Tripticaseína soya sup apa, asas, penyediaan, kegunaan

Dia Tripticaseína soya sup Ia adalah medium budaya cecair, sangat berkhasiat dan tidak selektif. Kerana fleksibiliti yang hebat, ia adalah salah satu media kultur cecair yang paling biasa digunakan di makmal mikrobiologi.

Ia juga dikenali dengan nama soya soya triptik Tryptic saya Sup atau cst). Kegunaannya sangat bervariasi kerana komposisi mereka. Ia terdiri daripada tripteine, peptone kacang soya, natrium klorida, dipotassium dan glukosa fosfat.

Tripticaseína soya soya disemai dengan ketegangan Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 di mana pengeluaran pigmen diperhatikan. Sumber: Foto yang diambil oleh pengarang MSC. Marielsa Gil.

Ia mampu menghasilkan semula bakteria patogen yang penting secara klinikal, termasuk yang menuntut dari sudut pemakanan dan bakteria anaerobik. Beberapa kulat oportunistik dan pencemar juga boleh berkembang dalam medium ini.

Oleh kerana kuasa pemakanan yang tinggi, ia mempunyai kepekaan yang tinggi untuk mengesan pencemaran mikrob, oleh sebab itu ia dipilih oleh perkhidmatan pemeriksaan kesihatan haiwan dan tumbuhan USDA untuk analisis mikrobiologi vaksin.

Begitu juga, sup soya tripticaseína memenuhi tuntutan farmakopoans yang berbeza (EP Eropah, JP Jepun dan USP Amerika Utara) untuk kajian mikrobiologi produk di peringkat perindustrian, seperti kosmetik dan makanan.

Sebaliknya, patut disebutkan bahawa walaupun penggunaannya yang hebat ini agak ekonomi, jadi ia adalah berpatutan untuk kebanyakan makmal mikrobiologi. Di samping itu, sangat mudah untuk disediakan.

Asas

Tripteine, Peptone dan Glukosa memberikan sifat pemakanan yang penting untuk menjadikannya medium yang ideal untuk pembangunan mikrob yang pesat.

Boleh melayani anda: Taksonomi Linnean makhluk hidup

Kira -kira 6 hingga 8 jam inkubasi Anda sudah dapat menghargai pertumbuhan dalam kebanyakan mikroorganisma. Walau bagaimanapun, terdapat ketegangan pertumbuhan perlahan yang boleh berkembang pada hari -hari terakhir.

Natrium klorida dan dipotasic fosfat bertindak sebagai keseimbangan pengatur osmotik dan pH. Kehadiran pertumbuhan dibuktikan oleh kemunculan kekeruhan di tengah; Sekiranya tidak ada pertumbuhan, medium tetap lutut.

Kerana warna cahaya adalah mungkin untuk memerhatikan pengeluaran pigmen, seperti yang ditunjukkan dalam imej yang terletak pada permulaan artikel, yang sepadan dengan pigmen yang dihasilkan oleh Pseudomonas aeruginosa. 

Penyediaan

-Tripticaseína soya sup

Untuk menyediakan sup soya triptych, 30 gr medium komersial yang kering mesti ditimbang dalam baki digital. Kemudian larut dalam liter air suling yang terkandung dalam fixola.

Campuran dibiarkan berehat selama 5 minit dan seterusnya mengambil sumber haba untuk membantu pembubaran sederhana. Ia mesti digelar dengan kerap semasa mendidih setiap 1 minit.

Setelah dibubarkan, ia diedarkan dalam tiub saiz yang sesuai seperti yang diperlukan. Anda boleh menggunakan tiub dengan topi kapas atau tapas baquelita. Selanjutnya, tiub disterilkan dalam autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit.

PH sederhana mestilah 7.3 ± 0.2

Perlu dipertimbangkan bahawa warna budaya kering adalah jelas dan harus disimpan antara 10 hingga 35 ° C, di tempat yang kering. Walaupun sup yang disediakan adalah ambar cahaya dan mesti disimpan di dalam peti sejuk (2 hingga 8 ° C).

-Varian soya soya tripticase

Sup soya tripticasein yang diubah suai boleh disediakan dengan menambahkan garam hempedu dan novobiocin untuk melakukannya selektif untuk pengasingan Dan. coli. Pilihan lain untuk tujuan yang sama adalah untuk menyediakan sup soya kedelai yang ditambah dengan vancomycin, cephixime dan telurito (2.5 μg/ml).

Boleh melayani anda: 25 contoh pembiakan aseksual

Sebaliknya, lebih banyak glukosa (0.25%) boleh ditambah ke sup soya tripticaseína apabila objektifnya adalah untuk merangsang pembentukan biofilm.

Gunakan

Cukup berkhasiat untuk membolehkan pertumbuhan bakteria menuntut atau menjengkelkan seperti Streptococcus pneumoniae, Streptococcus SP dan Brucella SP, Tidak perlu menambah darah atau serum.

Begitu juga, beberapa kulat dapat berkembang di sup ini, seperti Kompleks Candida Albicans, Aspergillus sp dan Histoplasma capsulatum.

Di samping itu, medium ini di bawah keadaan anaerobik sangat sesuai untuk memulihkan bakteria milik Gender Clostridium, serta bakteria anaerobik yang tidak sporulasi kepentingan klinikal.

Jika 6.5% natrium klorida ditambah, ia boleh digunakan untuk pertumbuhan enterococcus dan streptococcus kumpulan D lain D.

Di peringkat penyelidikan, ia sangat berguna dalam pelbagai protokol, terutamanya dalam kajian biofilm atau biofilm yang membentuk bakteria. Ia juga digunakan untuk menyediakan penggantungan bakteria Mac 0.5% yang diperlukan untuk melaksanakan antibiogram oleh kaedah Kirby dan Bauer.

Dalam kes ini, 3 hingga 5 koloni penampilan yang sama diambil dan diemulsi dalam 4-5 ml soa soa tripticasein. Kemudian ia diinkubasi selama 2 hingga 6 jam pada 35-37 ° C dan seterusnya sesuai dengan kepekatan yang dikehendaki menggunakan larutan garam steril. Tripticasein soya bangun tidak boleh digunakan dari 18 hingga 24 jam pengeraman.

Disemai

Sampel boleh ditabur secara langsung atau koloni tulen yang diambil dari cara terpilih boleh dikenakan. Inokulum mestilah kecil supaya tidak awan medium sebelum pengeraman.

Biasanya ia diinkubasi pada suhu 37 ° C dalam aerobiosis selama 24 jam, tetapi keadaan ini mungkin berbeza -beza bergantung kepada mikroorganisma yang dicari. Ia juga boleh diinkubasi dalam keadaan anaerobiosis pada suhu 37 ° C selama beberapa hari jika perlu. Sebagai contoh, dalam menuntut mikroorganisma atau pertumbuhan perlahan, ia boleh diinkubasi sehingga 7 hari.

Boleh melayani anda: Agar kentang dextrose: asas, penyediaan dan penggunaan

Dalam analisis mikrobiologi bahan farmaseutikal - seperti vaksin - protokol lebih ketat. Dalam kes ini, sup tanpa pertumbuhan tidak dikesampingkan sehingga ia memenuhi 14 hari pengeraman berterusan.

QA

Dari setiap lot yang disediakan, 1 atau 2 tiub harus diinkubasi untuk menunjukkan kemandulannya. Mesti kekal tanpa perubahan.

Anda juga boleh menanam ketegangan yang diketahui untuk menilai tingkah laku anda. Antara strain yang boleh digunakan ialah:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, Staphylococcus aureus ATCC 6538 atau 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 14028.

Dalam semua kes, pertumbuhan mesti memuaskan di bawah keadaan atmosfera dan suhu yang mencukupi untuk setiap mikroorganisma.

Batasan

-Penapaian glukosa menyebabkan keturunan pH sederhana oleh pengeluaran asid. Ini boleh menjadi tidak baik untuk kelangsungan hidup beberapa mikroorganisma sensitif keasidan.

-Ia tidak disyorkan untuk penyelenggaraan strain, kerana sebagai tambahan kepada keasidan, bakteria selepas beberapa hari nutrien ekzos dengan pengumpulan akibat bahan toksik yang menjadikan persekitaran yang tidak ramah.

-Anda mesti bekerja menjaga semua protokol kemandulan, kerana sup mudah dicemarkan.

-Setelah menyediakan sup soya tripticasein, ia tidak sepatutnya cuba memindahkan sup untuk tiub steril yang lain, kerana jenis manuver ini sangat terdedah kepada pencemaran.

Rujukan

1. Makmal Britania. Tripteine ​​soya sup. Terdapat di: Britanialab.com
2. Makmal MCD. Tripticaseína soya sup. Terdapat di: sistem elektronik.com
3. Makmal Neogen.  Triptych soya sup. Terdapat di: FoodSafety.Neogen.com