Agensi, Penyediaan dan Kegunaan Bismuth Sulfite

Dia Bismuth Sulphite Agar Ia adalah cara budaya yang kukuh, selektif dan pembezaan, yang dirumuskan khas untuk pengasingan Salmonella enterica subgrupo enterica typhi seretypo, Antara spesies lain Salmonella. Persekitaran ini dikenali sebagai BSA bersetuju dalam Bahasa Inggeris Bismuth Sulfite agar.

Formula Agar Bismuth Sulphite yang asal telah diwujudkan pada tahun 1927 oleh Wilson dan Blair (glukosa bismut sulphite medium besi); Ini mengandungi natrium sulfit, glukosa, larutan bismut, ammonium sitrat, sulfat ferus dan penambah agar.

48 -Hour Pertumbuhan Salmonella Sp Incubation di Bismuth Sulphite Agar. Sumber: Pixnio.com pengarang: Dr. W. R. Erving, USCDCP

Pada masa kini terdapat pengubahsuaian medium asal, terdiri daripada ekstrak daging, peptones daging dan kasein, penunjuk bismut sulfit, glukosa, disodium fosfat, sulfat ferus, hijau terang dan agar-agar.

Terdapat banyak cara untuk pengasingan spesies Salmonella, tetapi apabila ia memulihkan serotype Typhi, agar Bismut Sulphite memberikan kelebihan yang luar biasa terhadap mereka, kerana dalam majoriti pemulihan yang sangat rendah atau sifar mikroorganisma ini diperolehi.

Walau bagaimanapun, perlu menggunakan lebih daripada satu jenis medium apabila mengasingkan enteropatogenik, kerana Bismuth sulphite agar kurang berkesan untuk spesies Salmonella yang lain dan untuk genus Shigella, yang menghalang atau berkembang dengan sangat buruk dalam agar ini.

Harus diingat bahawa semua spesies Salmonella, serotype Typhi adalah salah satu enteropatogen yang paling penting dalam manusia, ini satu -satunya takungan. Serovariety ini menghasilkan demam kepialu, gastroenteritis, bakteria dan septikemia.

Atas sebab ini, relevan untuk memasukkan agar ini apabila sampel air, najis atau makanan dianalisis di mana kehadiran anda disyaki.

[TOC]

Asas

Oleh kerana kebanyakan media penanaman, agar sulfit bismut mengandungi bahan pemakanan untuk mempromosikan perkembangan bakteria, seperti peptones dan ekstrak daging. Begitu juga, fungsi glukosa sebagai sumber tenaga dan karbon.

Boleh melayani anda: elemen biogenetik

Sekarang, tidak semua bakteria akan tumbuh dalam medium ini, kerana Bismuth sulphite agar adalah medium selektif. Ini mengandungi sebatian yang menghalang pertumbuhan mikroorganisma positif gram dan bakteria negatif gram tertentu. Sebatian ini adalah: penunjuk sulfit bismut dan hijau terang.

Sebaliknya, disodium fosfat mengekalkan osmolariti dan pH medium.

Di samping itu, Bismuth Sulphite agar adalah medium pembezaan terima kasih kepada kehadiran sulfat feros, yang menunjukkan pembentukan h₂S.  H₂S yang dibentuk oleh bakteria bertindak balas dengan sulfat ferus dan membentuk pendahuluan yang tidak dapat diselesaikan dengan jelas.

Akhirnya, Agar -agar memberikan konsistensi yang kukuh kepada alam sekitar.

Penyediaan

Timbang 52.3 gr medium dehidrasi dan larut dalam satu liter air. Panaskan untuk mendidih campuran selama 1 minit dengan pengadukan yang kerap, sehingga pembubarannya. Jangan terlalu panas. Medium ini tidak disterilkan dalam autoklaf, kerana haba yang melampau merosakkan medium budaya.

Biarkan sejuk pada suhu 45 ° C dan goncang sebelum berkhidmat di plat steril petri. Disyorkan untuk membuat plat dengan ketebalan yang baik. Untuk ini, 25 ml mesti dicurahkan ke dalam setiap pinggan. Biarkan menguatkan. Seperti cara yang tidak disterilkan, adalah perkara biasa untuk kegunaan segera untuk dicadangkan.

Walau bagaimanapun, kajian oleh D'Aust pada tahun 1977, menunjukkan bahawa terdapat pemulihan yang lebih baik Salmonella typhimurium dan Salmonella Enteritidis Oleh kerana usia sederhana bismut sulfite, prestasi serovari tidak terjejas Typhi dan Parathyphi b.

D'Aous mengesyorkan menggunakan plat ke hari ke -4 penyejukan, walaupun ia memberi amaran bahawa sebagai umur sederhana selektiviti berkurangan, mengembangkan lebih mudah Proteus vulgaris.

Itulah sebabnya, untuk sampel yang sangat tercemar, seperti najis, lebih baik menggunakan medium yang baru disediakan. Jika tidak, gunakan hari ke -4 persiapannya. Penulis lain mengesyorkan menggunakan plat sehari selepas penyediaannya, disimpan dalam penyejukan.

Boleh melayani anda: uracil: struktur, fungsi, sifat, sintesis

Plat yang disejukkan harus marah sebelum menggunakan. PH sederhana mestilah 7.5 ± 0.2. Warna medium yang belum dibayar adalah kuning air dan disediakan adalah Opalescente Grey Grey.

Aplikasi

Antara sampel yang boleh disemai dalam medium ini adalah sampel najis, air penggunaan atau makanan dan makanan.

Untuk meningkatkan isolat, adalah disyorkan untuk melakukan rawatan pra-pengayaan dengan sup laktosa dan selepas pengayaan dengan sup tetrationat atau selenito sup sup, sebelum menyemai bismut sulphite agar agar sulfite.

Plat diinkubasi pada suhu 35 ° C ± 0.2 selama 24 hingga 48 jam, dalam aerobiosis.

Ciri -ciri koloni di Bismuth Sulphite Agar

Koloni Salmonella Typhi Mereka biasanya dilihat di agar ini dalam masa 24 jam dengan pusat hitam dan dikelilingi oleh halo hijau terang. Sementara, dalam 48 jam hitam bertukar sepenuhnya disebabkan oleh pembentukan sulfida hidrogen.

Salmonella parathyphi a Membentangkan koloni dengan ciri -ciri berubah -ubah. Selepas 18 jam pengeraman, koloni hitam, hijau atau telus dapat diperhatikan, dengan penampilan mucoid. Sementara, pada 48 jam mereka diperhatikan sepenuhnya hitam dan kadang -kadang dengan kecerahan logam yang jelas.

S. Parathyphi a Ia cenderung untuk membasahi medium di sekitar koloni.

Salmonella sp Tanah hitam atau kelabu, dengan atau tanpa logam terang, maying menjadi permukaan atau tidak.

Strain koliform, biasanya, dihalang sepenuhnya, tetapi jika mereka tumbuh, mereka berkembang sebagai koloni hijau atau coklat yang legam dan kecerahan logam. Jangan pewarna medium di sekitar koloni.

Batasan

-Inokulum yang sangat lemah boleh menyebabkan koloni Salmonella Typhi hijau muda, tidak disedari dan melaporkan budaya sebagai negatif.

Boleh melayani anda: cabang fisiologi

- Bismuth sulphite agar dapat menghalang pemulihan beberapa spesies salmonella seperti S. Sendai, s. Berta, s. Gallinarum, s. Abortus-equi.

-Medium ini menghalang kebanyakan spesies genus Shigella.

- S. Typhi dan s. Arizonae Mereka boleh memberikan koloni yang sangat serupa.

-Koliform yang dihasilkan oleh h₂S seperti Proteus dan Citrobacter menghasilkan koloni yang serupa dengan Salmonella, jadi perlu melakukan ujian pengenalan biokimia.

-Estria yang baik mesti dilakukan untuk mendapatkan koloni terpencil; Ini adalah satu -satunya cara untuk memerhatikan ciri -ciri khas koloni genus Salmonella.

QA

Untuk kawalan kemandulan, plak diinkubasi tanpa inokulasi pada suhu 37 ° C, diharapkan tidak ada pertumbuhan atau perubahan warna.

Untuk kawalan kualiti, anda boleh menanam strain yang diketahui seperti:

Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhi ATCC 19430, Shigella Flexneri ATCC 12022, Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Diharapkan itu Escherichia coli dan Shigella Flexneri masing -masing menghalang membangunkan koloni coklat kehijauan dan coklat masing -masing. Walaupun kedua -dua Salmonglars mesti mempunyai perkembangan yang sangat baik dengan koloni hitam dengan kecerahan logam, dan akhirnya Enterococcus faecalis mesti dihalang sepenuhnya.

Rujukan

1. Wilson, w., & E. M. MCV. Blair. Penggunaan medium besi sulfite bismut glukosa untuk pengasingan B. Typhosus dan B. Proteus. Jurnal Kebersihan, 1927; 26(4), 374-391. Diambil dari .Jstor.org
2. D'Aust JY. Kesan Keadaan Penyimpanan Prestasi Bismut Sulfite Agar. J Clin Microbiol. 1977; 5 (2): 122-124. Terdapat dalam: NCBI.NLM.NIH.Gov
3. Makmal IVD. Bismuth-sulfite agar menurut Wilson-Blair. 2009. Tersedia di: bismuthsulfitagar_span_jan_2009%20 (2).Pdf
4. Makmal Himedia. Bismuth Sulphite Agar. 2017. Terdapat di: Himediabs.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.Ke. Argentina.
6.  Morales R, dari La Cruz D, Leyva G dan Ybarra M. Kualiti bakteria susu kambing mentah yang dihasilkan di Miravalles, Puebla. Rev mex of ing chem 2012; 11 (1): 45-54