Ciri -ciri, Jenis, Teknik dan Histologi Smear Darah

Dia Smear darah Ia adalah darah periferal yang dilanjutkan yang berfungsi untuk menganalisis komponen yang terdapat dalam peredaran darah. Pemerhatian menggosok darah.

Gosok darah.

Penyediaan menggosok darah. Sumber: Darah di kaca makmal. Domainpictures pub.jaring

Di dalamnya, keabnormalan dapat dikesan dalam bilangan sel, seperti: leukositosis atau leukopenia, limfositosis atau limfopenia, neutrofilia atau neutropenia, trombositosis atau thrombocytopenias dan eosinofilia dan eosinofilia. Keabnormalan juga boleh diperhatikan dalam bentuk dan saiz sel.

Di samping itu, adalah mungkin untuk mengesan pelbagai jenis anemia, leukemia dan parasit bakteria atau darah.

Untuk ini terdapat pelbagai jenis smear yang dijalankan bergantung pada tujuan kajian. Terdapat drop drop nipis dan smear titisan tebal. Smear ini berbeza dalam teknik pelaksanaan dan untuk tujuan kajian.

Titisan halus digunakan sebagai pelengkap untuk menyelesaikan hematologi. Ini menyediakan data formula leukosit, sebagai tambahan kepada analisis bentuk dan morfologi siri tiga sel yang membentuk darah: siri merah, siri putih dan platelet. Walaupun mereka juga berfungsi sebagai pelengkap kepada kajian penurunan tebal.

Penurunan tebal digunakan untuk diagnosis penyakit yang disebabkan oleh hemoparasit, seperti malaria atau malaria, toxoplasmosis, leishmaniasis, penyakit pyra, babesiosis dan microfilariasis.

[TOC]

Ciri -ciri smear darah

Gosok darah yang baik mesti memenuhi ciri -ciri tertentu. Antaranya mereka boleh disebutkan:

-Sampel mesti memenuhi keperluan kualiti minimum untuk menjadi wakil.

-Sampel mengambil harus dilaksanakan dengan baik.

-Pelaksanaan smear tepat pada masanya.

-Sekiranya dilakukan dengan darah vena, gunakan antikoagulan yang tidak mengubah sel dan campurkan tiub sebelum menggosok.

-Sekiranya ia dilakukan dengan darah kapilari, buang kejatuhan pertama.

-Yang dilanjutkan mestilah homogen. Ini menjamin bahawa sel -sel diedarkan secara merata dan analisis sel darah yang baik dapat dibuat, dari segi bentuk dan nombor.

-Sisi smear mesti lancar dari awal hingga akhir.

-Smear mesti menghormati margin 1 hingga 2 mm ke sisi slaid.

-Lapisan lanjutan mesti mengurangkan ketebalannya secara beransur -ansur dari awal hingga akhir (smear drop halus dengan kaedah slaid).

-Mesti dilabel dengan betul untuk mengelakkan kekeliruan sampel.

-Tetapkan dan pewarna dengan betul untuk pemerhatian yang jelas terhadap unsur -unsur darah.

-Biarkan smear kering sebelum menunggang penyediaan mikroskop. Penempatan minyak rendaman pada gosok basah.

Jenis Smear Darah

Smear darah periferal boleh diklasifikasikan sebagai drop nipis menggosok dan smear titisan tebal. Lapisan halus digunakan untuk mengkaji formula leukosit dan pemerhatian morfologi sel darah. Bakteria ekstraselular seperti strok intraselular dan hemoparasit, seperti Plasmodium, antara lain, antara lain, juga dapat dilihat, antara lain.

Dalam kejatuhan halus, anda dapat mengenal pasti spesies parasit, oleh itu, ia adalah teknik yang lebih spesifik daripada penurunan tebal, tetapi penurunan tebal lebih sensitif, kerana ia adalah teknik kepekatan yang digunakan untuk pencarian menyeluruh untuk hemoparasit ekstraselular.

Terdapat dua jenis smear drop halus: yang dibuat dalam lembaran slaid dan yang dibuat dalam penutup. Titisan tebal dilakukan pada slaid.

Teknik sampel darah

Smear darah boleh dibuat dari tusukan kapilari atau tembakan sampel vena dengan antikoagulan. Sekiranya dilakukan dari darah dengan antikoagulan, anda boleh menyediakan bau sehingga 2 jam setelah mengambil sampel.

Langkah berjaga -jaga menggunakan antikoagulan yang tidak mengubah sel darah harus diambil. Pilihan terbaik ialah EDTA. Sebaliknya, penggunaan antikoagulan seperti sitrat trisodik harus dielakkan.

Boleh melayani anda: sim medium: asas, penyediaan dan kegunaan

Sekiranya sampel diambil oleh tusukan kapilari, lanjutan bau harus dilakukan dengan segera, sebelum darah dibungkus.

Kejatuhan pertama mesti dibuang. Ini adalah teknik yang paling disyorkan untuk pemerhatian morfologi sel, kerana darah tidak mempunyai bahan tambahan.

Untuk pemerhatian hemoparasit, Solari dan kolaborator menyimpulkan dalam kerja penyelidikan mereka bahawa kedua -dua teknik (venopungsi dan kapilari) sama -sama cekap.

Jenis sampel darah: a. Tusuk kapilari. B. Tusukan vena. Sumber: a. Flickr.com b. Pxhere.com

Teknik untuk penjelasan smear darah

Gosok darah. Ia juga mungkin melalui peralatan automatik.

-Menggosok dalam slaid

Ini adalah teknik pilihan oleh kebanyakan makmal untuk manipulasi mudah mereka.

Dengan pipet pasteur, setetes darah tidak terlalu tebal, atau terlalu halus, di tengah salah satu hujung lembaran slaid bersih.

Dengan bantuan slaid lain dengan hujung beku, bau dibuat. Slaid beku diletakkan tegak di seberang tempat penurunan itu terletak.

Dia bersandar untuk membentuk sudut antara 30 - 45 ° dan slaid ke arah kejatuhan; Apabila menyentuhnya, ia mengembang secara linear di pinggir slaid frosted dan dengan pergerakan yang tetap dan ditakrifkan lembaran dikembalikan; Sebelum sampai ke akhir slaid naik.

Dengan cara ini lapisan homogen dilanjutkan di permukaan pemegang penerima.

Smear dibenarkan kering. Kemudian ia tetap dan bernoda dengan pewarnaan yang lebih baik. Ia dibenarkan kering sebelum memerhatikan mikroskop. Titisan minyak diletakkan di muka yang dilanjutkan dan diperhatikan pada mikroskop optik.

Smear darah dalam slaid. Imej atas: smear tanpa pewarna. Imej yang lebih rendah: smear dicelup. Sumber: Coinmac [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/lesen/by-sa/3.0)]

Bahagian smear yang dibuat pada slaid

Dalam jenis smear ini, tiga kawasan yang ditakrifkan dapat dibezakan: kepala, badan dan ekor. Kepala sepadan dengan kawasan di mana smear bermula, adalah kawasan paling tebal dan tidak baik untuk diperhatikan.

Tubuh adalah bahagian tengah atau pertengahan dari gosok.

Ekor sepadan dengan bahagian akhir smear; Di sini pengedaran tidak lagi seragam dan cenderung kehilangan morfologi erythrocytes.

Kawalan Kualiti dalam Teknik Pemegang

Dalam teknik ini dia memainkan peranan asas:

-Pembersihan dan degreasing slaid: menjamin gelongsor sampel yang baik.

-Saiz drop: dengan titisan yang sangat besar yang lebih tebal dan tebal akan diperoleh, dengan penurunan yang sangat kecil yang dilanjutkan akan lebih pendek dan lebih baik.

-Kelajuan yang digunakan untuk lanjutan: pada kelajuan yang lebih rendah, bau akan lebih halus, pada kelajuan yang lebih tinggi ini akan lebih tebal.

-Sudut pelaksanaan: pada sudut yang lebih rendah lebih halus akan menjadi bau, pada sudut tertinggi ia akan lebih tebal.

-Menggosok dalam penutup

Ia tidak digunakan secara meluas untuk menjadi kumbang.

Penurunan yang tidak terlalu tebal diletakkan, atau sangat halus, di tengah penutup. Segera penutup lain diletakkan di atas ini sedemikian rupa sehingga petua kedua -dua meliputi di luar, membentuk bintang.

Penurunan akan tersebar secara spontan di permukaan kedua -dua penutup. Apabila lanjutan selesai, setiap laminilla meluncur di seberang antara satu sama lain (satu ke kanan dan yang lain ke kiri) dengan cepat.

Teknik ini memberikan dua smear dan bukannya satu.

Boleh melayani anda: Kelebihan dan kekurangan pembiakan seksual

Mereka diletakkan kering dengan wajah yang dilanjutkan ke atas. Sekali kering, ia tetap dan bernoda dengan teknik keutamaan. Ia dibenarkan kering. Titisan minyak rendaman diletakkan dalam lembaran slaid, gosok diletakkan dengan wajah yang dilanjutkan dan diperhatikan dalam mikroskop.

Kawalan Kualiti dalam Teknik Cupbject

Untuk mendapatkan smear yang baik untuk teknik ini adalah penting:

-Pembersihan penutup (membantu untuk meluncur sampel yang baik).

-Saiz penurunan (mempengaruhi ketebalan lanjutan).

-Kelajuan yang mana penutupnya dipisahkan (mempengaruhi homogenitas yang dilanjutkan).

-Dengan peralatan automatik

Mereka boleh dilakukan melalui mana -mana pasukan ini: Spinner dan Autoslide.

Pemutar terdiri daripada meletakkan slaid dengan setitik darah pada hidangan sentrifugasi khas. Sampel disentrifugasi pada kelajuan tinggi; Dengan cara ini, homogen dan denda sampel terbentuk. Kelemahannya mempunyai kemungkinan menunjukkan hemolisis.

Autoslide adalah instrumen yang secara mekanikal melakukan pergerakan untuk pelaksanaan smear dalam slaid. Anda juga boleh membetulkan dan mewarnai smear. Ia juga boleh menyesuaikan diri dengan beberapa kaunter hematologi automatik.

Teknik Smear Tutup Tebal

Untuk mencari hemoparasit, disyorkan untuk membuat dua smear: satu dengan penurunan halus dan satu dengan titisan tebal.

Buat tusukan kapilari, bersihkan penurunan pertama. Letakkan kejatuhan halus pada slaid dan lakukan bau seperti yang dijelaskan sebelumnya. Untuk penurunan tebal, letakkan penurunan besar pada slaid lain dan lanjutkan dalam bentuk persegi 1.55 mm. Biarkan Dua Smear.

Pewarnaan pewarnaan

Bagi titisan yang baik, anda boleh menggunakan pewarnaan Giemsa atau Wright, antara lain. Untuk kejatuhan tebal, pewarnaan Giemsa atau May-Grunwald Giemsa disyorkan.

Pewarnaan Giemsa

Smear ditetapkan selama 3 minit dengan metanol, ia dikeringkan dan dibenarkan kering lagi. Kemudian smear ditutup dengan pewarnaan Giemsa selama 10-15 minit. Basuh dengan air suling dan biarkan kering. Untuk memerhatikan setitik minyak rendaman di mikroskop.

Pewarnaan Wright

Smear ditutup dengan pewarna wright selama 5 minit. Buang dan letakkan penyelesaian penampan pada pH 6, 8 selama 6 minit. Meniup penyediaan untuk homogenisasi. Basuh dengan air suling dan biarkan kering. Perhatikan mikroskop.

Jenis smear yang cacat

Ia berlaku dalam perantis dalam teknik drop halus dengan slaid.

Smear dengan kawasan ketebalan yang berbeza (halus dan tebal yang diselingi)

Ini kerana pergerakan yang dilaksanakan tidak tetap semasa yang dilanjutkan, membuat berhenti dan menetapkan semula.

Smear dengan sangat singkat

Mereka mempunyai 2 sebab: Satu adalah disebabkan oleh fakta bahawa slaid frosted telah dibangkitkan sebelum sampai ke hujung lembaran yang lain. Dalam kes ini ia sangat tebal dan pendek.

Sebaliknya, jika smear pendek tetapi nipis, itu adalah kerana saiz penurunannya sangat kecil.

Rubb

Ia membentangkan beberapa sebab: Satu adalah bahawa lagu frosted rosak, bahawa tekanan yang dikenakan pada slaid penerimaan meningkat pada masa menyelesaikan lanjutan atau bahawa lagu frosted slaid dibelanjakan.

Rubb

Mereka disebabkan oleh penggunaan smear lemak (tidak dibasuh dan degrar).

Smear sangat tebal atau sangat halus

Titisan terlalu besar akan menjana bau yang sangat tebal dari awal hingga akhir dan titisan sangat kecil smear yang sangat halus.

Histologi

Dalam smear darah anda dapat melihat sel darah. Antaranya adalah:

-Erythrocytes atau sel darah merah

Darah manusia, erythrocytes atau sel darah merah dan dua sel darah putih. Diambil dan diedit dari: viascos [cc by-sa 4.0 (https: // creativeCommons.Org/lesen/by-sa/4.0)].Pemerhatian anda adalah yang paling penting. Pada tahap ini, masalah anemia, talasemia, penyakit sumsum tulang, dan lain -lain dapat dikesan.

Bilangan erythrocytes atau sel darah merah adalah kira -kira 5 x 10⁶ mm3 pada lelaki dan 4.5 x 10⁶ Pada wanita. Sel Darah Merah dibentuk seperti cakera bicontik, dengan kelembutan pusat fisiologi. Mereka boleh diperhatikan secara berasingan (normal) atau membentuk susunan di Rouleaux (tidak normal).

Boleh melayani anda: Trehalosa: ciri, struktur, fungsi

Di dalam smear, kehadiran poiquilocytosis (erythrocytes pelbagai bentuk), anisositosis (erythrocytes pelbagai saiz), anisopoiquilocytosis (pelbagai bentuk dan saiz), anisocry (warna erythrobos (eryhrosysa yang tidak matang) )) dan makrosit (erythrocytes yang lebih besar).

Apabila mereka mempunyai kekurangan dalam jumlah hemoglobin dan kepelbagaian pusat, ia meningkat, dikatakan bahawa terdapat hipokrasi. Apabila siri merah biasa diperhatikan, ini akan dilaporkan sebagai normosis dan normokromik.

-Putih atau leukosit

sel darah putih

Jumlah biasa berkisar dari 5.000 hingga 10.000 mm³. Mereka diubah dalam proses berjangkit, dalam alahan dan leukemia. Dalam smear darah, beberapa jenis yang dijelaskan di bawah boleh dibezakan di bawah.

Neutrofil yang disegarkan

Mereka mewakili 55-65% daripada jumlah leukosit. Mereka mengukur antara 10-15 μm. Mereka mempunyai nukleus yang tersegmentasi atau lobed yang mengamalkan pelbagai morfologi, oleh itu ia dipanggil polimorfonuklear.

Mereka mempunyai granul neutrofilik yang banyak di sitoplasma mereka dan beberapa azurofil. Mereka meningkat dalam jangkitan bakteria (neutrofilia), penurunan jangkitan virus (neutropenia).

Anomali morfologi seperti pleocariocytosis (nukleus hyper-segmented), jatuh (sel tidak matang) atau makropolicitos (bujur dan saiz besar) dapat diperhatikan.

Perubahan lain:

-Granulasi toksik

-Neutrofil pelar pseudo (nukleus tidak hadir lobulasi atau bilobulasi).

-Badan Döhle: Kemasukan sitoplasma biru gelap.

-Peningkatan basofilia sitoplasma.

-Vacuolas intracitoplasmic.

-Picnosis Sel (kehilangan jambatan antarabangsa).

Eosinophils segmen

Mereka mewakili 1-3% daripada jumlah sel darah putih. Mereka mengukur 9-10 μm. Mereka dicirikan oleh kehadiran granul sitoplasma acidophilic yang berlimpah dan azurophile yang terhad. Nukleusnya mempunyai dua lobulasi. Jumlahnya meningkat dalam alahan dan penyakit asal parasit.

Basophils segmen

Mereka sangat jarang, mereka mewakili 0-1% leukosit. Mereka mengukur 10-12μm. Nukleus biasanya tepi tidak teratur dan boleh menjadi bilobed, tetapi ia tidak dipatuhi kerana jumlah besar basofil tebal dalam sitoplasma. Sangat jarang dapat dibasuh oleh basofilia.

Limfosit

Mereka adalah sel kecil dengan sitoplasma basofilik, dengan teras, ditakrifkan dengan baik, bulat, dengan kromatin pekat. Nukleus merangkumi hampir seluruh sel. Mereka mewakili 26-40% leukosit darah. Mereka meningkatkan jangkitan virus (limfositosis). Limfosit reaktif dapat diperhatikan.

Monosit

Sel yang lebih besar daripada limfosit, dengan sitoplasma yang lebih besar dan nukleus kromal oval ditambah LAX. Mereka mengukur 9-12μm. Sitoplasma banyak dan biasanya dilihat dalam warna kelabu pucat dengan teknik pewarnaan biasa. Antara perubahan, monosit yang dikosongkan dan monositosis dapat diperhatikan.

-Platelet

Mereka mengukur antara 1.5-3 μm. Bentuknya adalah bulat atau bujur. Nilai normal berkisar dari 150.000 hingga 350.000 platelet/mm3. Mereka dapat menurun dalam beberapa jangkitan virus. Mereka tidak mempunyai nukleus dan warna ungu. Keabnormalan dapat diperhatikan dalam siri ini, seperti makroplaquet atau mikroplack, thrombocytosis atau thrombocytopenia, dan serpihan platelet.

Unsur -unsur patologi

Parasit hematik

Dalam pelindung darah, hemoparasit dapat diperhatikan, seperti agen kausal malaria (parasit genus Plasmodium). Oleh itu, penting bahawa smear dianalisis secara manual, kerana pasukan automatik tidak disedari penemuan ini.

Bakteria

Dalam patologi seperti demam berulang atau penyakit Lyme, mungkin untuk memerhatikan ejen kausal anda. Dalam kes ini ia sepadan dengan spirochetes Borrelia Recurrenti Namun Borrelia Burgdorferi Dalam Smear Darah.

Sel -sel yang tidak matang

Kes -kes yang teruk diperhatikan dalam leukemia, dalam reaksi leukemoid dan dalam reaksi leucoeritrlastik, antara lain. Dalam jangkitan bakteria mungkin terdapat sedikit penyimpangan di sebelah kiri (kehadiran cayados). Juga dalam beberapa anemia, anda boleh memerhatikan erythroblast.

Rujukan

1. Tisu darah dan hematopoietik. Terdapat di: SLD.Cu
2. Gomez A, Casas M. 2014. malaikat. Tafsiran Klinikal Makmal. Edisi ke -8. Pan -American Editorial.
3. Solari Soto L, Soto Tarazona A, Mendoza Requena D, Llanos menyumbang kepada. Perbandingan kepadatan parasit dalam gout darah vena kasar berbanding digitopunción dalam diagnosis vivax malaria. Rev Med Hered 2002; 13 (4): 140-143. Terdapat di: Scielo.org.
4. Terry Leonard Nelson, Mendoza Hernández Carlos. Kepentingan kajian smear darah periferal pada orang tua. Medisur 2017; 15 (3): 362-382. Terdapat di: Scielo.SLD
5.  Grinspan s. Kajian smear darah periferal. Pendidikan Perubatan Berterusan. Terdapat di: BVS.HN/RMH