Yayasan SIM, Penyediaan dan Kegunaan

Dia Medium sim Ia adalah agar separuh dan pembezaan, direka khas untuk membantu mengenal pasti beberapa bakteria, terutamanya dari keluarga Enterobacteriaceae. Ia terdiri daripada tripteine, peptone, sulfat besi, ammonium sulfat, natrium thiosulfate dan agar.

Medium ini membolehkan pelaksanaan tiga ujian penting: pengeluaran hidrogen sulfida (h₂S), pembentukan indol dan motilitas, dari sana datang sim akronim. Kerana utiliti yang hebat, ia tidak boleh hilang di makmal bakteria.

Ke. Komersial sim tengah b. SIM H2S (-), Indol (-) dan Motility (+) dan SIM H2S (+), Indol (-), Motility (+) Ujian. Sumber: a. Foto yang diambil oleh pengarang MSC. Marielsa Gil b. Mfloayza [cc by-sa 3.0 (https: // creativeCommons.Org/lesen/by-sa/3.0)]

Tidak seperti media lain, ini mestilah separuh -solid untuk mengesan keupayaan pergerakan yang ada bakteria. Dalam pengertian ini, ujian ini berfungsi dengan baik untuk Enterobacteria, tetapi tidak dalam bacilli negatif yang tidak fermentari, di mana kaedah lain lebih disukai untuk digunakan, seperti penurunan yang belum selesai.

Medium SIM membolehkan untuk membezakan sifat tertentu tertentu yang mencirikan beberapa bakteria berhubung dengan yang lain. Sebagai contoh Escherichia coli dibezakan dengan menjadi h₂S (-), indol (+) dan motilitas (+), sementara Proteus mirabilis itu h₂S (+), indol (-), motilitas (+).

[TOC]

Asas

Ini adalah cara budaya yang dianggap berbeza, kerana penggunaannya dapat membezakan antara mikroorganisma yang mampu menghasilkan hidrogen sulfida dari mereka yang tidak; Ia juga menyoroti mereka yang membentuk Indol dari tryptophan dari yang tidak terbentuk, dan akhirnya membezakan bakteria motil dari tidak bergerak.

Sumber kuasa

Seperti mana -mana cara budaya, ia mempunyai unsur -unsur yang memberikan nutrien yang diperlukan supaya mikroorganisma yang tidak memendekkan dapat berkembang. Unsur -unsur ini diwakili oleh peptones dan triptein.

Perkembangan mikroorganisma di alam sekitar adalah penting untuk melihat kehadiran atau ketiadaan ciri -ciri yang ini bermakna menilai.

Pengeluaran hidrogen sulfida

Surat s dari sim simbol merujuk kepada pengeluaran hidrogen sulfida (h₂S). Bakteria yang mampu membentuk hidrogen sulfida akan mengambil natrium sulfat.

Boleh melayani anda: Persaingan khusus: ciri, jenis dan contoh

Setelah H terbentuk₂S -Gas tidak berwarna-, ini bertindak balas dengan garam besi yang terdapat di tengah, membentuk sulfida feros, jelas kelihatan (mendakan hitam). Bakteria yang tidak membentuk h₂S, tinggalkan medium warna asal (beige).

Kehadiran mendakan hitam dapat menghalang tafsiran motilitas. Walau bagaimanapun, diketahui bahawa kebanyakan enterobacteria yang menghasilkan HT₂S adalah motilitas positif, seperti Salmonella, Proteus dan Citrobacter. Di samping itu, mendakan hitam yang meliputi hampir keseluruhan medium, mencadangkan motilitas positif.

Pembentukan Indol

Surat kedua sim akronim adalah "i", yang mewakili pembentukan indol.

Dalam pengertian ini, tripteine, sebagai tambahan kepada sumber nutrien, memenuhi fungsi asas lain. Peptone ini kaya dengan asid amino yang dipanggil tryptophan, oleh itu, ia dapat menunjukkan bakteria yang menghasilkan triptofanase.

Enzim ini bertanggungjawab terhadap Clivar kepada asid amino triptophane, dengan pembentukan indol (bahan tidak berwarna), asid pyruvic dan ammonium.

Itulah sebabnya, untuk menunjukkan reaksi ini, ia perlu. Sama ada kedua-dua bertindak balas dengan Indol, membentuk cincin berbentuk fucsia merah di permukaan agar. Sekiranya cincin warna fuchsia muncul ujian indol ditafsirkan sebagai positif.

Bakteria yang tidak mempunyai enzim ini, tidak akan membentuk cincin dan ditafsirkan sebagai ujian indole negatif.

Adalah penting untuk diperhatikan bahawa bukti Indol mestilah yang terakhir untuk ditafsirkan, kerana sekali reagen ditambah, medium menghalang visualisasi motilitas.

Motilitas

Akhirnya huruf "m" kata sim bermaksud motilitas. Untuk menilai motilitas, medium ini secara strategik separa pepejal, kerana ciri ini penting untuk memerhatikan sama ada atau tidak ada pergerakan bakteria. Bakteria yang mempunyai flagella adalah yang memberi ujian positif ini.

Boleh melayani anda: l limfosit: struktur, fungsi, jenis, kematangan

Ujian positif akan dibuktikan apabila kekeruhan diperhatikan, baik dalam inokulum awal, dan di sekitar ini. Walaupun, bakteria bukan -mobile hanya berkembang pada perjalanan inokulum awal.

Penyediaan

Medium sim

Timbang 30 gr medium dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Campuran dibiarkan berehat selama 5 minit dan kemudian dipanaskan sehingga mendidih, sering kacau sehingga pembubarannya lengkap.

Bagikan campuran dalam tiub ujian dengan penutup kapas dan autoklavate pada 121 ° C selama 15 minit. Keluarkan rak tiub autoklaf dan biarkan menguatkan dalam kedudukan menegak, supaya medium berada dalam bentuk taco.

Untuk pemuliharaannya ia disimpan di dalam peti sejuk sehingga penggunaannya. Medium yang disediakan mesti mempunyai pH terakhir 7.3 ± 0.2.

Apabila memasuki medium, ini mesti berada pada suhu bilik. Warna medium adalah kuning air.

Reagen Kovac

Ukur 150 ml amil atau isoamil atau butil alkohol. (Gunakan salah satu daripada tiga yang disebutkan).

Larutkan 10 gr p-dimethylaminobenzaldehyde. Kemudian, perlahan -lahan menambah 50 ml asid hidroklorik pekat.

Reagen siap untuk digunakan adalah warna tidak berwarna atau jelas. Ia mesti disimpan dalam botol amber dan disimpan di dalam peti sejuk. Jangan gunakan jika anda mengambil warna coklat gelap; Yang menunjukkan bahawa ia rosak. Reagen ini lebih disukai ketika datang ke Enterobacteria.

Reagen Erlich

Timbang 2 gr p-dimethylaminobenzaldehyde dan larut dalam 190 ml etil alkohol mutlak dan perlahan-lahan bercampur dengan 40 ml asid hidroklorik pekat. Pastikan reagen Kovac dengan cara yang sama. Reagen Ehrlich digunakan lebih banyak untuk bakteria yang tidak berpengalaman dan anaerob.

Aplikasi

Medium SIM sangat digunakan dalam makmal bakteria. Ia mempunyai kelebihan bahawa tiga ciri penting dapat dilihat dalam pengenalpastian Enterobacteria.

Boleh melayani anda: penapaian asetik: ciri, aplikasi, contoh

Disemai

Cara yang betul untuk menyemai medium ini menggunakan jarum, yang mana sebahagian daripada koloni tulen untuk dikaji diambil dan dimasukkan di tengah -tengah medium secara menegak. Satu lunge mesti dilakukan. Tusukan tidak boleh sampai ke bahagian bawah tiub, perkara yang betul adalah untuk menutup hanya dua pihak ketiga.

Tidak dinasihatkan untuk mengulangi inokulum, kerana ini dapat membawa tafsiran palsu terhadap motilitas positif. Medium yang diinokulasi diinkubasi dalam aerobiosis pada suhu 37 ° C selama 24 jam.

Setelah waktunya berakhir, diperhatikan sama ada atau tidak ada pengeluaran H₂S dan baca motilitas. Akhirnya, Indol diturunkan, menambah 3 hingga 4 titisan reagen Ehrlich atau Kovac, bercampur dengan lembut dan ditafsirkan.

Sumber: Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologi. Edisi ke -5. Pan -American Editorial S.Ke. Argentina.

QA

Sebagai kawalan kemandulan, satu atau dua tiub tanpa inokulasi dalam 37 ° C setiap 24 jam diinkubasi. Dijangka selepas ini tidak ada pertumbuhan atau perubahan warna.

Sebagai kawalan kualiti, anda boleh menggunakan strain yang diperakui, seperti: Escherichia coli ATCC 25922, Enterobacter aerogenes ATCC 13048, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella Sonnei ATCC 29930, Proteus vulgaris ATCC 13315.

Keputusan yang diharapkan adalah: Escherichia coli H₂S negatif, indol dan motilitas positif, Enterobacter aerogenes hanya motilitas positif, Salmonella typhimurium H₂S dan motilitas positif, dengan indole negatif. Proteus vulgaris Semua positif, selagi Klebsiella pneumoniae dan Shigella Sonnei Semua negatif.

Batasan

-Beberapa strain Morganella Morganii, Antara ketegangan lain boleh menghasilkan pigmen kecoklatan dalam medium ini kerana pengeluaran melanin, ini tidak boleh dikelirukan dengan mendakan sulfida ferus. Dalam profesional yang tidak berpengalaman keadaan ini dapat menjana positif palsu dalam tafsiran ujian h₂S.

-Bakteria aerobik yang ketat akan tumbuh hanya di permukaan tiub, yang menghalang tafsiran motilitas.

Rujukan

1. Makmal BD. Bbl sim medum. 2008. Terdapat di: BD.com
2. Makmal Neogen. Sim medum. Terdapat di: FoodSafety
3. Difco francisco soria melguizo. Sim medum. 2009. Terdapat di: http: // f-soria.adalah
4. Makmal Brizuela-Lab.  Purata sim. Tersedia di: .Brizuela-Lab.com
5. Laboratorium Britania. Purata sim. 2015. Terdapat di: studyres.Ia adalah/doc
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologi. Edisi ke -5. Pan -American Editorial S.Ke. Argentina.