Asas tindak balas xantoproteik, prosedur, penggunaan

The Reaksi Xantoproteic Ini adalah prosedur kimia yang digunakan untuk menentukan kehadiran atau ketiadaan asid amino aromatik, seperti tirosin dan tryptophan, yang mungkin bebas atau membentuk protein larut, peptida atau polipeptida.

Ia juga telah digunakan untuk mengesan bahan toksik pada tahap darah yang mengandungi kumpulan beancenic dalam strukturnya. Ujian ini juga dikenali sebagai tindak balas Becher Xantoproteic.

Sumber Reaksi Xantoproteik Positif: Diambil dari Video: https: // youTU.BE/GZGMBW5W4WO

Reaksi xantoproteik menggunakan asid nitrik pekat, haba dan alkali meneutralkan. Sekiranya, apabila meneutralkan tindak balas, penyelesaian penyelesaian kuning ke oren dianggap positif. Pewarnaan yang diperhatikan adalah disebabkan oleh pembentukan sebatian nitrogen yang diperolehi daripada nitrifikasi kumpulan benzenik.

Sekiranya anda perlu mengukur jumlah keseluruhan protein, perlu menggunakan kaedah penentuan protein lain, seperti biuret.

Reaksi Xantoproteic digunakan terutamanya apabila bahan dianalisis yang mana komposisi kimianya tidak diketahui. Secara umum, tindak balas ini adalah sebahagian daripada satu set ujian yang akan membantu menentukan komposisi kimia bahan atau ekstrak tertentu. Itulah sebabnya, ia digunakan secara meluas oleh penyelidik.

Sebaliknya, tindak balas Xantoproteic Becher digunakan untuk mengesan bahan fenolik dan indolic dalam darah, yang mungkin untuk meramalkan penampilan nefropati, sebelum parameter lain meningkat.

[TOC]

Asas

Reaksi pada dasarnya mengesan kehadiran kumpulan benzenik, baik dalam asid amino, seperti dalam protein dan peptida. Asid nitrik bertindak pada cincin bencenik asid amino yang memilikinya, membentuk nitrokomposisi fenolik.

Reaksi memerlukan haba yang akan dijalankan, biasanya mendakan dibentuk yang awan medium, menjadikannya susu. Endapan boleh putih atau kuning. Akhirnya, ia memerlukan langkah alkali yang menonjolkan warna. Untuk ini, asas sebanyak 40% atau ammonia natrium hidroksida digunakan.

Tindak balas akan ditafsirkan sebagai positif jika pewarna kuning yang kuat diperhatikan semasa pemanasan gelap atau proses oren dengan alkali reaksi. Asid amino yang dikesan terutamanya tirosin dan tryptophan.

Reaksi Xantoproteic. Sumber: http: // esteroisomeras.Blogspot.com/2013/06/pencirian-protein.Html

Dalam kes phenylalanine, walaupun ia adalah asid amino aromatik, teras benzena asid amino ini sukar untuk dijadikan nitatisasi dalam tindak balas yang mudah, oleh itu, ia akan memancarkan atau reaksi positif atau lemah positif.

Boleh melayani anda: polariti (kimia): apakah, definisi, contoh

Secara umum, ujian xantoproteic boleh dilengkapi dengan ujian Hopkins-cole, yang berfungsi untuk mengenal pasti triptophane secara khusus. Sekiranya ujian xantoproteik positif dan Hopkins-cole negatif, kehadiran tryptophan dibuang dalam penyelesaian itu, yang membawa kepada kehadiran terutamanya dari tirosin. Begitu juga, ia juga boleh dilengkapi dengan reaksi Millon untuk pengesanan tirosin, antara lain.

Reaksi ini juga boleh digunakan pada sampel darah, plasma atau serum tidak berubah untuk diagnosis uremia atau kekurangan buah pinggang. Dalam kes ini, apa yang dicari adalah pengesanan bahan toksik (fenolik dan indolic) yang dihasilkan dari reput usus.

Bahan -bahan ini mempunyai kumpulan benzenik dan oleh itu, memberikan reaksi xantoproteik positif, walaupun bahan reaksioner bukan asid amino, atau protein.

Prosedur

- Reaksi xantoproteik untuk pengesanan asid amino dengan kumpulan aromatik

Letakkan 1 ml sampel masalah dalam tiub ujian yang bersih dan kering.

-Tambah 0.5 ml asid nitrik pekat.

-Inkubasi campuran di bilik mandi 70 ° C selama 2 minit. Sebelum ini menyediakan mandi Maria pada suhu yang disebutkan di atas.

-Apabila anda mengambil tiub dari mandi Maria, mungkin untuk memerhatikan bahawa penyelesaiannya telah menjadi susu dan telah mengambil pewarnaan putih kekuningan.

-Penyelesaiannya disejukkan dengan menjatuhkan air sejuk di pangkal tiub.

-Penyediaan didakwa dengan perlahan (drop by drop) penyelesaian natrium hidroksida 40% sehingga terdapat kejutan warna.

-Sekiranya ujian positif, cincin oren gelap akan dibentuk di antara muka cecair.

-Sekiranya tindak balas negatif tidak akan ada pembentukan warna.

- Reaksi xantoproteik untuk mengesan bahan fenolik dan indolic dalam darah

-Dispens 5 cc asid trichloroacetic pada 20% melebihi 5 cc darah vena, plasma atau serum, yang terakhir adalah yang paling ditunjukkan. Campurkan dengan baik dan penapis.

Boleh melayani anda: asid nitrik (HNO3)

-2 cc penapisan diambil dan dicampur dengan 0.5 cc asid nitrik. Kemudian ia dipanaskan untuk mendidih, kerana ini tiub diletakkan secara langsung pada api yang lebih ringan selama 30 saat. Sejuk dengan air dan tambah 1.5 natrium klorida pada 33%.

Ia ditafsirkan seperti berikut:

-Hasil negatif: warna kekuningan.

-Hasil positif (+) lemon kuning.

-(++) Kuning Emas.

-(+++) Kuning gelap hingga coklat

Ia juga boleh ditafsirkan menggunakan skala kolorimetrik rujukan auenrieth, yang dibentuk oleh pelbagai kepekatan kalium bicromomato. Ini disediakan dalam pencairan 10 dalam 10 dari penyelesaian ibu sebanyak 0.03874%. Setiap tiub mewakili peratusan.

Skala tafsiran

Terdapat dua skala tafsiran yang disebut kuno dan moden. Nilai normal adalah:

Jadual lama: antara 75 dan 85%

Jadual Moden: Antara 15 dan 25%

Sekiranya warna tiub masalah berada di tengah -tengah dua tiub corak purata dibuat antara kedua -dua langkah.

Penyelesaian corak dikromat kalium disediakan seperti berikut: 7 diukur.9 ml kalium dikromat pada 10 n dan siram sehingga 100 ml dalam bola aggorado. Untuk pelarut ia diikuti kerana ia ditunjukkan dalam jadual warna autenrieth.

Jadual Colorimetric Autenrieth. Sumber: Vásquez a. Reaksi Xantoproteic. Majalah Klinikal Sepanyol. 1949; 35 (5): 326-327. Terdapat di: Elsevier

Gunakan

Penggunaan reaksi xantoproteik adalah sebahagian daripada satu set ujian biokimia yang membantu mengetahui komposisi kimia bahan yang tidak diketahui. Ujian ini menyumbang kepada analisis kimia Pengesanan protein yang mengandungi kumpulan benzenik dalam struktur mereka.

Reaksi ini digunakan secara meluas oleh penyelidik dalam pelbagai kajian bahan.

Dalam pengertian ini, Vásquez-Jorge dan kolaborator menggunakan reaksi ini dan lain-lain untuk menyiasat kandungan protein cecair yang diekstrak dari Mangrove Ostion (Crassostrea rhizophorae).

Begitu juga, Rojas dan kolaborator (2009), menggunakan satu siri ujian, di antaranya adalah reaksi Xantoproteic, untuk menganalisis glycomacropéptides dalam precipitates of lactosueros de ricotta.

Sebaliknya, tindak balas Xantoproteic Becher diubahsuai oleh Volhard untuk digunakan untuk tujuan lain. Dalam kes ini, untuk mengesan bahan fenolik dan indolic yang boleh dibangkitkan lebih awal (minggu atau bulan) bahawa tahap urea dan nitrogen sisa dalam darah meningkat.

Ia boleh melayani anda: cerio: struktur, sifat, mendapatkan, menggunakan

Sisa toksik ini terbentuk dari makanan usus.

Bahan -bahan ini berkumpul di dalam darah apabila mereka tidak dihapuskan dengan betul, oleh itu, ujian xantoproteik positif dapat meramalkan penubuhan kegagalan buah pinggang yang segera atau keadaan uremia.

Menurut intensiti warna, anda dapat menentukan bagaimana lanjutannya. Dalam kes ini ujian adalah kuantitatif.

Pada orang yang sihat ujian ini memberikan warna kuning sedikit, sepadan dengan tahap normal tryptophan dan tirosin yang boleh berada di dalam darah.

Walaupun, pada pesakit buah pinggang, tindak balas xantoproteik memberikan positif yang kuat kerana kehadiran bahan -bahan berikut: fenol, indol, paracresol, asid oxy aromatik, antara lain.

Langkah berjaga-berjaga

Ujian ini mesti dilakukan oleh profesional terlatih. Semua standard biosafety harus dipertimbangkan, kerana reagen yang digunakan adalah asid dan pangkalan menghakis.

Jika, secara tidak sengaja, beberapa tetes asid nitrik pada kulit atau kuku jatuh, mereka akan menjadi kuning, kerana kedua -dua struktur mengandungi protein. Di samping itu, pada kulit dan mukusasa ia menyebabkan luka bakar serius.

Sekiranya hubungan dengan kulit berlaku, protokol untuk diikuti mestilah mencuci kawasan dengan segera dengan sabun dan air selama lebih kurang 20 minit.

Sekiranya anda memercikkan mata, anda mesti mencuci dengan banyak air tawar, cuba membuka mata anda.

Rujukan

1. "Reaksi Xantoproteica" Wikipedia, ensiklopedia percuma. 2 Sep 2019, 17:49 UTC. 21 Okt 2019, 20:31 Wikipedia.org/
2. Vásquez-Jorge dan, Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge dan. Pencirian fizikokimia dan kandungan protein ekstrak cecair mangrove ostion (Crassostrea Rhizophorae). Kimia Kuba, 2014; 26 (1): 66-74. Terdapat di Redalyc.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. Pengasingan dan prestasi GMP oleh pemendakan lactosuero dengan asid tricloroacetic. Saintis. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295-302. Terdapat di: ve.Scielo.
4. Vásquez a. Reaksi Xantoproteic. Majalah Klinikal Sepanyol. 1949; 35 (5): 326-327. Terdapat di: Elsevier
5. Gálvez i, gárate atau. Reaksi Becher dan Andrewes dalam pembedahan kencing. Perkhidmatan urologi hospital Sepanyol. Majalah Argentina Urologi 395-404