Penyediaan Media Budaya

Penyediaan media kultur adalah metodologi untuk mengembangkan mikroorganisma, untuk mengkaji mereka

Apakah penyediaan media kultur?

The Penyediaan Media Budaya Ini adalah metodologi rutin yang digunakan di makmal untuk pertumbuhan mikroorganisma yang dikehendaki. Media budaya adalah persediaan pepejal, cair atau separa pepejal yang semua nutrien yang diperlukan untuk pembangunan penduduk mikroba mempunyai.

Secara umum, cara untuk memupuk mikroorganisma kaya dengan protein dan asid amino dan biasanya mengandungi beberapa komponen yang memihak kepada pertumbuhan organisma yang anda ingin belajar, seperti vitamin, darah, serum, antara lain.

Tidak ada cara budaya umum atau sejagat, kerana komposisinya berbeza -beza bergantung kepada keperluan mikroorganisma yang menarik. Beberapa bakteria boleh dibangunkan dalam mana -mana medium budaya, tetapi yang lain mempunyai keperluan khas.

Apa yang terdiri daripada?

Mikroorganisma, seperti kulat dan bakteria, tidak dapat dikaji secara individu kerana saiz mikroskopik mereka. Oleh itu, mereka mesti ditanam dalam media buatan yang membolehkan peningkatan ketara dalam populasi.

Sebagai contoh, jika kita mahu mengkaji bakteria kita perlu menyediakan mereka dengan keadaan yang sesuai supaya mereka dapat membesar dan membentuk koloni (yang dapat diperhatikan dengan mata kasar).

Penyediaan media kultur berbeza -beza bergantung kepada jenis mikroorganisma yang ingin anda tumbuh. Sebelum menyiapkannya, perlu mengetahui keperluan pemakanan asas organisma kerja.

Komponen yang paling biasa digunakan dalam media tanaman akan diterangkan di bawah untuk mempunyai idea umum penyediaannya:

Agar

Ia digunakan dalam tanaman sebagai ejen gelling dan menambah apabila medium pepejal atau separa -kolid dicari. Ejen pengukuhan pertama yang digunakan dalam penyediaan media adalah gelatin, tetapi pada tahun 1883 agar itu diperkenalkan ke dalam dunia bakteriologi oleh w. Hesse.

Agar jenis bakteria mempunyai komponen utama polysaccharide kesan kompleks, yang diekstrak dari alga. Kompaun ini digunakan sebagai pemekat makanan biasa, seperti ais krim dan kesesakan.

Ia adalah elemen yang sangat berharga dalam mikrobiologi kerana beberapa sebab. Terutamanya, kerana mikroorganisma tidak dapat merendahkannya, cecair pada suhu 100 ° C dan kekal dalam keadaan cair sehingga mencapai 45 ° C atau kurang.

Sekiranya anda ingin menyediakan medium pepejal, kepekatan agar mestilah sekitar 1.5%, sementara separuh solid mesti disediakan dari 0.3 hingga 0.5%.

Cecair

Penanaman organisma patogen memerlukan cecair badan supaya mereka dapat berkembang seperti yang mereka lakukan dalam persekitaran semula jadi mereka.

Boleh melayani anda: kumpulan prostetik

Atas sebab ini, darah lengkap atau defibrasi ditambah. Cecair diekstrak dari haiwan yang sihat dan, sekali disterilkan, ditambah dalam medium budaya.

Ekstrak

Ia diperoleh dari bahagian haiwan yang berlainan (seperti daging atau hati) atau sayur -sayuran (biji) dan diproses untuk mendapatkan pekat pepejal dalam bentuk pasta atau habuk.

Yang paling biasa adalah ekstrak ragi, malt dan daging.

Peptonas

Sebatian organik ini diperolehi oleh enzimatik atau kimia tisu haiwan atau tumbuhan. Tujuannya adalah untuk menambah kandungan yang kaya dalam asid amino, yang merupakan unit asas protein.

Penyerap kejutan

"Buffer", atau sistem penyerap kejutan, elakkan perubahan pH secara tiba -tiba dan membantu mengekalkan julat optimum yang mentolerir organisma.

Sebilangan besar organisma dapat mengembangkan pH 7, walaupun beberapa bakteria lebih suka media alkali. Walau bagaimanapun, terdapat bakteria yang menentang variasi pH antara nilai 6 dan 9.

Dalam spesies pH -sensitif, kerosakan tidak dihasilkan oleh jumlah hidrogen atau hidroksil yang berlebihan, tetapi dengan peningkatan asid lemah atau pangkalan yang dapat menembusi sel.

Begitu juga, penunjuk pH ditambah untuk dapat memantau dan mengelakkan penyimpangan yang disebabkan oleh penapaian atau proses lain.

Matlamat

Objektif utama ketika menyediakan medium budaya adalah untuk menambahkan semua komponen yang diperlukan untuk membolehkan pembangunan organisma yang berjaya yang ingin diasingkan. Gabungan komponen dan nutrien yang lebih berkesan untuk mencapai cara yang dikehendaki mesti dikenal pasti.

Kedua -dua penyediaan dan penyimpanan sederhana adalah penting untuk memastikan pertumbuhan yang berjaya, kerana langkah -langkah ini bergantung kepada komposisi alam sekitar dan ketersediaan nutrien.

Perlu dipertimbangkan bahawa penanaman mikroorganisma adalah tugas yang dipengaruhi oleh beberapa faktor yang luaran ke persekitaran budaya, seperti intensiti cahaya yang diterima, suhu dan tahap keasidan atau kealkalian medium.

Oleh itu, setiap pembolehubah ini mesti diambil kira dan dipantau dengan ketat.

Jenis media

Berdasarkan komposisinya

Berdasarkan komposisinya terdapat tiga jenis tanaman utama: cara semulajadi atau empirikal, separa sintetik dan sintetik atau kimia.

Persekitaran semula jadi

Dalam media semula jadi komposisi yang tepat tidak diketahui. Ini termasuk bahan -bahan seperti susu, darah yang dicairkan, jus tumbuhan, ekstrak dan infus daging dan peptones.

Atas sebab -sebab ekonomi, komponen rendah kos biasanya ditambah, seperti ekstrak soya, serum, molase, dll.

Boleh melayani anda: Sokongan: Ciri, Fungsi dan Contoh

Media separa sintetik

Ia dipanggil separa sintetik jika komposisi yang sama diketahui sebahagiannya. Mana-mana medium yang mengandungi agar adalah medium separa sintetik.

Antaranya kita mempunyai kentang dextrose, agar czapek-dox, oatmeal, cengkaman daging, antara contoh lain.

Medium sintetik atau kimia yang ditakrifkan

Dalam kes ini, komposisi medium - seperti jumlah karbon, nitrogen, sulfur, fosforus dan faktor pertumbuhan lain, diketahui sepenuhnya - benar -benar dikenali.

Sangat berguna jika anda ingin mendapatkan hasil yang boleh dihasilkan untuk penyelidik lain.

Untuk "mikroorganisma" yang disebutkan dengan keperluan pertumbuhan khas ", anda perlu menambah komponen yang diperlukan. Contoh jenis ini adalah Lactobacillus.

Berdasarkan jenis mikroorganisma

Dengan cara yang sama, terdapat klasifikasi lain untuk media kultur berdasarkan jenis mikroorganisma yang dapat tumbuh di dalamnya.

Berikutan prinsip ini kita mempunyai yang berikut: Cara Umum, Pengayaan, Selektif dan Pembezaan. Masing -masing diterangkan di bawah:

Cara umum

Ini mengakui perkembangan pelbagai mikroorganisma. Sekiranya mana -mana organisma memerlukan syarat khas untuk pertumbuhannya, ia tidak akan dapat berkembang dengan jayanya dalam jenis tanaman ini.

Media Pengayaan

Pengayaan ini memberi manfaat.

Cara terpilih

Mereka mencari pertumbuhan khusus mikroorganisma, memanggil kulat, bakteria, protozoa, antara lain. Untuk melakukan ini, mereka menghalang perkembangan orang lain.

Untuk mencapai matlamat ini, sebatian kimia fana dapat ditambah untuk sekumpulan mikroorganisma yang luas dan tidak berbahaya bagi tubuh yang menarik, atau menambah sumber tenaga yang hanya boleh diasimilasikan oleh mikroba yang dicari.

Media selektif digunakan apabila sampel perubatan diambil untuk memupuk beberapa mikroorganisma patogen. Di sini perlu memihak kepada pertumbuhan patogen dan menghalang perkembangan flora mikrob biasa dari pesakit.

Sebagai contoh, Bismuth Sulphite Agar tidak membenarkan pertumbuhan bakteria gram dan sebilangan besar bakteria yang terdapat di rongga gastrointestinal.

Oleh itu, ia digunakan untuk memupuk bakteria gram -negatif yang menyebabkan demam kepialu, Salmonella Typhi, Dalam sampel tahi.

Cara pembezaan

Jenis ini menggunakan beberapa ciri diagnostik organisma yang menarik (keunikan dalam metabolismenya, misalnya) untuk dapat mengenal pasti mereka terhadap spesies lain yang tumbuh dalam medium yang sama.

Ia boleh melayani anda: Transfases: Apa, Fungsi, Tatanama, Subkelas

Kedua -dua media pembezaan dan cara terpilih sangat berguna dalam bidang mikrobiologi klinikal dan kesihatan awam, kerana disiplin ini perlu mengesan kehadiran mikroorganisma tertentu yang berkaitan dengan patologi atau keadaan kebersihan yang lemah.

Anda boleh menambah bahan penunjuk dalam tanaman yang memberikan ciri tersendiri kepada koloni yang dicari. Sebagai contoh, kepada medium-eosin-rul metilena (EMB EMB) dan agar-MacConkey ditambah laktosa dan penunjuk pH.

Oleh itu, apabila koloni berkembang di media ini dengan keupayaan untuk menanam laktosa dan menghasilkan aldehid, mereka dapat diperhatikan dengan warna khas.

Langkah untuk penyediaan media kultur

Pada masa ini penanaman boleh dibeli dengan cara yang lyophilized. Oleh itu, penyediaannya difasilitasi dan hanya produk yang kekal.

Kandungan mesti berat (dengan mengambil kira jumlah akhir yang ingin anda sediakan) dan dibubarkan dalam air suling berikutan semua petunjuk produk.

Kandungan media cecair mesti dibahagikan kepada bekas yang dikehendaki (plat petri, tiub, dll) untuk pensterilan berikutnya.

Untuk mengedarkan medium pepejal, diperlukan untuk mencairkannya menggunakan gelombang mikro atau menyerahkan bahan ke mandi air. PH sederhana mesti diselaraskan.

Biasanya agar digunakan dalam tiub ujian atau di plat petri. Sekiranya agar menguatkan dalam kedudukan yang cenderung, dengan sudut yang sesuai untuk kelebihan terminal akhir menjadi pepenjuru, ia dikenali sebagai tiub pico seruling atau cenderung.

Apabila agar itu menguatkan dalam kedudukan menegak yang benar -benar diberi nama "Deep".

Setelah mensterilkan media - menggunakan autoklaf - mereka membiarkan mereka sejuk. Ini mesti dimanipulasi dalam persekitaran yang bebas daripada mikroorganisma, yang paling biasa adalah untuk bekerja dengan pencucuhan yang lebih ringan yang memastikan persekitaran aseptik di sekitarnya.

Rujukan

1. Celis, j. Dan. (2006). Biologi Sel: Buku Panduan Makmal (Vol. 2). Elsevier.
2. Finegold, s. M., Bailey, w. R., Baron, e. J., Fineglod, s. M., & Scott, dan. G. (1991). Bailey Scott: Diagnosis Mikrobiologi. Pan -American Medical.
3. Olivas, e. (2004). Mikrobiologi dan II dan Manual Amalan Parasitologi. Universiti Autonomi Ciudad Juarez.
4. Schlegel, h. G., & Zaborosch, c. (1993). Mikrobiologi Umum. Cambridge University Press.
5. Tortora, g. J., Funke, b. R., & Kes, c. L. (2007). Pengenalan kepada Mikrobiologi. Ed. Pan -American Medical.