Apakah lentivirus?

The Lentivirus, dari bahasa Latin lenti yang bermaksud perlahan, mereka adalah virus yang memerlukan masa yang lama, antara bulan dan tahun, dari jangkitan awal hingga rupa penyakit. Virus ini tergolong dalam genre Lentivirus dan retrovirus (keluarga Retroviridae), yang mempunyai genom RNA yang disalin ke DNA melalui transkripase terbalik (TR).

Secara semula jadi, lentivirus hadir dalam primata, ungulates dan felines. Sebagai contoh, dalam primata terdapat dua keturunan yang berkaitan dengan phylogenetically: virus immunodeficiency apesficiency (SIV) dan manusia virus immunodeficiency (HIV). Kedua -duanya adalah ejen yang menyebabkan sindrom immunodeficiency yang diperoleh (AIDS).

Sumber: PhD Dre di Bahasa Inggeris Wikipedia [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/lesen/by-sa/3.0)]

Lentivector, yang diperolehi daripada lentivirus, telah digunakan secara meluas untuk penyelidikan asas dalam biologi, genomik fungsional dan terapi gen.

[TOC]

Tahap kitaran hayat retrovirus

Kitaran hidup semua retrovirus bermula dengan kesatuan organisma kepada reseptor tertentu di permukaan sel, diikuti dengan pengantarabangsaan virus oleh endositosis.

Kitaran berterusan dengan penghapusan penutup virus dan pembentukan kompleks nukleoprotein virus (VNC), yang terdiri daripada genom virus yang dikaitkan dengan protein virus dan selular. Komposisi perubahan kompleks dari masa ke masa dan berkaitan dengan penukaran, melalui TR, genom penceroboh dalam kipas DNA berganda.

Penyepaduan genom virus ke sel akan bergantung kepada keupayaan genom virus untuk menembusi nukleus tuan rumah. Penyusunan semula VNC mempunyai pengimportan penting dalam import ke nukleus, walaupun protein sel penting, seperti Transportin-SR2/TNPO3, Importin-Alpha3, dan Importin7 juga mempengaruhi inti.

Dapat melayani anda: ciri makhluk hidup

Protein virus, seperti mengintegrasikan, dan faktor transkripsi sel tuan rumah, seperti LEDCF, adalah kunci dalam integrasi genom virus.

Ini menggunakan jentera sel tuan rumah untuk menyalin dan menterjemahkan protein virus dan memasang virion, membebaskannya dalam ruang ekstraselular.

Dari lentivirus ke lentivector

Genom retrovirus mempunyai tiga bingkai bacaan terbuka (MLA) untuk unsur -unsur virus yang berbeza. Contohnya, Capsidia dan Matrix (Gen gag), enzim (gen Pol), dan bungkus (gen hantar).

Pembinaan vektor virus terdiri daripada penghapusan beberapa gen virus liar, seperti yang berkaitan dengan virulensi. Dengan cara ini, vektor virus dapat menjangkiti sel-sel eukariotik, transkripsi retro, mengintegrasikan ke dalam genom sel eukaryot tuan rumah dan menyatakan transgen (dimasukkan gen terapeutik) tanpa menyebabkan penyakit.

Kaedah pembinaan lentivector adalah pemindahan peralihan. Ia berdasarkan penggunaan minigenoma virus (dipanggil konstruk) yang mengangkut hanya gen yang menarik. Transfeksi peralihan terdiri daripada pembinaan bebas pembinaan.

Sesetengah retrovectors hanya mempunyai unsur utama untuk pemasangan zarah virus, yang dipanggil retrovectors tidak berfungsi. Mereka digunakan untuk memindahkan sel pembungkusan.

Vektor dengan kaset ekspresi transgen dapat menjangkiti, mengubah sel (transduksi) dan menyatakan transgen.

Penggunaan pembinaan berasingan bertujuan untuk mengelakkan peristiwa rekombinasi yang dapat memulihkan fenotip liar.

Teknologi Lentivector

Teknologi lentivector mempunyai penggunaan yang luas dalam biologi asas dan kajian translasi untuk overexpression transgenes stabil, edisi gen yang diarahkan oleh tapak, pembubaran gen yang berterusan, pengubahsuaian sel stem, penjanaan haiwan transgenik dan induksi sel pluripoten.

Boleh melayani anda: Apakah ortogenesis?

Lentivectors mudah memanipulasi dan menghasilkan sistem. Mereka tidak dapat dipulihkan dan pasti genom tuan rumah. Jangkitan sel yang berada atau tidak di bahagian.

Mereka menunjukkan tropisme ke arah kain tertentu, memudahkan terapi. Mereka tidak menyatakan protein virus, jadi mereka mempunyai immunogenicity yang rendah. Mereka boleh menghantar elemen genetik yang kompleks.

Dalam penyelidikan asas, lentivectors berasaskan HIV telah digunakan sebagai sistem penghantaran RNA gangguan (RNAi) untuk menghapuskan fungsi gen tertentu, dengan itu membolehkan untuk mengkaji interaksi dengan orang lain yang berbeza.

Lentivector yang diperoleh dari HIV

Pada permulaan tahun 90-an, lentivectors pertama dibina dari HVI-1, yang berkait rapat dengan SIV simpanse. HVI-1 bertanggungjawab untuk AIDS di seluruh dunia.

Generasi pertama lentivector mempunyai sebahagian besar daripada genom HIV. Termasuk gen Gal dan Pol, dan beberapa protein virus tambahan. Generasi ini dicipta menggunakan dua konstruk. Salah satu daripada mereka, yang menyatakan kapal, bekalan fungsi pembungkusan. Yang lain menyatakan semua MLA, kecuali penghantaran.

Vektor pemindahan terdiri daripada kaset ungkapan yang ditandai oleh dua jenis pengulangan panjang (LTR) dan gen yang diperlukan untuk pembungkusan dan transkripsi terbalik.

Generasi kedua vektor pembungkusan tidak mempunyai kebanyakan gen aksesori dan mengekalkan TAT dan REV. Gen ini dikeluarkan pada generasi ketiga dan disediakan oleh pembinaan keempat.

Vektor pemindahan generasi ketiga terdiri daripada dua pembungkusan pembungkusan. Satu encodes Gal dan Pol. Encod lain REV. Konstruk ketiga menyandi sampul surat, yang berasal dari VSV-G. Orang yang mengkodekan gen minat mengandungi urutan ltt ltt yang tidak aktif untuk mengelakkan penggabungan semula.

Boleh melayani anda: Apakah tatanama binomial?

Dalam kes terakhir, elemen pengawalseliaan transkripsi meningkatkan prestasi gen pemindahan.

Lentivector diperolehi daripada virus lain

Virus HIV-2 berkait rapat dengan MAGABEY GRIS SIV (SIV_Ye), dan bertanggungjawab terhadap AIDS di Afrika Barat. Dari virus ini, vektor generasi pertama dan kedua telah diperoleh.

Sama dengan HVI-1, dari SIV_Ye, daripada EIAV (virus anemia berjangkit), virus IVF (virus immunodeficiency feline) dan vektor virus immunodeficiency (BIV) BIV (BIV) telah dibina. Vektor berasaskan EIAV telah dibangunkan untuk kegunaan klinikal.

Dari virus caprine arthritis-idephalitis (CAEV), vektor generasi pertama dan ketiga telah dibina. Semasa dari IVR monyet hijau Afrika, vektor generasi pertama telah dibina.

Rujukan

1. Da Silva, f. H., Dalberto, t. P., Beyer Nardi, n. 2006. Beyond Retrovirus Infection: HIV Memenuhi Terapi Gen, Genetik dan Biologi Molekul, 29, 367-379.
2. Durand, s., Cimarelli, a. 2011. Bahagian dalam vektor lentiviral. Virus, 3: 132-159.
3. Márai, J., Chuah, m. K. L., Van den drissche, t. 2010. Kemajuan terkini dalam pembangunan dan aplikasi vektor lentiviral. Terapi Molekul, 18: 477-490.
4. Milone, m.C., O'Doherty, u. 2018. Penggunaan klinikal vektor lentiviral. Leukemia, 32, 1529-1541.
5. Sakuma, t., Barry, m.Ke., Ikeda, dan. 2012. Vektor lentiviral: asas untuk translasi. Jurnal Biokimia, 443, 603-618.