Baird Parker Agar Apa, Yayasan, Penyediaan, Penggunaan

Dia Baird Parker Agar atau telur telur telur adalah medium kultur pepejal, selektif dan pembezaan. Ia dicipta pada tahun 1962 untuk pengesanan dan kiraan staphylococci coagulase positif (Staphylococcus aureus).

Ia terdiri daripada kasein pankreas dihidrolisis.

Koloni khas Staphylococcus aureus di Baird Parker Penuaan. Sumber: Daizy John [CC oleh 4.0 (https: // creativeCommons.Org/lesen/by/4.0)]

Baird Parker Agar berdasarkan kapasiti S. Aureus untuk mengurangkan telurito dan menghasilkan lecithinase. Kedua -dua sifat menjana koloni dengan ciri -ciri khusus untuk spesies ini. Oleh itu, ia memberikan keberkesanan yang besar dalam pengesanan mikroorganisma ini.

Koloni biasa S. Aureus Mereka berwarna hitam atau gelap kelabu, dengan kelebihan berwarna dan halo yang jelas yang mengelilingi mereka, membezakan dari seluruh mikroorganisma. Patogen ini boleh didapati dalam sampel klinikal, air, kosmetik dan makanan mentah atau dimasak.

Diagnosis atau pengesanannya adalah sangat penting, disebabkan oleh pelbagai patologi yang dihasilkannya, seperti keracunan makanan, sindrom kulit yang dilecehkan, sindrom kejutan toksik, abses, meningitis, septikemia, endokarditis, antara lain.

Asas

Kuasa pemakanan

Casein pankreas terhidrolisis, ekstrak daging dan ekstrak yis adalah sumber nutrien, vitamin dan mineral yang diperlukan untuk pembangunan umum mikrob, manakala piruvat dan glisin adalah sebatian yang memihak kepada pertumbuhan tertentu Staphylococcus aureus.

Selektif

Baird Parker agar selektif kerana ia mengandungi bahan yang menghalang pertumbuhan flora yang disertakan, sambil memihak kepada perkembangan S. Aureus. Sebat.

Perbezaan

Medium ini membolehkan membezakan S. Aureus selebihnya staphylococci coagulase negatif. S. Aureus Ia mempunyai keupayaan untuk mengurangkan telurit ke teluro logam hitam, membentuk koloni kelabu hitam atau gelap.

Begitu juga, kuning telur menyediakan substrat untuk menunjukkan kehadiran enzim lektinase dan lipasa. S. Aureus Ia adalah lecithinase positif dan oleh itu halo yang jelas akan diperhatikan di sekitar koloni, menunjukkan bahawa lesitin dihidrolisis.

Boleh melayani anda: insang pernafasan: bagaimana ia dilakukan dan contohnya

Dalam pengertian ini, penampilan dalam kolon hitam atau kelabu hitam atau terang ini S. Aureus. 

Sekiranya zon hujan terbentuk, ia menunjukkan bahawa terdapat aktiviti lipase. Beberapa strain S. Aureus Mereka positif dan lain -lain lipase negatif.

Sekiranya S. Aureus Menjadi lipase positif kawasan legap akan diperhatikan di sekitar koloni kelabu hitam atau gelap, dan kemudian halo yang jelas untuk tindakan lecithinase.

Koloni bakteria selain S. Aureus mampu berkembang dalam medium ini, mereka akan mengembangkan koloni tidak berwarna atau coklat, tanpa halo di sekitar.

Anda juga boleh memerhatikan koloni hitam yang tidak biasa dengan atau tanpa kelebihan tidak berwarna, tetapi tanpa cahaya halo. Tanah jajahan ini tidak boleh diambil kira, mereka tidak sesuai dengan S. Aureus.

Penyediaan

Emulsi kuning telur

Telur ayam sejuk diambil, mengembara dengan baik dan diletakkan 2 hingga 3 jam dalam 70% alkohol. Kemudian, telur terbuka secara aseptik dan berhati -hati memisahkan cerah kuning. Seterusnya, 50 ml kuning telur diambil dan dicampur dengan 50 ml larutan fisiologi steril.

1% P/V Potassium Tellto

Beberapa rumah komersial menjual 1% Poetassium Teluro yang sedia untuk digunakan. Ia ditambah ke medium sebelum cara menguatkan.

Untuk menyediakan penyelesaian ini di makmal, 1.0 gr gralium certasum dan larut di bahagian air. Selanjutnya jumlah air selesai sehingga mencapai 100 ml. Penyelesaiannya mesti disterilkan dengan kaedah penapisan.

Penyediaan medium budaya

Timbang 60 gr medium dehidrasi dan larut dalam 940 ml air suling. Tinggalkan campuran berehat selama kira -kira 10 hingga 10 minit.

Ia boleh melayani anda: Hubungan interspecific: Jenis dan contoh

Sapukan haba mengaduk persekitaran dengan kerap untuk memperbaiki proses pembubaran. Biarkan mendidih selama satu minit. Steril dalam autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit.

Biarkan berdiri sehingga mencapai suhu 45 ° C dan tambahkan 50 ml emulsi kuning telur dan 10 ml telurit 1%. Campurkan dengan baik dan berkhidmat antara 15 hingga 20 ml pada plat steril petri.

Biarkan menguatkan, memerintahkan dalam plat yang terbalik dan simpan di dalam peti sejuk sehingga digunakan.

PH akhir medium yang disediakan mestilah 6.8 ± 0.2.

Sebelum menyemai sampel, anda harus menunggu pinggan untuk mengambil suhu persekitaran. Menanam plak kerana string atau permukaan yang ditanam dengan spatula drigalski.

Warna medium dehidrasi dipanggang dan warna medium yang disediakan adalah ambar cahaya.

Gunakan

Sampel klinikal

Sampel klinikal disemai secara langsung dengan melepaskan sebahagian bahan di satu hujung pinggan, dan dari sana mereka menonjol kerana keletihan. Inkubasi selama 24 hingga 48 jam pada suhu 35-37 ° C.

Sampel makanan

Timbang 10 gr sampel makanan dan homogenisasi dalam 90 ml 0.1%air peptonada, dari sana mereka menyediakan pencairan jika perlu. Inokulasi plak dalam tiga kali ganda dengan 0.3 ml penyelesaian yang disediakan, dan menabur oleh permukaan dengan spatula Drigalski. Incuba selama 24 hingga 48 jam pada suhu 35-37 ° C.

Metodologi ini membolehkan anda mengira koloni biasa yang diperoleh dan sesuai apabila kehadiran S. Aureus di atas 10 UFC setiap gr/ml sampel.

Sekiranya disyaki bahawa jumlah S. Aureus Ia kecil atau terdapat banyak flora yang disertakan, disarankan. Ini akan memihak kepada pertumbuhan S. Aureus dan menghalang perkembangan flora yang disertakan. Tiub Tuft akan disemai di Baird Parker Agar.

Dapat melayani anda: Bagaimana organisma hidup dari persekitaran kita dibezakan?

Sampel air

Dalam sistem penapisan vakum dan disterilkan, 100 ml air di bawah kajian ditapis, dan kemudian membran mikroporus 0.4 mikron dikeluarkan dengan pengapit steril dan diletakkan di atas pinggan Baird Parker. Incuba selama 24 hingga 48 jam pada suhu 35-37 ° C. Teknik ini membolehkan koloni biasa dikira S. Aureus.

QA

Untuk menilai kualiti Baird Parker Agar, strain yang diketahui boleh digunakan, seperti Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Dalam kes strain S. Aureus ATCC diketahui mengurangkan telurit, dan mereka adalah lipase positif dan lecithinase. Oleh itu, mesti ada perkembangan yang memuaskan dan menanam koloni cembung dengan pusat hitam dan kelebihan tidak berwarna, dengan halo legap dan satu lagi halo luaran yang jelas.

Bagi bahagiannya, S. Epidermidis Perkembangan yang buruk dijangka dalam medium ini, dengan koloni kelabu tambak menjadi hitam, tanpa halo yang jelas.

Untuk Dan. coli dan P. Mirabilis Ia dijangka dihalang sepenuhnya atau sebahagiannya. Sekiranya berlaku koloni coklat tanpa zon legap, atau jelas halo.

cadangan

-Medium tidak boleh dipanaskan setelah menambah telurito dan kuning telur.

-Penyediaan emulsi kuning telur dan agregatnya di tengah adalah langkah pencemaran yang sangat terdedah. Penjagaan mesti dibuat.

-Sekiranya terdapat kehadiran koloni biasa S. Aureus Ia mesti disokong dengan menunggang ujian coagulase untuk dikatakan ketegangan.

-Sekiranya terdapat keputusan ragu dengan koagulase, ujian pengesahan lain mesti dipasang.

-Berhati -hati agar tidak mengelirukan kehadiran koloni biasa S. Aureus Dengan koloni hitam yang tidak biasa.

Rujukan

1. Makmal BD. Baird Parker Agar. Terdapat di: BD.com
2. Makmal Francisco Soria Melguizo. Baird Parker Agar. Terdapat di: http: // f-soria.Ia adalah/maklumat