Biggy Agar, Penyediaan dan Kegunaan

Dia Biggy Agar Ia adalah media kultur yang kukuh, selektif dan pembezaan. Ia direka untuk mengasingkan dan membantu mengenal pasti spesies utama Candida. Namanya Biggy berasal dari akronim dalam bahasa Inggeris bismut glukosa glycine yeas.

Formula asal dicipta oleh Nickerson, jadi medium ini juga dikenali sebagai Nickerson Agar. Ia kini terdiri daripada ekstrak yis, glisin, dextrose, ammonium sitrat, bismut sitrat, natrium sulfit dan agar.

Perwakilan Grafik Agar Biggy. Sumber: Flickr.com

Biggy agar dirumuskan untuk pembezaan spesies kompleks C. Albicans, c. Tropicalis, c. Krusei dan c. Kefyr, Tetapi spesies lain seperti Candida glabrata, c. Parapsilosis, c. Guilliermondii, Trichhosporun SP, Geotrichum Candidum dan Saccharomyces Cerevisiae.

Ia mempunyai kepekaan dan kekhususan yang baik, bagaimanapun, apabila membandingkannya dengan media lain dengan fungsi yang sama, ini berada di tempat kedua, diatasi oleh Chromagar. Oleh sebab itu banyak makmal lebih suka yang terakhir, walaupun jauh lebih mahal.

Harus jelas bahawa penggunaan agar besar, serta cara lain yang serupa, membantu pengenalpastian yang cepat, tetapi tidak pernah pengesahan. Oleh itu, kaedah pengenalan tambahan mesti disediakan; Sebagai contoh, sistem pengenalan Vitek 32 dan API 20.

[TOC]

Asas

Agar besar dianggap sebagai medium yang terpilih untuk pengasingan ragi, terutama genus Candida, walaupun genre lain dapat berkembang.

Ia juga merupakan medium pembezaan kerana bergantung kepada spesies yang terlibat, ciri -ciri yang berbeza akan diperhatikan dalam aspek, warna, bentuk dan saiz. Ia dianggap sebagai medium kromogenik, untuk pembangunan pelbagai warna di koloni.

Boleh melayani anda: metionin: ciri, fungsi, makanan, faedah

Warna yang dibentangkan oleh koloni ragi adalah disebabkan kehadiran bismut sulfit di agar. Nickerson menyedari bahawa ragi genus Candid. Ini berasal dari koloni antara cahaya hingga hitam.

Agar ini mengandungi ragi dan ekstrak dextrose, yang menyediakan sumber nutrien asas dan tenaga untuk pembangunan ragi. Glisin adalah merangsang pertumbuhan ragi, sambil menghalang perkembangan bakteria tertentu.

Dalam erti kata yang sama, ammonium dan bismut sitrat, serta natrium sulfit bertindak sebagai inhibitor pertumbuhan bakteria. Agar adalah ejen yang memberikan konsistensi yang kukuh kepada alam sekitar.

Penyediaan

Timbang 45 gr budaya kering dan larut dalam satu liter air suling. Goncang dan panaskan campuran, biarkan mendidih selama 1 minit ke penyelesaian lengkap. Medium budaya ini tidak disterilkan dalam autoklaf.

Apabila menyejukkan kira -kira 45 ° C di Maria tuangkan 20 ml pada plat steril petri.

Warna medium dehidrasi berwarna kekuningan dan kelabu yang disediakan adalah gel putih kekuningan, di mana pendahuluan flocculant sedikit dapat diperhatikan.

PH mestilah 6.8 ± 0.2.

Medium yang disediakan mesti disimpan di dalam peti sejuk (4 ° C) dan melindungi dari cahaya. Seperti cara yang tidak boleh digunakan sendiri secepat mungkin. Penggunaannya disyorkan sebelum memenuhi 3 hari sejak penyediaannya.

Boleh melayani anda: biomaterials

Gunakan

Plat diinkubasi pada suhu bilik (25 ° C) oleh 24, 48 dan 72 jam, masa inkubasi boleh dilanjutkan sehingga 5 hari.

Setiap spesies Candida mengembangkan ciri -ciri tertentu yang menjadikannya membezakan antara satu sama lain. Pengeluar sederhana menggambarkan ciri -ciri berikut untuk setiap spesies:

-Kompleks Candida Albicans: Ia berkembang di agar ini sebagai koloni lancar, bulat, coklat atau hitam, dengan kelebihan mycelial sedikit. Dengan proviso bahawa warna gelap tidak tersebar ke alam sekitar.

-Candida Tropicalis: Koloni terang, kecil, gelap terang, dengan kelebihan mycelial hitam dan terang. Warna gelap merebak ke arah alam sekitar, ciri -ciri yang tipikal spesies ini, setelah diinkubasi selama 72 jam.

-Candida Krusei Membangunkan koloni yang kasar, rata, dengan kelebihan antara coklat ke Negruzco.

-Candida Parakrusei: koloni bersaiz sederhana, kebanyakan masa dengan penampilan kasar, rata. Warnanya boleh berubah antara kopi kemerahan gelap yang terang hingga ringan kopi kemerah -merahan. Pinggir koloni mempunyai miselium yang luas dan kekuningan.

-Candida stellelatoid: Membangunkan koloni sederhana, rata, coklat gelap, hampir hitam. Pembangunan mycelial sangat sukar.

Kajian oleh Yücesoy dan Marol pada tahun 2003, menunjukkan bahawa medium Chromagar memberikan kepekaan dan kekhususan yang lebih baik untuk pembezaan dan pengenalpastian spesies Candida yang berbeza daripada agar besar.

QA

Untuk kawalan kemandulan, plat diinkubasi tanpa inokulasi pada 25 ° C, dalam kegelapan selama 24 hingga 48 jam, diharapkan tidak ada pertumbuhan apa -apa jenis atau perubahan warna.

Ia dapat melayani anda: rasa sentuhan: bahagian, bagaimana ia berfungsi dan berfungsi

Strain ATCC yang disyorkan untuk melaksanakan kawalan kualiti sederhana adalah:

Kompleks Candida Albicans  ATCC 60193, Candida glabrata ATCC 2001, Candida Krusei ATCC 34135. Dalam semua pertumbuhan mereka dijangka seperti yang diterangkan di atas.

Anda juga boleh menggunakan strain berikut:

Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dan Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. Dalam dua yang pertama, jumlah perencatan dijangka, tetapi sekiranya sebahagiannya berkembang, koloni akan menjadi warna krim.

Dalam kes S. Aureus Ia dijangka dihalang sepenuhnya, tetapi jika mereka tumbuh sebahagiannya, koloni mereka putih.

Batasan

Beberapa bakteria mampu berkembang dalam medium ini dan bahkan boleh menjadi gelap, meniru jiran candida.

Jadual: Ciri -ciri koloni beberapa ragi di Biggy dipersetujui mengikut karya Yücesoy m dan marol s.

Sumber: Yücesoy M, Marol S. Prestasi Chromagar Candida dan Biggy Agar untuk mengenal pasti spesies yea. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7

Rujukan

1. Yücesoy M, Marol S. Prestasi Chromagar Candida dan Biggy Agar untuk mengenal pasti spesies yea. Ann Clin Antimicrob Microbiol. 2003; 2 (8): 1-7.
2. Makmal MCD. Fail teknikal penuaan besar. Terdapat di: mcdlab.bersih/
3. LAB NEOGEN. Biggy Agar. Terdapat di: FoodSafety.Neogen.com
4. Makmal Conda Pronadisa. Biggy Agar. Terdapat di: Condalab.com
5. Makmal BD. BD Biggy Agar (Bismuth Glucose Glycine Yaest Agar). 2011. Terdapat di: BD.com