Bhi Agar Apa, Yayasan, Penyediaan, Kegunaan
- 1857
- 440
- Clarence Greenholt DDS
Dia Bhi Agar o infusi jantung otak. Ia adalah medium budaya pepejal yang berkhasiat. Dalam bahasa Sepanyol kita merujuknya sebagai Cerebro Heart Agar Infusion. Ia adalah medium kultur yang tidak selektif, yang bermaksud bahawa semua jenis bakteria negatif gram dan gram dapat dibangunkan, serta beberapa kulat yis dan filamen.
Ia terdiri daripada penyerapan otak dan jantung daging lembu, hydrolyz peptik haiwan.
Harus diingat bahawa BHI Agar adalah salah satu media kultur yang paling kerap di makmal bakteriologi. Ia boleh digunakan tanpa suplemen sebagai subjektif utama koloni yang diperolehi dalam media selektif yang lain atau untuk penyelenggaraan strain di makmal.
Sebaliknya, ia adalah cara yang ideal untuk digunakan sebagai asas dalam penyediaan media diperkaya, seperti agar darah dan coklat agar. Kedua -dua cita -cita untuk mengasingkan mikroorganisma yang menuntut dari sudut pandangan pemakanan. Walau bagaimanapun, perlu diambil kira bahawa kerana ia mengandungi glukosa, ia tidak sesuai untuk mengamati corak hemolisis.
Begitu juga, BHI Agar boleh digunakan untuk penyediaan cara khas untuk pengasingan mikroorganisma patogen pertumbuhan yang sukar dalam media biasa, termasuk: Haemophilus sp, Francisella tularensis, corynebacterium diphtheriae dan histoplasma capsulatum.
Dengan bahan tambahan antibiotik, BHI agar menjadi medium selektif untuk penebat kulat.
Asas
Ia adalah medium kultur berkhasiat untuk mengasingkan mikroorganisma yang sederhana, dapat meningkatkan pengayaannya dengan penambahan darah dan suplemen berkhasiat lain.
Ia adalah medium budaya yang tidak selektif, oleh itu membolehkan pertumbuhan bakteria negatif yang paling positif dan gram, serta beberapa kulat. Walau bagaimanapun, ia boleh menjadi selektif dengan penambahan antibiotik.
Medium ini mengandungi infusi otak dan jantung daging lembu, tisu haiwan yang dihidrolisis dan tisu kasein pankreas yang dihidrolisiskan; Semua sebatian ini bertindak sebagai sumber vitamin, asid amino, nitrogen dan karbon.
Boleh melayani anda: Flora dan Fauna Entre Ríos: Spesies WakilGlukosa adalah karbohidrat yang memberikan tenaga kepada mikroorganisma apabila mereka menanamnya. Walaupun, natrium klorida dan disodium fosfat mengekalkan keseimbangan osmotik dan memberikan pH dekat dengan berkecuali. Akhirnya, agar memberikan konsistensi yang kukuh kepada alam sekitar.
Penyediaan
Timbang 52 gram medium dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Ambil campuran ke sumber haba sehingga ia mendidih, kerap kali ganda semasa proses pembubaran.
Anda boleh menyediakan baji atau plat agar bhi tanpa bahan tambahan.
Baji
Untuk penyediaan baji, sajikan penyediaan sehingga mereka mengisi separuh daripada setiap tiub, tutup dan mensterilkan autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit, ketika tidur di pangkalan sehingga mereka menguatkan. Selanjutnya simpan di dalam peti sejuk sehingga digunakan.
Bhi Bedges untuk Bacteroteca. Sumber: Foto yang diambil oleh pengarang MSC. Marielsa Gil.Plat
Campuran terlarut adalah autoklava pada 121 ° C selama 15 minit, apabila ia meninggalkan ia dibenarkan menyejuk sehingga 50 ° C dan dihidangkan 20 ml medium dalam plat steril petri. Mereka dibenarkan menguatkan, dilaburkan dan disimpan dalam peti sejuk sehingga mereka menggunakan. Biarkan plat mengambil suhu ambien sebelum menyemai.
PH sederhana mestilah 7.4 ± 0.2.
Medium yang tidak bersedia adalah kuning air dan disediakan adalah ambar cahaya.
Darah agar
Selepas mensterilkan medium, sejuk sehingga suhu anggaran 45 hingga 50 ° C, pada masa itu tambah darah (50 ml), campurkan perlahan -lahan untuk homogenisasi dan berkhidmat 20 ml pada setiap plat petri. Sekiranya gelembung dibentuk di atas pinggan, api yang lebih ringan di gelembung untuk mengeluarkannya harus diluluskan dengan cepat.
Begitu juga, media khas boleh disediakan dengan menambahkan bahan tambahan yang sepadan apabila campuran mencapai suhu 45 hingga 50 ° C.
Boleh melayani anda: keupayaan fizikalMediumnya berwarna merah ceri.
Aplikasi
Gunakan tanpa makanan tambahan
BHI agar tanpa bahan tambahan berguna sebagai penanaman utama dan menanam strain mikroorganisma yang murni sedikit atau sederhana menuntut pengenalannya yang berikutnya.
Memandangkan ia adalah medium warna cahaya, ia sesuai untuk pemerhatian pigmen dan juga dengan tidak mengandungi bahan interferensi, beberapa ujian biokimia, seperti oksidase dan catalase, atau pemasangan ujian biokimia lain dari koloni dari agar ini.
Begitu juga, Bhi Agar luas.
Plat atau baji yang ditanam oleh permukaan dengan strain bakteria diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 hingga 48 jam. Walaupun, dalam kulat suhu dan masa inkubasi bergantung kepada jenis kulat yang dicari.
Sebagai asas agar untuk penyediaan media lain
Dengan pangkalan ini, anda boleh menyediakan media yang diperkaya dan terpilih.
Diperkaya
Fungsi utamanya adalah berfungsi sebagai asas dalam penyediaan darah rutin di makmal mikrobiologi. Terutama, pangkalan BHI adalah kondusif untuk pengasingan strain Streptococcus sp. Walau bagaimanapun, ia mempunyai kesulitan yang tidak mencukupi untuk pemerhatian corak hemolisis dengan mengandungi glukosa.
Ia juga digunakan dalam penyediaan arnab atau darah kuda Haemophilus sp. Untuk hasil yang lebih baik, anda boleh menambah suplemen pengayaan (Isavalex).
Sekiranya sampel datang dari saluran pernafasan ke agar, bacitracine boleh ditambah untuk menghalang flora yang disertakan dan meningkatkan kebarangkalian pemulihan strain strain Haemophilus sp.
Sebaliknya, anda boleh menyediakan darah (kambing atau manusia) dengan Cistina Tellurito untuk mengasingkan Corynebacterium diphtheriae. Begitu juga, berguna untuk menyediakan darah arnab, dengan agregat cistine dan glukosa untuk penebat Francisella tularensis.
Penyebaran plat agar darah dilakukan dengan keletihan dan diinkubasi pada 35-37 ° C selama 24-48 jam dalam mikroaerofilia (5-10% daripada CO2).
Boleh melayani anda: Pokok Phylogenetic: Jenis dan Ciri mereka, ContohnyaSelektif
Medium ini dengan agregat antibiotik dapat menggantikan sabouraud agar untuk penebat kulat.
BHI agar digabungkan dengan chloramphenicol - gentamycin atau penisilin -, streptomycin dan darah kuda sangat sesuai untuk pengasingan Histoplasma capsulatum.
Bergantung pada mikroorganisma yang dicari untuk mengasingkan inkubasi pada suhu 35-37 ° C atau pada suhu bilik dalam aerobiosis. Kadang -kadang inkubasi dalam kedua -dua julat suhu diperlukan, menggunakan 2 plat untuk ini.
Beberapa kulat seperti Trichophyton Mentagrophytes Mereka mesti diinkubasi pada suhu bilik sehingga 7 hari.
QA
Dari setiap lot yang disediakan, disyorkan untuk mengeram plat atau baji pada suhu 37 ° C selama 24 jam dan sahkan bahawa tiada pertumbuhan; Terutama penting apabila menyediakan darah, kerana ia adalah medium yang mudah dicemari.
Sebaliknya, kualiti medium dapat dinilai dengan inokulasi corak corak yang diketahui atau disahkan dan memerhatikan perkembangannya.
Dalam pengertian ini, untuk menilai BHI Agar tanpa bahan tambahan, anda boleh menggunakan strain Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923 o Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C diinkubasi dalam aerobiosis selama 24 hingga 48 jam. Dalam semua kes, pertumbuhan yang memuaskan dijangka.
Untuk menilai plat agar darah, anda boleh menanam strain Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 atau Trichophyton Mentagrophytes ATCC 9533.
Strain bakteria diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam mikroaerofilia selama 24 jam, manakala kulat mengeram pada suhu bilik di ruang lembap sehingga 7 hari. Dalam semua kes pertumbuhan yang memuaskan dijangka.
Rujukan
- Laboratorium Britania. Agar Infusi Jantung Otak. Terdapat di: Britanialab.com.
- Makmal BD. Infusi Jantung Otak (BHI) Agar. Terdapat di: BD.com.