Yayasan Histokimia, Pemprosesan, Pewarnaan

The Histokimia Ia adalah alat yang sangat berguna dalam kajian morfologi pelbagai tisu biologi (sayur -sayuran dan haiwan), kerana prinsip reaksi komponen tisu seperti karbohidrat, lipid dan protein, antara lain, dengan pewarna pewarna pewarna.

Alat berharga ini membolehkan bukan sahaja untuk mengenal pasti komposisi dan struktur tisu dan sel, tetapi juga pelbagai reaksi yang berlaku dalam hal ini. Begitu juga, kerosakan tisu yang mungkin, disebabkan oleh kehadiran mikroorganisma atau patologi lain.

Pewarnaan histokimia. Virus Nil, Gram Positif dan Gram Bakteria Negatif (GRAM), Histoplasma capsulatum (GROCOTT), Mycobacterium tuberculosis (Ziehl Neelsen). Sumber: Pixinio.com/wikipedia.org/nephron [cc by-sa 3.0 (https: // creativeCommons.Org/lesen/by-sa/3.0)]/CDC/Dr. George ms. Kubica [domain awam]

Histokimia, sejak abad yang lalu telah memberikan sumbangan penting, seperti demonstrasi kewujudan halangan sel darah oleh Paul Ehrlich. Ini mungkin terima kasih kepada hakikat bahawa otak haiwan eksperimen yang digunakan oleh ehrlich tidak pewarna dengan aniline, yang merupakan pewarna asas.

Ini membawa kepada penggunaan pelbagai pewarna seperti metilena dan indophenol biru, untuk mewarnai pelbagai jenis sel. Temuan ini menimbulkan klasifikasi sel dalam asidofilik, basofilik dan neutrofil, menurut pewarnaan khusus mereka.

Kajian terbaru telah menggunakan teknik ini untuk menunjukkan kehadiran pelbagai sebatian, termasuk fenol, serta karbohidrat dan lipid bukan struktur dalam spesies spesies Litsea glaucescens, paling terkenal sebagai laurel. Menjadi ini, baik di dalam lembaran dan di dalam kayu.

Begitu juga Colares et al, 2016, mengenal pasti loji faedah perubatan Tarenaya Hassleriana, melalui teknik histokimia. Dalam spesies ini kehadiran kanji, mirosina, serta sebatian fenolik dan lipophilic dibuktikan.

[TOC]

Asas

Histokimia didasarkan pada pewarnaan struktur selular atau molekul yang terdapat di dalam tisu, terima kasih kepada pertalian mereka dengan pewarna tertentu. Reaksi warna struktur atau molekul ini dalam format asalnya, kemudiannya digambarkan dalam mikroskop optik atau mikroskop elektronik.

Kekhususan pewarnaan adalah disebabkan oleh kehadiran kumpulan menerima ion yang terdapat dalam sel atau molekul tisu.

Akhirnya, objektif tindak balas histokimia adalah dapat bukti melalui pewarnaan. Dari struktur biologi terbesar ke tisu dan sel terkecil. Ini dapat dicapai terima kasih kepada fakta bahawa pewarna bertindak balas secara kimia dengan molekul tisu, sel atau organel.

Ia dapat melayani anda: Apa itu gastrasi?

Pendakwaan

Reaksi histokimia boleh membawa kepada langkah -langkah sebelum merealisasikan teknik, seperti penetapan, kemasukan dan pemotongan tisu. Oleh itu, perlu diambil kira bahawa dalam langkah -langkah ini, anda boleh merosakkan struktur yang anda ingin kenal pasti, membuang hasil negatif palsu, walaupun ada.

Walaupun begitu, penetapan tisu sebelumnya yang dilakukan dengan betul adalah penting, kerana dia menghalang autolisis atau kemusnahan sel. Untuk ini.

Kemasukan tisu dilakukan supaya ia mengekalkan ketegasannya ketika memotong dan dengan itu menghalangnya daripada menjadi cacat. Akhirnya, potongan dilakukan dengan microtome untuk kajian sampel oleh mikroskopi optik.

Di samping. Serta penggunaan pewarna tertentu untuk struktur untuk belajar.

Pewarnaan histokimia

Dari kemunculan teknik histokimia hingga sekarang, pelbagai pewarna telah digunakan, di antaranya penggunaan yang paling kerap seperti: Schiff (PAS), Grocott, Ziehl-Neelsen dan Gram.

Begitu juga, pewarna lain telah digunakan kurang kerap seperti dakwat Cina, Orcein atau pewarnaan trichromic Masson, antara lain.

Asid periódic Schiff (PAS)

Dengan pewarnaan ini, anda dapat melihat molekul dengan kandungan karbohidrat yang tinggi, seperti: glikogen dan mucin. Walau bagaimanapun, ia juga berguna untuk mengenal pasti mikroorganisma seperti kulat dan parasit. Sebagai tambahan kepada struktur tertentu (membran basal) di kulit dan di tisu lain.

Asas pewarnaan ini adalah bahawa pewarna oksida ikatan karbon yang hadir di antara dua kumpulan hidroksil berdekatan. Ini menghasilkan pembebasan kumpulan aldehid, dan ini dikesan oleh reagen Schiff, membuang warna ungu.

Reagen Schiff terdiri daripada asas fuchsin, natrium metabisulfite dan asid hidroklorik, komponen -komponen ini bertanggungjawab untuk pewarna ungu, apabila kumpulan aldehid ada. Jika tidak, asid tanpa warna dihasilkan.

Boleh melayani anda: isomerase: apa, fungsi, tatanama, jenis

Keamatan pewarna bergantung kepada jumlah kumpulan hidroksilia yang terdapat di monosakarida. Contohnya dalam kulat, membran basal, mucinas dan glikogen warna boleh pergi dari merah ke ungu, sementara nukleus dicelupkan biru.

Grocott

Ia adalah salah satu pewarnaan yang memberikan kepekaan terbesar dalam mengenal pasti kulat dalam tisu yang termasuk dalam parafin. Ini membolehkan pengenalpastian pelbagai struktur kulat: hyphae, spora, endospores, antara lain. Oleh itu, ia dianggap sebagai pewarnaan rutin untuk diagnosis mycosis.

Terutama ia digunakan dalam diagnosis mikosis pulmonari seperti pneumocystosis dan aspergilosis yang disebabkan oleh beberapa kulat genre Pneumocystis dan Aspergillus, masing -masing.

Penyelesaian ini mengandungi nitrat asid perak dan kromik, yang terakhir menjadi fiksatif dan pewarna. Asasnya ialah asid ini menghasilkan pengoksidaan hidroksil kepada aldehid, oleh mukopolys yang terdapat dalam struktur yang dipilih, contohnya di dinding sel kulat.

Akhirnya, perak yang hadir dalam larutan dioksidakan oleh aldehid, menyebabkan warna hitam, yang dipanggil reaksi Argentafin. Anda juga boleh menggunakan pewarna kontras seperti hijau muda dan dengan itu struktur kulat hitam dengan latar belakang hijau muda akan diperhatikan.

Ziehl-Neelsen

Pewarnaan ini didasarkan pada kehadiran rintangan asid-alkohol, sebahagian atau jumlahnya, dalam beberapa mikroorganisma seperti genre Nocardia, Legionella dan Mycobacterium.

Penggunaan pewarnaan ini disyorkan, kerana dinding sel mikroorganisma yang dipetik sebelumnya, mengandungi lipid kompleks yang menghalang penembusan pewarna. Terutamanya dalam sampel saluran pernafasan.

Pewarna yang kuat seperti Fenicada Fuchsin (pewarna asas) digunakan di dalamnya dan haba digunakan supaya mikroorganisma dapat mengekalkan pewarna dan tidak menghindari asid dan alkohol. Akhirnya, penyelesaian biru metilena digunakan untuk mewarnai struktur yang telah berubah warna.

Kehadiran rintangan asid-alkohol diperhatikan dalam struktur merah, sementara struktur yang tidak menahan perubahan warna berwarna biru.

Dakwat Gram dan Cina

Gram adalah warna yang sangat berguna dalam diagnosis jangkitan bakteria dan kulat, antara lain. Pewarnaan ini membolehkan untuk membezakan antara mikroorganisma positif gram gram negatif, dengan jelas membuktikan perbezaan yang wujud dalam komposisi dinding sel.

Boleh melayani anda: lipid saponifiable: ciri, struktur, fungsi, contoh

Walaupun dakwat Cina adalah pewarnaan yang digunakan untuk membezakan struktur yang mengandungi polysaccharides (kapsul). Ini kerana bentuk cincin di alam sekitar, mungkin di Cryptococcus neoformans.

Orcein

Dengan pewarnaan, gentian elastik dan kromosom dari pelbagai sel berwarna, yang membolehkan penilaian proses pematangan yang terakhir. Atas sebab ini, sangat berguna dalam kajian sitogenetik.

Ini berdasarkan pengumpulan pewarna oleh beban negatif molekul seperti DNA, yang terdapat di pusat -pusat pelbagai sel. Jadi ini dicelupkan biru hingga ungu gelap.

Trichromic Masson

Pewarnaan ini digunakan dalam mengenal pasti beberapa mikroorganisma atau bahan yang mengandungi pigmen mellatik. Ini adalah kes mycosis, yang disebabkan oleh kulat dematiac, ugohifomicosis dan eumicetoma bijirin hitam.

Pertimbangan Akhir

Dalam tahun -tahun kebelakangan ini terdapat banyak kemajuan dalam penciptaan teknik diagnostik baru, di mana histokimia terlibat tetapi dikaitkan dengan asas atau prinsip lain. Teknik -teknik ini mengejar tujuan yang berbeza, seperti yang berlaku dengan imunohistokimia atau enzymohistokimia.

Rujukan

1. Acuña U, Elguero J. Histokimia. An. Chem. 2012; 108 (2): 114-118. Terdapat di: adalah.IQM.CSIC.adalah
2. Mestanza r. Kekerapan pewarnaan histokimia PAS, Grocott dan Ziehl-Neelsen yang digunakan untuk mengenal pasti mikroorganisma, yang dilakukan dalam perkhidmatan anatomi patologi Eugenio Espejo Specialties Hospital pada tahun 2015. [Tesis sarjana Muda]. Pusat Universiti Ecuador, Quito; 2016. Terdapat di: DSPACE.Uce.Edu
3. Tapia-Torres N, De La Paz-Pérez-Olivera C, Román-Guerrero A, Quintanar-Isaías A, García-Márquez E, Cruz-Sosa F. Histokimia, jumlah kandungan fenol dan aktiviti antioksidan daun dan kayu Litsea glaucescens Kunth (Laureaceae). Kayu dan hutan. 2014; 20 (3): 125-137. Terdapat di: Redalyc.org
4. Colares, MN, Martínez-Alonso, S, Arambarri, AM. Anatomi dan Histokimia Tarenaya Hassleriana (Cleomaceae), sejenis kepentingan ubat. Buletin Amerika Latin dan Caribbean Tanaman Ubat dan Aromatik 2016; 15 (3): 182-191. Terdapat di: Redalyc.org
5. Bonifaz a. Mycology perubatan asas. Edisi ke -4. Mexico: editor mcgraw-hill inter-american, s.Ke. daripada c.V. 2012.
6. Silva Diego Filipe Bezerra, Santos Hellen Bandeira de Pontes, León Jorge Esquiche, Gomes Dalian. Analisis patologi klinik dan imunohistokimia sel spindle sel squamous sel lidah: kes yang jarang berlaku. Einstein (São Paulo) 2019; 17 (1): ERC4610. Terdapat dari: Scielo.Br