digunakan secara meluas kerana ia adalah medium yang agak ekonomi yang menawarkan hasil yang boleh dipercayai dan cepat (24-48 jam).

Ia boleh digunakan untuk analisis jumlah koliform total dan kotoran dalam air dan makanan, atau sebagai sup pra-enrique untuk Salmonella.

Pra-pengayaan

Pra-pengayaan adalah langkah sebelum pengayaan sampel, yang sangat meningkatkan pemulihan bakteria jantina Salmonella Dalam makanan yang diproses.

Untuk melakukan ini, sampel makanan pepejal (25 gram) atau cecair (25 ml) disemai dalam 225 ml sup lactosado, mengeram selama 24 hingga 48 jam. Seterusnya, ia akan menjadi sub-budaya dalam medium yang diperkaya sebagai sup selenito cistina atau sup tetrationato. Kemudian pergi ke media selektif XLD dan SS.

Analisis Coliform Jumlah dan Fecal

Ia adalah medium yang sangat baik sebagai penunjuk pencemaran kotoran.

Oleh itu, sup lactosado sangat sesuai untuk fasa penganggaran kajian koliform dengan kaedah bilangan yang paling mungkin.

Untuk sampel di mana sebilangan besar koliform disyaki, jumlah yang lebih rendah yang sama (1 ml) akan disuntik, manakala untuk sampel di mana kurang koliform disyaki, jumlah sampel lebih banyak disuntik (10 ml).

Untuk analisis, 10 dibuat^-1, 10^-2, 10^-3, membentuk bateri 3-5 paip untuk setiap kepekatan yang digunakan.

Dari setiap pencairan, jumlah yang sama ditaburkan ke sup lactosado.

Tiub diinkubasi selama 24 jam. Sup yang negatif diinkubasi selama 24 jam lagi.

Ia dapat melayani anda: Fauna dan Flora Laut Peru

Tafsiran hasilnya dilakukan oleh pemerhatian dua ciri: yang pertama adalah kehadiran atau ketiadaan kekeruhan, dan kerana medium ini tidak mengandungi penunjuk pH, tidak akan ada perubahan warna.

Yang kedua ialah pengeluaran gas. Gas mudah dibuktikan di dalam tiub Durham, dengan kemunculan satu atau beberapa gelembung udara di dalamnya.

Ia dianggap positif jika kedua -dua ciri diperhatikan, iaitu kekeruhan dengan pengeluaran gas. Tiub positif mesti ditolak dalam media pengesahan (2% sup hijau hempedu terang dan sup EC).

Kawalan Kualiti Sederhana

• Dalam penyediaan medium, penting untuk tidak lupa untuk meletakkan tiub Durhams jika tujuan yang sama adalah kajian coliforms.
• Jangan terlalu panas medium sebelum mensteril.
• Mengedarkan dalam tiub ujian sebelum mensterilkan, tidak pernah selepas itu.
• Jangan gunakan jika medium mempunyai lebih daripada 3 bulan yang disediakan.
• Jangan gunakan jika ada perubahan ciri biasa medium yang diperhatikan.
• Semasa menyediakan kumpulan sup lactosado, anda perlu membuktikan kualiti strain penyemai yang sama yang dikenali sebagai Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Citrobacter freundii dan Klebsiella pneumoniae. Mereka tumbuh dengan baik, dengan pengeluaran gas (kawalan positif).
• Ia juga boleh merangkumi Pseudomonas aeruginosa, Salmonella Typhimurium Sama ada Enterococcus faecalis, Mereka tumbuh dengan baik, tetapi tanpa pengeluaran gas (kawalan negatif).
• Mesti tertunda bahawa warna asal medium dehidrasi adalah kuning air dan medium yang disediakan kuning yang sangat jelas dan telus. Sekiranya perubahan warna atau penampilan diperhatikan, mungkin ada kemerosotan yang sama.

Rujukan

1. Acevedo r., Severiche, c., Castillo, m. Biologi dan mikrobiologi alam sekitar. Universiti Cartagena, Colombia.
2. Makmal Conda Pronadisa. Kepekatan Double Laktosa Laktosa (Pharm European).