Yayasan, Penyediaan dan Kegunaan Hektoen

Dia HAKTOEN AGAR O AGAR HEKTOEN ENTERIC adalah medium kultur pepejal, selektif dan pembezaan. Ia dicipta di Institut Hektoen oleh Raja dan Metzger untuk pengasingan bakteria enteropatogenik genre Shigella dan Salmonella.

Medium terdiri daripada protein peptone, ekstrak yis, garam hempedu, laktosa, sukrosa, salicin, natrium thiosulfate, natrium klorida, sitrat besi, ammonium sitrat, biru bromool, asid fuchsin dan agar dan agar dan agar. Perumusan ini membolehkan membezakan genre shigella dan salmonella dari seluruh bakteria yang mampu berkembang dalam medium ini.

Ke. Hektoen virgen b ague b. Haktoen Agar disemai. Sumber: Flickr.com/pemuat naik asal adalah Philippinjl di Wikipedia Perancis. [CC BY-SA 2.0 FR (https: // creativeCommons.Org/lesen/by-sa/2.0/fr/akta.dalam)]

Walaupun terdapat media lain dengan fungsi yang sama seperti Hektoen Agar, ini mempunyai kelebihan yang lebih besar berbanding dengan media lain, terutama ketika mereka ingin memulihkan spesies Shigella.

Spesies kedua -dua genera menghasilkan masalah gastrousus yang teruk dalam manusia disebabkan oleh penggunaan makanan yang tercemar; Oleh itu penghantaran adalah fecal - lisan. Itulah sebabnya penggunaan hektoen agar terutamanya ditunjukkan dalam analisis mikrobiologi najis dan sampel makanan.

[TOC]

Asas

Hektoen agar mengandungi ekstrak peptones dan ragi sebagai sumber nutrien, memberikan unsur -unsur penting untuk pembangunan mikroba.

Walau bagaimanapun, ia juga mempunyai garam hempedu yang bertindak menghalang pertumbuhan beberapa bakteria, terutama gram positif dan beberapa gram negatif. Oleh sebab itu, ia dianggap sebagai medium selektif.

Sebaliknya, Hektoen agar adalah medium pembezaan. Harta ini diberikan oleh kehadiran karbohidrat yang ditapai seperti laktosa, lukisan dan salisyine, di sebelah sistem penunjuk pH, yang diwakili oleh fuchsin biru dan asid bromotimol.

Boleh melayani anda: sismonetia

Semua bakteria yang mampu tumbuh dalam medium ini yang tidak tergolong dalam genus Salmonella dan Shigella akan membangunkan koloni salmon atau oren kecuali genus Proteus. Ini disebabkan penapaian satu atau lebih karbohidrat yang hadir, yang mengasingkan medium, yang menjadikan penunjuk pH berpaling.

Sebaliknya, genus Shigella dan Salmonella tidak dapat menanam mana-mana karbohidrat yang hadir, hanya menggunakan peptones sebagai sumber tenaga, yang alkali medium dan oleh itu koloni mereka berwarna biru hijau.

Juga dalam medium ini, bakteria yang mampu membentuk hidrogen sulfida (gas tidak berwarna) dapat dibezakan dalam medium ini. Natrium thiosulfate bertindak sebagai sumber sulfida manakala sitrat besi adalah ejen yang mendedahkan. Kedua -dua sebatian memungkinkan pembentukan endapan hitam sulfida besi yang menunjukkan reaksi.

Hitam mendakan di tengah koloni dengan halo telus di sekitar memberikan penampilan mata ikan. Ciri ini mencadangkan kehadiran genre Salmonella.

Akhir.

Penyediaan

Timbang 76 gr medium dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Tonton campuran dan kemudian berehat selama 10 hingga 15 minit. Ia boleh dipanaskan dan mendidih, memberikan pergerakan berputar sehingga pembubarannya. Medium ini tidak disterilkan dalam autoklaf.

Apabila medium mencapai suhu anggaran 45 ° C, jumlah 20 ml dalam plat steril petri secara langsung dicurahkan.

Boleh melayani anda: dinamik penduduk

Agar dipertahankan. Pada masa itu mereka sudah bersedia untuk digunakan. Disarankan untuk menggunakannya dengan segera. Sekiranya tidak mungkin mereka disimpan di dalam peti sejuk sehingga penggunaannya.

Plat mesti dikeluarkan terlebih dahulu dari peti sejuk sebelum menyemai mereka untuk mengambil suhu ambien.

PH sederhana mestilah 7.5 ± 0.2. Warna medium dehidrasi berwarna ungu dan disediakan berwarna hijau coklat.

Gunakan

Penggunaan hektoen agar disyorkan untuk mencari bakteria genus Shigella dan Salmonella dalam sampel makanan dan makanan.

Kemungkinan mengasingkan bakteria ini meningkat dengan ketara jika sampel dalam sup khas sebelum ini diperkaya.

Inokulum mesti kuat dan penanaman dilakukan oleh pencerobohan. Plat diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 24 hingga 48 jam dalam aerobiosis.

Inkubasi selama 48 jam disyorkan kerana ciri -ciri koloni lebih jelas untuk tafsiran dan pembezaan pada masa ini.

QA

Untuk melakukan kawalan kualiti ke medium ini, strain bakteria yang disahkan digunakan, seperti: Salmonella typhimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Shigella Flexneri ATCC 12022 dan Shigella Sonnei ATCC 25931.

Keputusan yang diharapkan adalah seperti berikut: Salmonella typhimurium dan  Salmonella Enteritidis Mereka mesti membangunkan koloni hijau dengan atau tanpa pusat hitam. Walaupun spesies Shigella akan tumbuh sebagai jajahan hijau - kebiruan.

Anda juga boleh memasukkan strain Escherichia coli ATCC 29212, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212 dan Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Boleh melayani anda: sup lactosado

Dalam kes ini ciri -ciri yang diperhatikan adalah seperti berikut: Dan. coli dan K. pneumoniae Mereka akan berkembang di koloni sederhana ini salmon warna ke oren, dengan mendakan warna yang sama di sekitar. Sementara Proteus akan membangun koloni biru-hijau dengan atau tanpa pusat hitam.

Manakala S. Aureus dan  Dan. Faecalis Mereka mesti dihalang, kadang -kadang Dan. Faecalis berjaya tumbuh sebagai koloni kuning, sangat kecil.

Sebaliknya, kerana medium ini tidak disterilkan dalam autoklaf, penting untuk menilai kemandulan medium. Oleh itu, dari setiap lot yang disediakan mereka mesti diinkubasi dari satu hingga dua plat tanpa inokulasi 37 ° C selama 24 jam dalam aerobiosis.

Jelas sekali tidak ada pertumbuhan di pinggan.

Batasan

-Spesies Proteus dapat berkembang dalam medium ini dan ciri -ciri koloni mereka dapat dikelirukan dengan spesies Salmonella atau Shigella. Atas sebab ini setiap koloni yang mencurigakan mesti disahkan dengan ujian biokimia.

-Adalah perlu untuk menemani penggunaan medium ini dengan usia yang kurang selektif, kerana jika mikroorganisma yang dicari berada dalam kepekatan rendah, ia tidak dapat berkembang dalam medium ini.

-Jangan terlalu panas semasa penyediaannya, kerana haba yang berlebihan mengubah komposisi persekitaran.

-Salmonella penapaian laktosa yang luar biasa boleh kelihatan yang boleh disedari.

Rujukan

1. Penyumbang Wikipedia. Hektoen Enterric Agar. Wikipedia, ensiklopedia percuma. 13 Mac, 2019, 23:38 UTC. Tersedia di: .Wikipedia.Org/ aksested 16 Mac 2019.
2. Makmal BD. BD Hektoen Enterric Gang (dia gank). 2013. Terdapat di: BD.com
3. Laboratorium Britania. Hektoen Entérico Agar. 2015. Terdapat di: Britanialab.com
4. Makmal Diffco Francisco Soria Melguizo. HAKTOEN AGAR. Terdapat di: F-Soria.adalah
5. Manual difco & bbl, hektoen enterric agar. Edisi ke -2. Terdapat dalam: BD.com/Eropah