Yayasan, Penyediaan dan Kegunaan Kuasan Tioglicolate

Dia Sup tioglycolate Ia adalah cara konsistensi cecair yang diperkaya. Ia dikenali dengan akronim ftm). Ia dicipta oleh Brewer dan diubahsuai pada tahun 1944 oleh Vera, yang menggabungkannya Peptone of Casein.

Medium ini mempunyai potensi pengoksidaan yang rendah, jadi tidak disyorkan untuk pembangunan bakteria aerobik yang ketat, tetapi ia sesuai untuk memulihkan bakteria aerobik, ketat dan mikro anaerobik bakteria.

Sup tioglycolate tanpa penunjuk. Contoh rembesan vagina. Sumber: Bobjgalindo [cc by-sa 4.0 (https: // creativeCommons.Org/lesen/by-sa/4.0)]

Prestasi tinggi yang diperhatikan dengan medium ini dalam pengasingan dan pemulihan pelbagai jenis mikroorganisma, telah diterima oleh Amerika Syarikat Pharmacopoeia (USP), oleh Persatuan Rasmi Kimia Pertanian (AOAC) dan oleh Pharmacopoeia Eropah (EP).

Organisasi -organisasi ini mengesyorkannya untuk ujian kawalan kemandulan produk farmaseutikal dan untuk pengayaan pelbagai jenis sampel.

Cado thioglycolate terdiri daripada ekstrak yis, kasein digreat, dextrose anhydrous, l-cistine, natrium klorida, natrium tioglycolate, berehat dan puncak dalam jumlah yang kecil.

Terdapat beberapa versi medium ini, di antaranya adalah: sup tioglycolate dengan penunjuk, sup tioglycolate tanpa penunjuk, sup tioglycolate dengan penunjuk yang kaya dengan hemine dan vitamin k_1, Dan sup tioglicolate dengan karbonat kalsiikal.

Harus diingat bahawa variasi sup tioglycate yang diperkaya dengan hemine dan vitamin K berfungsi untuk meningkatkan pertumbuhan anaerob yang ketat, dan variasi sup tioglycolate yang mengandungi kalsium karbonat berguna untuk mengatasi asid yang dihasilkan semasa pertumbuhan mikroba.

[TOC]

Asas

Sup tioglycolate dianggap sebagai pengayaan, tidak selektif kerana ia membolehkan perkembangan bakteria yang paling tidak memakan. Keperluan pemakanan disediakan oleh ekstrak yis, pankreas dicerna dan glukosa.

Sebaliknya, medium ini walaupun sup mengandungi sedikit agar; Ini menyebabkan potensi pengurangan oksida yang rendah, kerana brek kemasukan oksigen, sehingga oksigen berkurangan ketika ia semakin mendalam di dalam tiub.

Itulah sebabnya medium ini sesuai untuk pembangunan bakteria aerobik pilihan, microaerophiles dan anaerobik yang ketat, kedua -dua yang terakhir ini tanpa mengeram di bawah syarat -syarat ini. Medium yang sama mengawal jumlah oksigen di dalam alam sekitar, tidak hadir di bahagian bawah tiub dan kuantiti yang mencukupi di permukaan.

Boleh melayani anda: Phenylalanine: ciri, fungsi, biosintesis, makanan

Begitu juga, Tioglycolate dan L-Cistine bertindak sebagai ejen pengurangan, menyumbang kepada pencegahan pengumpulan bahan yang berbahaya kepada pembangunan bakteria, seperti peroksida. Di samping itu, sebatian ini mengandungi kumpulan sulfidril (-sh-), meneutralkan kesan penghambatan derivatif mercurial, arsenikal, antara logam berat lain.

Sebaliknya, kegelisahan adalah penunjuk pengurangan oksida. Bahan ini tidak berwarna apabila dikurangkan dan merah jambu apabila teroksida. Terdapat varian sup tioglicolate dengan penunjuk dan tanpa penunjuk. Penggunaannya bergantung pada jenis sampel dan keutamaan makmal.

Sementara itu, natrium klorida mengekalkan keseimbangan osmotik sup tioglycate dan penggunaan glukosa anhydra menghalang kelembapan yang berlebihan dalam persekitaran yang kering.

Penyediaan

Sup tioglycolate dengan penunjuk

Timbang 29.75 gr medium dehidrasi dan larut dalam 1 liter air suling. Campuran ditinggalkan kira -kira 5 minit. Bawa sumber haba dan kacau sehingga ia larut sepenuhnya.

Tuangkan medium ke dalam tiub ujian dan autoklavate pada 121 ° C selama 15 minit. Benarkan sejuk sebelum digunakan. Periksa sisipan rumah komersial untuk pemuliharaannya. Ada yang mengesyorkan menjimatkan pada suhu bilik di tempat gelap, dan yang lain di dalam peti sejuk dilindungi dari cahaya.

PH sederhana yang disediakan ialah 7.1 ± 0.2.

Warna medium dehidrasi adalah cahaya dan beige yang disediakan adalah amber yang jelas dengan beberapa opalescence.

Sup tioglycolate dengan penunjuk hemin dan vitamin K₁

Terdapat media komersial yang sudah membawa hemina dan vitamin k₁, Khas untuk penanaman anaerobik.

Sekiranya anda tidak mempunyai medium yang diperkaya untuk anaerob, sup tioglycolate asas boleh disediakan. Untuk melakukan ini, 10 mg hemine hydrochloride dan 1 mg vitamin K ditambah₁ Untuk setiap liter sederhana. Walau bagaimanapun, jika darah atau serum ditambah ke sup tioglycolate, penambahan hemine, vitamin K tidak perlu.

Boleh melayani anda: Persaingan khusus: ciri, jenis dan contoh

Sup tioglycolate dengan kalsium karbonat

Datang secara komersil dan bersiap -siap mengikuti arahan sisipan.

Sup tioglycolate tanpa penunjuk

Ini mempunyai komposisi yang sama dari tioglycate asas, tetapi tidak mengandungi resazurin.

Timbang 30 gr medium dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Selebihnya penyediaan adalah sama dengan yang diterangkan dalam sup tioglycate dengan penunjuk.

Gunakan

Sup tioglycolate berguna untuk pengayaan sampel klinikal, terutamanya bagi mereka dari tapak steril. Ia juga berguna untuk sampel bukan klinikal, seperti kosmetik, ubat -ubatan, dll.

Untuk inokulasi sampel cecair (seperti CSF, cecair sinovial, antara lain), sampel pertama sentrifugasi dan kemudian 2 titik sedimen diambil dan diletakkan di dalam sup tioglycolate. Inkubasi pada suhu 35 ° C selama 24 jam. Jika pada masa ini tidak ada pertumbuhan (kekeruhan), ia diinkubasi sehingga maksimum 7 hari.

Sekiranya sampel diambil dengan hiopus, media kultur pertama kali disuntik dalam plat dan akhirnya swab diperkenalkan ke dalam sup, bahagian yang menonjol dan tiub ditutup, meninggalkan swab di dalam. Incuba pada suhu 35 ° C selama 24 jam, maksimum 7 hari.

Untuk sampel pepejal, ia mesti homogen dalam penyelesaian salin fisiologi (SSF) dan kemudian inokulasi sup tioglycolate dengan 2 titik penggantungan.

Kadang -kadang ia boleh digunakan sebagai alat pengangkutan untuk sampel di mana kehadiran anaerob yang ketat atau sebagai sup sandaran sandaran disyaki.

Varian sup tioglycolate dengan kalsium karbonat digunakan untuk penyelenggaraan kawalan untuk masa yang lebih lama, kerana ia mempunyai keupayaan untuk meneutralkan asid yang dihasilkan oleh penggunaan glukosa; Asid ini beracun kepada bakteria tertentu.

Pertumbuhan sup tioglycolate akan diperhatikan kerana kekeruhan persekitaran. Adalah disyorkan untuk menjalankan pewarnaan gram dan seterusnya subjektif dalam media yang tidak selektif dan selektif, bergantung kepada jenis sampel dan mikroorganisma yang disyaki.

QA

Untuk mengawal kemandulan, disyorkan untuk mengeram satu atau dua sup tanpa inokulasi. Hasil yang diharapkan adalah sup telus, tanpa perubahan warna, walaupun normal untuk warna merah jambu sedikit yang dapat diperhatikan di permukaan tiub.

Ia boleh melayani anda: Meadow Marine: Apa, Ciri -ciri, Flora, Fauna

Untuk kawalan kualiti, antara 10 - 100 UFC kawalan yang disahkan, seperti Staphylococcus aureus ATCC 6538, Micrococcus luteus ATCC 9341, Bacillus subtilis ATCC 6633, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Clostridium sporogenes ATCC 19404, Clostridium sporogenes ATCC 11437, Vulgatus Bacteroids ATCC 8482.

Inkubasi pada 30-35 ° C dalam aerobiosis selama 24 jam hingga maksimum 3 hari, kerana mikroorganisma ini adalah pertumbuhan yang pesat.

Dalam semua kes, perkembangan yang baik dijangka, kecuali Micrococcus luteus dan Bacillus subtilis, di mana mungkin terdapat pembangunan sederhana.

Untuk kawalan kualiti sup tioglycolate yang diperkaya dengan hemina dan vitamin k₁, Strain kawalan boleh digunakan Vulgatus Bacteroids  ATCC 8482, Clostridium perfringens ATCC 13124 dan Bakteroid fragilis ATCC 25285. Hasil yang diharapkan adalah pertumbuhan yang memuaskan.

cadangan

-Kadang -kadang dapat dilihat bahawa permukaan sup tioglycate dengan penunjuk menjadi merah jambu; Ini disebabkan oleh pengoksidaan persekitaran. Sekiranya warna merah jambu meliputi 30% atau lebih daripada jumlah sup boleh dipanaskan dalam mandi air selama 5 minit, penyejukan lagi dan digunakan.

Ini akan menghapuskan oksigen yang diserap, mengembalikan medium ke warna asalnya. Prosedur ini hanya boleh dilakukan sekali.

-Untuk meningkatkan pertumbuhan bakteria aerobik, ia mesti diinkubasi dengan penutup yang sedikit malas. Walau bagaimanapun, lebih baik untuk digunakan untuk tujuan ini jantung sup otak atau sup soya triptik untuk perkembangan yang baik dari aerobes yang ketat.

-Pembekuan alam sekitar atau terlalu panas harus dielakkan, kerana kedua -dua keadaan merosakkan medium.

-Lampu langsung merosakkan medium budaya, ia mesti dilindungi dari cahaya.

Rujukan

1. Laboratorium Britania. USP Tioglycolate dengan penunjuk. 2015. Terdapat di: LabBritania.com.
2. Laboratorium Quos SAS. 2019. Sup tioglycolate. Terdapat di: quios.com.co
3. BD Laboratories Fluid Thioglycollate Medium (FTM). 2003. Terdapat di: BD.com/Eropah
4. Media bbl disediakan dalam tiub untuk penanaman mikroorganisma anaerobik. Media Tioglycate. 2013. Terdapat di: BD.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.Ke. Argentina.