Berkelip Agar

Stratum Corynebacterium di Agar Cled. Sumber: Nathan Reading dari Halesowen, UK, CC oleh 2.0, Wikimedia Commons

Apa itu agar beralih?

Dia Berkelip Agar (Cistine-laktosa-elektrolit-kekurangan) adalah cara budaya pepejal yang berbeza, digunakan untuk diagnosis jangkitan saluran kencing. Komposisi medium budaya direka untuk pertumbuhan patogen kencing yang baik dan sesuai untuk kuantifikasi unit pembentukan kolon (UFC).

Medium kultur cled tidak selektif, kerana mikroorganisma gram -negatif dan gram -positif dapat tumbuh di dalamnya. Tetapi ini bukan masalah, kerana kebanyakan jangkitan kencing disebabkan oleh satu jenis mikroorganisma.

Sekiranya jangkitan polimikrob, 2 atau 3 bakteria yang berbeza dapat dicapai, tetapi sangat jarang berlaku, dan kebanyakan masa mereka tercemar.

Antara bakteria gram -negatif yang boleh tumbuh dalam medium ini adalah bacilli milik keluarga Enterobacteriaceae dan bacilli enterik yang lain, yang paling sering diasingkan uroopathogens dalam sampel air kencing yang berikut: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Morganella Morganii, Pseudomonas aeruginosa, dalam kalangan yang lain.

Juga, di antara bakteria gram -positif yang boleh tumbuh dalam medium ini adalah Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophytic, Enterococcus faecalis, Streptococcus agalactiae, Chorynebacterium sp, Lactobacillus sp spel Dan mereka juga boleh menanam ragi, seperti kompleks Candida albicans.

Walau bagaimanapun, disebabkan oleh komposisi kimia persekitaran, ia tidak membenarkan pertumbuhan beberapa patogen genitourinary yang menuntut, seperti Neisseria Gonorrhoeae, Gardnerella Vaginalis, dalam kalangan yang lain.

Asas Agar Cled

Medium kultur cled mempunyai sebagai sumber ekstrak tenaga daging, kasein terhidrolisis dan hidrolisis gelatin hydrolyz. Mereka memberikan nutrien untuk pembangunan bakteria yang sedikit menuntut.

Ia juga mengandungi cystine, asid amino yang membolehkan pertumbuhan koliform, dibezakan dengan saiznya yang kecil.

Boleh melayani anda: faktor virulensi

Ia juga mengandungi sebagai laktosa karbohidrat yang boleh ditapai, jadi media ini berbeza, dapat membezakan bakteria penapaian laktosa bukan fermentasi.

Bakteria penapaian mengubah pH sederhana dengan pengeluaran asid, membangunkan koloni kuning, sementara bakteria tidak berpakaian tidak menghasilkan perubahan dalam medium, oleh itu, mereka mengambil pewarna agar asal, warna hijau.

Reaksi penapaian diturunkan terima kasih kepada kehadiran penunjuk pH, yang dalam medium ini adalah bromotimol biru.

Sebaliknya, kepekatan rendah elektrolit sederhana menghalang pertumbuhan invasif biasa genus Proteus, dipanggil kesan swarming. Ini menghasilkan kelebihan berkenaan dengan media lain, kerana ia membolehkan pengiraan UFC, termasuk jika jantina hadir Proteus.

Walau bagaimanapun, kepekatan elektrolit yang rendah menghalang pertumbuhan beberapa spesies genus Shigella, Ini menjadi kelemahan berkenaan dengan media lain.

Yayasan Agar Cled (Bevis)

Terdapat variasi atau pengubahsuaian medium ini, yang dibuat oleh Bevis, yang menggabungkan komposisi fuchsin asid asal (Andrade). Yang sama bertindak bersama bromotimol biru untuk membezakan bakteria penapaian dari tidak berpakaian.

Perbezaan antara persekitaran konvensional dan diubahsuai adalah warna yang diadopsi oleh koloni. Dalam kes bakteria penapaian laktosa, koloni memperoleh warna oren kemerahan dengan halo merah jambu atau merah, sementara tidak fermentasi adalah kelabu-rahang.

Aplikasi

CLED AGAR digunakan semata -mata Untuk sampel sampel air kencing. Penggunaan medium ini sangat kerap di makmal Eropah, sementara di Amerika ia kurang digunakan.

Boleh melayani anda: Amensalisme: Ciri -ciri, Contoh, Perbezaan dengan Dinerisme

Pengumpulan sampel mesti memenuhi parameter tertentu untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai, termasuk:

Tidak mengambil antibiotik sebelum mengambil sampel.

Sebaiknya ambil air kencing jam pertama pagi, kerana ia lebih tertumpu, apabila tidak mungkin mengambil sampel dengan kaedah invasif.

Basuh alat kelamin dengan baik sebelum mengambil sampel.

Buang jet pertama kencing dan kemudian letakkan bekas.

Kumpulkan antara 25 hingga 30 ml air kencing dalam bekas steril yang dilabelkan dengan baik.

Segera ambil makmal yang dikelilingi oleh ais.

Ia mesti diproses sebelum 2 jam dikeluarkan atau disejukkan pada suhu 4 ° C selama maksimum 24 jam.

Sampel air kencing

Sampel air kencing mesti dicairkan 1:50.

Untuk pencairan, colloqar 0.5 ml air kencing pesakit dan cair dengan 24.5 ml larutan fisiologi steril. Ukur 0.1 ml air kencing dicairkan dan ditabur oleh permukaan dengan spatula drigalski pada medium cled.

Ini adalah kaedah yang ditunjukkan untuk mengira koloni. Itulah sebabnya ia digunakan dalam sampel air kencing, kerana hasilnya mesti dinyatakan dalam UFC/ml.

Untuk kuantiti koloni yang diperoleh, teruskan seperti berikut: mengira koloni plat dan berlipat ganda dengan 10 dan kemudian dengan 50. Inilah jumlah urin UFC/ml.

Tafsiran

Entiti di atas 100.000 UFC/ml -Indica jangkitan kencing.

Encouncing di bawah 1000 UFC/ml- tidak ada jangkitan.

Antara 1000-10.000 ufc/ml -dudoso, kemungkinan pencemaran, ulangi sampel.

ID

Gram hendaklah dibuat ke tanah jajahan yang ditanam di Cled.

Boleh melayani anda: Catalase: ciri, struktur, fungsi, patologi

Contohnya, jika ia adalah bacillus gram -negatif, ia akan disemai di MacConkey agar, di mana penapaian atau tidak laktosa disokong. Di samping itu, agar berkhasiat dilampirkan untuk melaksanakan ujian oksidase.

Sekiranya Gram mendedahkan kelapa gram -positif, ia boleh tertakluk kepada Agar Mannitol masin dan Agar berkhasiat. Pada yang terakhir ujian catalase dijalankan. Akhirnya, jika ragi diperhatikan, ia akan disemai pada sabouraud agar.

Ramai makmal mengabaikan penggunaan medium yang dikeliling.

Penyediaan

Dalam felola dengan liter air suling, larut 36.2 gr grand serbuk beralih. Setelah 5 minit rehat, panaskan agar yang selamat, bercampur -campur sehingga ia mendidih selama 1 minit.

Kemudian mensterilkan pada 121 ° C selama 15 minit dalam autoklaf. Masa selesai, tarik balik dari autoklaf dan biarkan sejuk sehingga suhu 45 ° C dicapai. Seterusnya, ia dihidangkan antara 15-20 ml pada setiap petri steril.

Prosedur yang disampaikan oleh pinggan mesti dijalankan di dalam loceng aliran laminar atau di hadapan Bunsen's lebih ringan, untuk mengelakkan pencemaran.

Plat yang disajikan dibenarkan untuk menguatkan, memerintahkan dalam bentuk terbalik dan disimpan dalam peti sejuk (2-8 ° C) sehingga digunakan.

PH akhir medium yang disediakan mestilah pada 7.3 ± 0.2.

Rujukan

1. Cadangan untuk diagnosis mikrobiologi jangkitan kencing. Chil. Infectol. Pulih dari Scielo.org.
2. Separuh berputar. Pulih dari Britanialab.com.