Coklat Agar

Bakteria yersinia pestis pada plak agar coklat. Sumber: Jabatan Kesihatan dan Perkhidmatan Manusia, Wikimedia Commons

Apa itu Agar Chocolate?

Dia Coklat Agar Ini adalah cara budaya pepejal, diperkaya, tidak berpuas hati dan tidak berbeza. Ia digunakan terutamanya untuk pengasingan mikroorganisma yang menuntut dari sudut pandang pemakanan, walaupun mana -mana jenis bakteria dapat tumbuh di dalamnya.

Itulah sebabnya utilitinya meningkat terutamanya dalam sampel sampel yang biasanya steril, seperti CSF dan cecair bersama. Walaupun ia juga termasuk dalam media yang dipilih untuk menanam sampel polimikrob, tetapi dalam kes ini, perlu menambah antibiotik yang menghalang flora bersamaan.

Medium ini mempunyai warna coklat ciri yang sangat mirip dengan coklat, oleh itu namanya. Penyediaannya sangat serupa dengan agar darah, hanya dalam hal ini darah mesti dipanaskan sehingga sel darah merah pecah.

Penyediaannya, seperti agar darah, sangat halus, kerana mudah tercemar. Oleh itu, banyak makmal lebih suka memperoleh medium ini yang telah disediakan oleh rumah komersial yang menjamin kualiti mereka.

Asas

Ia terdiri daripada asas agar -agar nutrien dan darah yang dipanaskan. Hemolisis sel darah merah menyediakan faktor sederhana x (hemina) dan faktor V (NAD), yang diperlukan untuk pertumbuhan beberapa mikroorganisma, seperti jantina Haemophilus. Ia juga sangat berguna untuk mengasingkan Neisserias sp.

Seperti agar darah, media yang berbeza boleh digunakan sebagai agensi asas, bergantung pada keperluan. Antara media yang digunakan ialah Infusi Cerebro Heart and Crush Soybeans, walaupun yang paling disyorkan ialah Columbia Agar, Müeller Hinton, GC Agar dan Thayer Martin Agar.

Boleh melayani anda: Penyebaran mudah: proses dan contoh

Beberapa varian agar coklat termasuk suplemen yang diperkaya, tersedia secara komersil, yang dipanggil isovalex atau polyvitex.

Suplemen ini mengandungi vitamin B₁₂, L-glutamine, adenine, guanine hydrochloride, p-aminobenzoic acid, nicotinamide adenine Dinucleotide (NAD), thiamine pyrophosphate, ferric nitrate, thiamine hydrochloride, cysteine ​​​​hydrochloride, l-cistine and glucose.

Penting untuk menyerlahkan bahawa agar coklat lebih diperkaya daripada agar darah, tetapi tidak membenarkan corak hemolisis.

Aplikasi

• Coklat Agar dengan Columbia Agar: Mengandungi kasein pankreas dan jantung, peptik daging yang dicerna, natrium klorida, agar, ekstrak yis dan kanji jagung. Di samping itu, kaya dengan vitamin, mineral dan asid amino penting. Pangkalan ini dengan darah yang dipanaskan sesuai untuk mengasingkan bakteria genre Neisseria. Sebaliknya, jika suplemen ditambah ke Brucella, Mikroorganisma yang disebutkan di atas dapat diasingkan. Hasilnya bertambah baik menggunakan darah kuda.
• Coklat Agar dengan GC Base Agar (untuk Gonococci): Mengandungi pepton, kanji jagung, buffer monobasic dan dibasic, natrium klorida dan agar. Kebanyakan persembahan output coklat yang disediakan secara komersil datang dengan pangkalan ini dan tidak mengandungi darah yang dipanaskan, tetapi campuran sintetik hemina dan suplemen kimia faktor pertumbuhan, vitamin, mineral, asid amino, faktor V dan glukosa.
• Coklat Agar Bersedia dengan Müeller Hinton Agar: Ia digunakan untuk melakukan ujian kerentanan antimikrob untuk menuntut mikroorganisma, seperti Streptococcus pneumoniae, Menggunakan 5% darah ram yang dipanaskan. Ia juga berfungsi untuk pengasingan utama Neisseries dan Haemophilus, tetapi dalam kes pengasingan tertentu Haemophilus Penggunaan darah kuda lebih disukai, kerana kaya dengan faktor x dan v. Sebaliknya, jika sampel ditanam berasal dari kawasan yang tidak bersemangat, penambahan antibiotik disyorkan untuk menghalang flora biasa kawasan tersebut. Contoh: Untuk sampel pernafasan di mana kehadiran bakteria jantina disyaki Haemophilus bacitracin digunakan untuk menghalang pertumbuhan Staphylococcus, Micrococcus, Streptococcus dan Neisseries Saprophytes. 
• Coklat Agar dengan Thayer Martin Agar: Ia istimewa untuk mengasingkan Neisseria Gonorrhoeae. Ia mesti mengandungi antibiotik untuk menghalang flora yang disertakan. Darah kambing digunakan.

Ia boleh melayani anda: Flora dan Fauna Zacatecas: Spesies Lebih Banyak

Penyediaan

Petunjuk untuk penyediaan agar asas yang akan digunakan mesti dilihat. Umumnya, mereka menggambarkan berapa banyak yang anda harus menimbang untuk menyediakan satu liter medium budaya. Di makmal, anda boleh menyediakan jumlah yang tepat yang diperlukan, yang boleh lebih kurang daripada satu liter.

Pengiraan

Peraturan tiga dibuat untuk mengira berapa banyak yang anda mesti timbang untuk menyediakan kelantangan yang dikehendaki. Contoh:

Jika selama 1 liter, perlu menimbang 40 gr dan makmal memerlukan 800 ml, dikatakan:

1000 ml -40 gr

800 ml - x

Formula akan menjadi seperti berikut:

X = 32 gr (kuantiti walaupun 800 ml).

Berat dan larut

Jumlah yang diperlukan ditimbang dan diletakkan di felola dengan air.

Ia memanaskan api sederhana dan bercampur dengan perlahan dengan pergerakan berputar sehingga medium dehidrasi sepenuhnya larut, membiarkannya mendidih selama 1 minit.

Mensterilkan

Fixola diperkenalkan ke dalam autoklaf untuk mensterilkan medium pada 121 ° C selama 20 minit.

Agregat darah

Apabila meninggalkan autoklaf, ia dibenarkan untuk berdiri sehingga suhu medium adalah kira -kira antara 56 dan 70 ° C untuk meletakkan darah dan campuran sehingga medium bertukar warna coklat.

Sekiranya suplemen akan ditambah, ini adalah masa untuk melakukannya. Seterusnya, campurkan dan sajikan 20 ml ke setiap plat petri steril.

Seluruh prosedur mesti dilakukan dalam loceng aliran laminar atau di sekitar Bunsen Lighter. Biarkan berdiri sehingga mereka menguatkan dan simpan dengan cara terbalik di dalam peti sejuk.

Cara lain untuk menyediakan agar coklat tanpa menggunakan darah

Medium asas disediakan seperti yang diterangkan di atas, hemoglobin dehidrasi yang diperolehi secara komersil dan disterilkan dalam autoklaf dibubarkan dalam autoklaf.

Boleh melayani anda: hemoolinfa

Kedua -dua penyelesaian dibenarkan untuk menyejukkan pada 50 ° C, suplemen itu disertai dan ditambah. Campurkan dalam keadaan aseptik dan kemudian berkhidmat di plat steril petri.

QA

Adalah penting bahawa darah diletakkan pada suhu yang ditunjukkan, kerana ia adalah ideal untuk lisar sel darah merah dan pada masa yang sama mengekalkan faktor v, yang boleh dimakan.

Mereka tidak boleh menjadi gelembung di permukaan agar. Dari setiap kumpulan 100 plat satu atau dua plat mesti diinkubasi di dalam dapur pada suhu 37 ° C selama 24 jam untuk memeriksa kemandulannya.

Untuk hasil yang lebih baik, agar coklat mesti digunakan sejurus selepas penyediaannya.

Kawalan Strain Bakteria harus diambil di makmal untuk menilai keberkesanan persekitaran yang baru disediakan untuk pertumbuhan mikroorganisma yang menuntut utama kepentingan klinikal.

Rujukan

1. Garcia, ms., Dinding, f., Fernández del Barrio, m. Mikrobiologi klinikal praktikal. Universiti Cadiz. Perkhidmatan Penerbitan UCA.
2. Coklat Agar. Diambil dari.Wikipedia.org.