Asas dan persediaan Orceína

The Orcein Ia adalah pewarna ungu semulajadi, yang diekstrak dari pelbagai lichen seperti: orchilla atau urchilla, lichen berbuah, Rocella Tincoria dan Parella Lecanora kebanyakannya. The Rocella Tincoria Ia ditemui di benua Afrika dan Amerika, walaupun dapat digantikan oleh spesies lain yang terletak di Eropah.

Pewarna ini telah digunakan secara meluas dalam kajian sitogenetik sejak zaman purba. Dalam pengertian ini, penyediaan orcein yang termasuk asid asetik, diperkenalkan oleh Lacourt pada tahun 1941, jadi pada mulanya dipanggil teknik lacourt.

Struktur kimia penyelesaian orcein dan orcein. Sumber: Wikipedia.Org/ oguenther di.Wikipedia (dr. Guenther) [domain awam]

Begitu juga, kerana kesederhanaan dan kos rendah, ia telah digunakan untuk pembuatan litmus (pewarna yang diekstrak dari lichens) dan dalam kajian histologi (pewarnaan sel dan tisu).

Beberapa kajian telah menggunakan pewarnaan ini digabungkan dengan bahan kimia lain, seperti picrocarminat ammoniacal dan asid asetik, untuk pewarna gentian elastik dan kromosom. Pada masa ini, orcein tetap digunakan dalam kajian sitogenetik haiwan dan sayur -sayuran.

Baru -baru ini, Silva et al. 2017 berjaya menggunakan pewarnaan ini untuk memerhatikan pelbagai perubahan yang berlaku dalam gentian elastik kulit ibu jari di Chile orang dewasa yang lebih tua. Kajian ini mendedahkan bagaimana gentian ibu jari diubah dengan penuaan.

Dalam pengertian ini, serat elastik diperhatikan warna coklat-negruzco pada individu lebih dari 80 tahun; Semasa di bongsu (dari 60 tahun) mereka dapat dilihat dengan coklat kemerah -merahan. Sitoplasma dan struktur sel lain menjadi hijau kekuningan.

Ini dibenarkan untuk menyokong kehadiran dan keadaan gentian elastik, dari segi pelupusan, kuantiti dan integriti mereka. Sebaliknya, ia juga telah menunjukkan bahawa orcein berguna untuk mengenal pasti aneurisma dan mendiagnosis arteritis, antara keadaan lain.

[TOC]

Asas

Orcein adalah sebahagian daripada kumpulan pewarna dan pewarnaan oxazine berdasarkan pertaliannya untuk DNA. Pewarna ini menyertai beban negatif molekul ini, yang diwakili oleh kumpulan fosfat. Itulah sebabnya kromosom dicelup ungu.

Ia boleh melayani anda: Alilo: Unit Allyic, Carbocation, Radikal, Contoh

Walau bagaimanapun, struktur sel selebihnya mengambil warna yang lain. Khususnya, dalam kes gentian elastik, ini berwarna warna coklat kemerahan, nukleus sel dari biru ungu biru, sementara kolagen tidak dicelup.

Oleh itu, orcein digunakan untuk pewarna kromatin dan membezakan seks dalam beberapa lalat lalat. Begitu juga, nukleus dan beberapa kemasukan hati yang dihasilkan oleh antigen hepatitis B boleh menjadi warna.

Penyelesaian Orcein mempunyai fungsi khusus dalam pewarnaan. Orcein A, mempunyai fungsi membran sel melembutkan, menyebabkan kematian mereka dan melumpuhkan proses pembahagian yang sama. Sementara itu, Orcein B bertanggungjawab untuk menyelesaikan warna untuk melekatkannya kepada kromosom.

Penyediaan

1% penyelesaian aceto-orceine

Untuk menyediakan penyelesaian 1% penyelesaian.

Kemudian, ia sentiasa bercampur untuk menghiasi penyelesaiannya, kemudian dibiarkan berdiri sehingga ia menyejukkan. Akhirnya, 4ºC disimpan dalam balang gelap. Penyediaan ini digunakan oleh Flores 2012, untuk pemerhatian fasa pematangan oosit lembu.

Dalam kes ini, sebagai contoh, penyelesaian aceto-orcein pada tisu yang sebelum ini ditetapkan dalam asid acetic-stanol selama 24 jam diletakkan. Proses pewarnaan ini dijalankan selama 30 minit dan seterusnya kain tertakluk kepada perubahan warna.

Begitu juga, ini boleh digunakan dalam mengenal pasti organel dalam tisu multiselular. Dalam kes ini, smear mukosa lisan dengan setitik penyelesaian aceto-orcein dicelup, penutupnya diletakkan di atas lembaran dan segera teras sel dapat diperhatikan dengan substrukturnya.

Penyelesaian Lacto-Proportion Orcein 1%

Di samping itu, orcein boleh disediakan dengan bahan kimia lain seperti asid laktik dan asid propionik. Untuk melakukan ini, gram orcein larut dalam keadaan pra pada suhu bilik 23 ml asid laktik dan 23 mL asid propionik; melengkapkan kelantangan dengan air sulingan sehingga 100 ml.

Boleh melayani anda: Alkohol Tersier: Struktur, sifat, contoh

Dengan penyelesaian lakto-propionik ini, anda dapat melihat fasa-fasa pembahagian meiotik sel-sel tumbuhan yang berbeza. Dalam kes ini, sampel yang lebih disukai dan dihidrolisis diletakkan selama 15 minit dalam larutan orcein lacto-propionik dan kemudian memanjangkan tisu dalam irisan slaid.

Dalam kajian Duke 2016 mengenai kromosom polythenik, ia menggunakan penyediaan 2 gram orcein yang dicairkan dalam asid asetik dan 85%asid laktik, dicairkan dengan larutan asid asetik 65%. Akhirnya, dia memerhatikan kromosom dalam kelenjar air liur Drosophila melanogaster.

Orcein a dan orcein b

Penting untuk diingat bahawa bergantung pada sampel dan apa yang anda ingin tilai, penyelesaian orcein yang betul disediakan. Oleh itu, sebagai contoh, penyelesaian orcein A ditambah asid hidroklorik 1n untuk pemerhatian sel -sel pembahagian.

Walaupun penyelesaian orcein B, akhirnya melarutkan asid asetik 45%. Teknik ini merupakan kaedah singkat pewarnaan dan, secara umum, digunakan sebagai pelengkap kepada struktur kromosom warna.

Pertimbangan Akhir

Dari abad yang lalu, di negara -negara benua Amerika sebagai Argentina, anda boleh mendapatkan lichens seperti: Lecanora, Parmelia dan Umbilicaria, yang merupakan sumber orcein yang hebat. Juga kawasan Eropah seperti Kepulauan Canary, adalah pengeluar besar Orchilla pada masa itu.

Ini dieksport ke bandar -bandar lain di benua yang sama seperti Genoa dan negara -negara seperti England, sementara Belanda. Jadi lichen ini kemudiannya dikurangkan sehingga ia akan memadamkan.

Ini membawa kepada orchilla digantikan oleh tumbuhan lain dengan sifat pencelupan. Walau bagaimanapun, kemunculan pewarna sintetik menyumbang kepada penyempurnaan sumber orcein ini.

Boleh melayani anda: aluminium karbonat: struktur, sifat, kegunaan

Ini mungkin terima kasih kepada Cocq, yang pada tahun 1812 menggambarkan sintesis orcein, mengetahui bahawa ini disintesis oleh sebatian fenolik yang dipanggil orcinol. Walau bagaimanapun, walaupun ini, orcein semulajadi masih menjadi kegemaran.

Ini mungkin disebabkan oleh fakta bahawa orcinol adalah sebatian bau yang sangat kuat dan pendedahan yang berpanjangan boleh membawa kepada risiko kesihatan, seperti kehilangan keupayaan untuk mengesan bau. Kerosakan ini ke pituitari boleh bergerak dari sementara ke kekal semakin tinggi pameran.

Rujukan

1. Ortega L, García R, Morales C. "Penggunaan lacases yang dihasilkan oleh kulat untuk kemerosotan pewarna mikrobiologi (orcein dan violet kristal)."Orang muda dalam sains 2. 2015; 633-637. Terdapat di: Youngen.Ugto.mx.
2. Barcat J. Serat orcein dan elastik. Perubatan (Buenos Aires) 2003; 63: 453-456. Terdapat di: Medicinabuenosaires.com.
3. Silva J, Rojas M, Araya C, Villagra F. Ciri -ciri histologi kulit muka terbang pada individu Chile dengan pudar dactilogram. J. Morphol. 2017; 35 (3): 1107-1113. Terdapat di: Scielo.Conicyt.
4. Orrillo M, Merideth B. "Biologi pembiakan dan sitogenetik kentang."Pusat Antarabangsa Potato (CIP). Manual Teknikal. Tersedia di: Penyelidikan.CIP.Cgiar.org/
5. Bunga f. "Penanaman dan kematangan In vitro, oosit lembu (Bos Taurus) Di Altiplano Bolivia."[Tesis Sarjana]. Universiti Kebangsaan Altiplano, Puno-Peru; 2012. Terdapat di: repositori.satu p.Edu.PE.
6. Duke c. Kromosom Polynik: Lihat fenomena endorredupplication. Universiti Kebangsaan Colombia, Medellín; 2016. Terdapat di: edu.
7. Camarena f. Biologi selular dan molekul. Manual Amalan. Universiti Autonomi Baja California. 2017. Terdapat di: Ikan.ENS.UABC.mx.
8. Fao/oiea. 2018. Manual untuk membezakan lalat dari Anastrepha ludens (Loew) Silvestres dan pembantu normal ("bi-seksual") dan ketegangan seks genetik (tapachula-7), disinari dan tanpa iRradiar. Guillen Aguilar J.C, López Muñoz L, López Villalobos dan.F dan Soto García D. N. Pertubuhan Makanan dan Pertanian Pertubuhan Bangsa -Bangsa Bersatu. Rom, Itali, 95 pp.
9. Orcein. (2018, 30 November). Wikipedia, ensiklopedia percuma. Tarikh Perundingan: 03:38, 31 Julai 2019 adalah.Wikipedia.org.
10. Merck Millipore. (2018, 16 Julai). Mikroskopi orcein untuk mikroskopi certistain. Terdapat di: Merckmillipore.com