Memegang apa, asas, penyediaan, kegunaan

Dia Endo Agar atau endo sederhana adalah budaya pepejal, pembezaan dan dengan tahap selektiviti tertentu. Formula asal dicipta oleh Endo pada tahun 1904 untuk membezakan bakteria fermentari laktosa yang tidak berpakaian. Permulaan Salmonella Typhi, Tetapi kemudian matlamat medium beralih ke pencarian coliforms.

Permulaan Agar Endo kekal, tetapi perumusannya telah mengalami perubahan yang tidak terhitung sejak bertahun -tahun. Pada masa ini, medium terdiri daripada peptik tisu haiwan, laktosa, hidrogen puffling, natrium sulfit, fuchsin asas dan agar dan agar.

Penggunaan utama medium telah dikaitkan dengan pengasingan dan pembezaan bacilli negatif gram milik keluarga Enterobacteriaceae dan keluarga berdekatan lain.

Untuk masa yang lama ia digunakan dalam pengesanan koliform dalam sampel air, tenusu dan makanan, tetapi hari ini penggunaan medium ini telah dipindahkan oleh orang lain dari fungsi yang serupa. Walau bagaimanapun, beberapa makmal mikrobiologi menggunakan agar ini untuk penebat dari sampel klinikal.

Asas

Endo agar mengandungi pepton yang berfungsi sebagai sumber asid amino, nitrogen, karbon dan tenaga, yang diperlukan untuk pertumbuhan mikroorganisma yang sedikit menuntut.

Sebaliknya, watak yang sedikit selektif agar disediakan oleh agregat natrium sulfit dan fuchsin asas; Kedua -dua komponen sebahagiannya atau sepenuhnya menghalang perkembangan bakteria gram yang paling positif.

Watak pembezaan diberikan oleh kehadiran karbohidrat yang boleh ditapai, yang dalam kes ini adalah laktosa dan fuchsin asas, yang juga berfungsi sebagai penunjuk pH.

Boleh melayani anda: taktisme

Bakteria negatif Gram yang tumbuh di agar ini dan dapat menanam laktosa akan membentuk koloni merah jambu yang kuat; menjadi pathognomonic of Escherichia coli Pembentukan koloni merah gelap dengan bersinar logam kehijauan. Ini disebabkan oleh pengeluaran asid tinggi dari penapaian karbohidrat.

Harus diperhatikan bahawa medium yang terdapat di sekitar koloni juga menjadi warna merah jambu yang kuat. Walaupun gram negatif bacilli non -fermenting laktosa bentuk koloni merah jambu pucat serupa dengan medium atau tidak berwarna.

Hidrogen dopotassium fosfat mengimbangi pH medium dan agar adalah komponen yang memberikan konsistensi pepejal.

Penyediaan

Endo Agar

Timbang 41.5 gr medium dehidrasi dan larut dalam 1 liter air suling. Panaskan campuran dengan kerap sehingga terdapat pembubaran sederhana. Mensterilkan Autoclave pada 121 ° C, 15 lb tekanan, selama 15 minit.

Apabila dikeluarkan dari autoklaf, biarkan sejuk sehingga suhu anggaran 45-50 ° C, goncang campuran untuk homogenisasi sebelum berkhidmat. Tuangkan 20 ml dalam plat steril Petri.

Biarkan menguatkan plat, melabur dan simpan dalam plak atau bungkus dengan kertas gelap sebelum menyimpan di peti sejuk. Sangat penting untuk melindungi persekitaran yang disediakan dari cahaya langsung. Amalan yang disyorkan adalah untuk menyediakan jumlah yang tepat yang diperlukan.

Sekiranya disimpan di dalam peti sejuk, plat harus dibenarkan sebelum menggunakan.

PH sederhana mestilah antara 7.2 hingga 7.6 dan warna medium yang disediakan adalah warna merah jambu pucat.

Ejen M-endo

Terdapat versi lain dari Endo Agar (M-endo) yang mengikuti formula McCarthy, Delaney dan Grasso, yang mengandungi lebih banyak sebatian dan bervariasi dalam bentuk penyediaan.

Ia boleh melayani anda: Zygote: Klasifikasi, Latihan, Pembangunan dan Segmentasi

This variant contains: lactose, triptose, digested casein enzymatic, animal tissue enzyme, sodium chloride, dibásic potassium phosphate, sodium sulphite, yeast extract, monobasic potassium phosphate, basic fuchsin, sodium layout, lauril sulfate Sodium and agar.

Dalam kes ini, 51 gr medium dehidrasi berat dan digantung dalam 1 liter air suling yang mengandungi 20 ml etanol.

Panaskan sedikit sambil kacau untuk membubarkan medium sepenuhnya. Ia tidak boleh terlalu panas dan sama ada mensterilkan dalam autoklaf. Sebaik sahaja campuran homogen, berkhidmat di plat steril petri dan biarkan menguatkan.

Gunakan

Di sesetengah negara, ia masih digunakan untuk mengira jumlah dan koliform fecal dalam sampel air dan makanan, terutama kehadirannya Escherichia coli sebagai penunjuk utama pencemaran kotoran.

M-endo agar disyorkan oleh Persatuan Kesihatan Awam Amerika (APHA) untuk pemantauan dan kawalan program pembasmian kuman dan rawatan air kumbahan, serta dalam penilaian kualiti air minuman.

Kaedah yang paling banyak digunakan ialah penapisan membran, pengayaan terdahulu sampel dengan sup sulfat lauryl selama 2 hingga 4 jam.

Ia juga boleh digunakan sebagai pengganti EMB agar dalam analisis mikrobiologi makanan dan air dengan teknik nombor yang paling mungkin (NMP), khususnya dalam fasa pengesahan lengkap untuk menyokong kehadiran Dan. coli dari sup EC yang keruh.

QA

Untuk menilai kualiti persediaan yang berakhir, kawalan yang diketahui atau disahkan disemai.

Antara strain yang boleh digunakan untuk tujuan ini adalah: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 11775, Pembetung Enterobacter ATCC 13047, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Shigella Flexneri ATCC 12022, Proteus mirabilis ATCC 14153 dan Enterococcus faecalis ATCC 11700.

Ia boleh melayani anda: Flora dan Fauna Wilayah Andean: Spesies Wakil

Strain ditaburkan oleh keletihan dan diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 jam dalam aerobiosis.

Keputusan yang diharapkan adalah:

• Untuk Escherichia coli: Koloni merah yang kuat, dengan bersinar logam.
• Untuk Dan. Cloacae dan K. pneumoniae Koloni mestilah mucoid merah jambu.
• Dalam kes S. Typhimurium, s. Flexneri dan p. Mirabilis Tanah jajahan biasanya berwarna merah jambu pucat atau tidak berwarna.
• Akhirnya, Dan. Faecalis Ia dijangka dihalang sebahagiannya, oleh itu pertumbuhannya mesti miskin dengan koloni merah jambu yang sangat kecil.

Batasan

-Oleh itu, medium endo mempunyai kuasa selektif, oleh itu, ia boleh menanam beberapa mikroorganisma positif gram seperti Staphylococcus, Enterococcus dan juga ragi.

-Bacilli lain yang bukan milik keluarga Enterobacteriaceae boleh berkembang dalam medium ini, seperti Pseudomonas sp dan Aeromonas sp. Ciri -ciri strain ini adalah koloni tidak berwarna yang tidak berwarna.

-Oleh itu, medium yang disediakan ini sangat sensitif terhadap cahaya, oleh itu, pendedahan yang berpanjangan terhadap kemerosotan sistem penunjuk ini, secara tidak langsung merosakkan alam sekitar.

-Komponen sederhana dianggap karsinogenik, jadi hubungan langsung mesti dielakkan.

-Medium dehidrasi sangat hygroscopic dan mesti dikekalkan dalam bekas asalnya pada suhu bilik, ditutup dengan baik dan dalam persekitaran yang kering.

Rujukan

1. Makmal BD. Endo Agar. Terdapat di: BD.com
2. Makmal Neogen. Saya Agar. Terdapat di: FoodSafety.Neogen.com