Tepung jagung. Asas, penyediaan dan penggunaan

Dia Agar tepung jagung Ia adalah medium budaya yang kukuh, kuasa pemakanan yang rendah, berguna untuk sub-budaya Candida albicans. Dalam bahasa Inggeris ia dikenali sebagai Agar Makanan Jagung.

Cornmeal konvensional sederhana mempunyai komposisi yang sangat mudah, mengandungi jagung, agar dan air. Oleh kerana tahap pemakanan yang rendah, ia sesuai untuk menggunakannya dalam penyelenggaraan strain kulat untuk tempoh masa yang sederhana, terutamanya kulat hitam.

Ke. Perwakilan Grafik Kompleks Candida Albicans di Cornmeal Agar. B. Clamidosporas dari Candida Albicans Complex View ke mikroskop, terbentuk dalam tepung jagung. Sumber: a. Grahamcolm [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/lesen/by-sa/3.0)]/ b. Oleh: CDC/Dr. William Kaplan, ihsan: Perpustakaan Imej Kesihatan Awam.

Sporulasi kompleks Candida albicans Ia disukai dalam medium ini, jika 1% daripada tween 80 ditambah semasa penyediaan agar. Pembentukan clamidospores adalah ciri spesies ini dan praktikalnya satu -satunya yang mempengaruhi manusia.

Terdapat spesies lain yang membentuk clamidospores, tetapi tidak mungkin mereka mempengaruhi manusia, seperti Candida australis, hadir dalam kotoran penguin, atau C. Clausenii, yang jarang dijumpai. Juga, sangat spesies C. Stellatoid dan C. tropika Mereka boleh membentuk mereka.

Sebaliknya, penambahan glukosa kepada jagung sederhana nikmat pembentukan pigmen dalam strain dari Trichophytom rubrum.

Adalah penting untuk menyerlahkan bahawa terdapat kulat yang tidak membentuk hyphaif, atau pseudohifas dalam kejang cornmeal, seperti Cryptococcus neoformans, membezakan dari genre lain.

Agar tepung jagung boleh disediakan di makmal atau media komersial juga boleh digunakan.

[TOC]

Asas

Tepung Jagung adalah substrat, agar adalah agen pengukuhan dan air adalah pelarut.

Agar tepung jagung boleh ditambah dengan tween 80 (poliester 80 sorbitita monoolate atau polysorbate). Sebatian ini mengurangkan ketegangan permukaan alam sekitar oleh kuasa pengemulinya.

Boleh melayani anda: Phosphatidylinositol: Struktur, Latihan, Fungsi

Ia juga mewujudkan suasana yang bermusuhan yang menghalang pendaraban sel yang dibesar -besarkan dan merangsang pertumbuhan hyphae, juga memihak kepada pengeluaran clamidospores; Yang terakhir dianggap struktur rintangan. Struktur ini membantu dalam mengenal pasti spesies Candida albicans.

Bagi bahagiannya, glukosa dalam medium ini meningkatkan kapasiti pembentukan pigmen beberapa kulat.

Harus diingat bahawa jagung sederhana dengan glukosa tidak menyampaikan demonstrasi clamidospores dalam cOmplejo Candida Albicans.

Penyediaan

Apar tepung jagung buatan sendiri

Berat 47 gr jagung kuning dan larut dalam 500 ml air suling. Haba hingga 60 ºC, sementara penyediaannya gelisah dalam tempoh 1 jam. Kemudian penapis melalui sekeping kain kasa dan kapas, secara pilihannya dapat ditapis semula melalui kertas penapis Whatman No.

Lengkapkan kelantangan pada 1000 ml dengan air suling. Masukkan 17 gr dalam air, panas untuk larut. Autoclavar selama 15 minit pada 121 ° C.

Hidangkan di Plat Steril Petri. Simpan di dalam peti sejuk.

Warna medium yang disediakan adalah putih dengan penampilan yang kental.

Sekiranya anda ingin menyediakan jagung jagung dengan glukosa kepada penyediaan yang diterangkan di atas untuk menambah 10 gr glukosa.

Agar Cornmeal Commercial

Timbang 17 gr medium dehidrasi dan larut dalam 1 liter air suling. Campuran boleh dipanaskan, kacau perlahan untuk dibubarkan sepenuhnya. Sterilkan dalam autoklaf pada 121 ºC, 15 lb, selama 15 minit.

Tuangkan plat steril petri. Biarkan menguatkan. Melabur dan simpan di peti sejuk sehingga digunakan. Marah sebelum menggunakan.

PH mestilah 6.0 ± 0.2 hingga 25 ºC.

Tepung jagung dengan tween 80

Untuk mematuhi piawaian ISO 18416, agar Cornmeal mesti disediakan seperti berikut:

Boleh melayani anda: coenzyme asetil ke

Timbang 65 gr seliter dan tambahkan 10 ml tween 80. Panaskan dan rebus selama beberapa minit sehingga anda larut, berhati -hati untuk tidak terlalu panas. Mensterilkan pada 121 ºC selama 15 minit.

Tepung jagung dengan glukosa

Untuk meningkatkan kekuatan kromogen dari koloni Trichophyton Rubrum dan membezakannya dari T. Mentagrophytes, 0.2% glukosa ke formula asal boleh ditambah. Ia tidak perlu mempunyai tween 80, kerana glukosa menghalang pembentukan clamidospores.

Gunakan

Terutamanya penggunaan agar Cornmeal bertujuan untuk mengkaji strain Candida, membantu pengenalpastiannya melalui pemerhatian ciri chloidospores dalam spesies Albicans. Iaitu penggunaan agar ini berfungsi sebagai kaedah tambahan untuk mengenal pasti ragi ini.

Dalam agar ini dapat mengembangkan spesies saprofitik dan patogen, tetapi setiap bentuk struktur mycelial ciri. Sebagai contoh, spesies genus torulopsis tidak menghasilkan miselium dan menghasilkan semula hanya oleh blastoconidia.

Begitu juga, spesies trichhosporon dan geotrichum menghasilkan arthroconidia dalam tepung jagung dan kadang -kadang sukar untuk dibezakan antara satu dan yang lain.

Arthroconidia Genotrichum menghasilkan lanjutan hyphae menyerupai tongkat hoki.

Juga pengeluaran pigmen menggunakan agar cornmeal yang disusun glukosa berguna dalam pengenalpastian Trichophytom rubrum.

Disemai

Di tepung tepung agar koloni yang mencurigakan Candid. Medium disemai dan diinkubasi pada 22 ºC selama 24 hingga 48 jam. Masa inkubasi boleh dilanjutkan jika perlu.

Demonstrasi clamidospores

Untuk tujuan ini, Agar tepung jagung dengan tween 80 mesti disuntik menggunakan teknik dalmau. Kaedah ini terdiri daripada mengambil dengan platinum mengendalikan sebahagian daripada koloni yang mencurigakan dan membuat tiga pemotongan selari di tengah menjaga pemegang pada 45º. Potongan mesti dipisahkan pada jarak 1 cm antara satu dan yang lain.

Boleh melayani anda: Flora dan Fauna dari Afrika: Spesies Wakil

Selanjutnya, objek yang terdahulu yang terdahulu di atas tanda regangan yang ditanam diletakkan, sehingga separuh tertutup dan yang lain ditemui.

Inkubasi plat yang ditanam pada 30 ° C selama 48-72 jam dan kemudian memeriksa mikroskop melalui penutup.

Penyelenggaraan strain kulat

Untuk penyelenggaraan strain plak yang ditanam dan banjir disimpan di dalam peti sejuk (4 hingga 8 ºC). Dengan cara ini mereka boleh bertahan beberapa minggu dan digunakan untuk tujuan pengajaran atau penyelidikan.

QA

Untuk kawalan kemandulan, plat tanpa inokulasi pada suhu bilik diinkubasi, diharapkan tidak ada pertumbuhan atau perubahan warna.

Untuk kawalan kualiti, anda boleh menanam strain yang diketahui seperti: Staphylococcus aureus, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus Niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

Keputusan yang diharapkan adalah perencatan separa untuk S. Aureus dan Dan. coli. Walaupun pertumbuhan yang memuaskan dijangka di seluruh strain.

Aspergillus Niger Ia tumbuh dengan koloni hitam dan sporulasi dalam masa kira -kira 5 hari pengeraman.

Candida albicans Koloni leaveaduriform dengan pengeluaran clamidospores.

Saccharomyces cerevisiae menghasilkan sel yis besar.

Batasan

Endapan kuning terbentuk di bahagian bawah pinggan yang tidak boleh dikelirukan dengan koloni.

Rujukan

1. Makmal Neogen. Agar makan jagung. Terdapat di: FoodSafety.Neogen.com.
2. Media Penanaman Microkit. Agar makan jagung. Terdapat dalam: Budaya Media.com.
3. Linares M, Solís F. Panduan Pengenalpastian Ragi. Terdapat di: http: // www.panduan.Saya akan menghidupkan semula.
4. Urcia F, Guevara M. REV. Peru Med.Exp. Kesihatan Awam, 2002; 19 (4): 206-208. Terdapat di: Scielo.com
5. Rumah rumah g. Mycology Umum. 1994.  Edisi ke -2. Universiti Pusat Venezuela, Edisi Perpustakaan. Venezuela Caracas.
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.Ke. Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologi. Edisi ke -5. Pan -American Editorial S.Ke. Argentina.
8. Istana e. Kajian perbandingan beberapa kaedah makro dan mikroskopik untuk pengasingan dan pengiktirafan genus Candida. REV. Sains Kimia Farmaseutikal Kolombia. 1970; 3 (1): 33-57. Terdapat dalam: Sains.i.Edu.co