Yayasan, Penyediaan dan Kegunaan Peptonada

Dia Air Peptonada Ini adalah cara pengayaan cecair, tidak selektif, terutamanya digunakan sebagai pencairan sampel makanan atau bahan lain. Ini bermakna dari sudut pandangan kimia sangat mudah, ia mengandungi peptone daging, natrium klorida dan air.

Ia mempunyai nilai pemakanan, yang membolehkan memperkayakan sampel. Sekiranya terdapat bakteria yang dipukul medium ini mempunyai kuasa untuk membaiki daya maju. Ia amat berguna dalam pemulihan bakteria milik keluarga Enterobacteriaceae.

Air peptonada di balang. Sumber: MSC. Marielsa Gil

Dalam kes pemulihan Salmonellas, penggunaan varian air peptonada buffered disyorkan; Ini berfungsi sebagai cara pra-pengayaan sampel, dalam kes ini ia mengandungi unsur-unsur lain seperti fosfat dispon dan dipotassium fosfat.

Biasanya air peptonada menyediakan pH neutral, namun terdapat varian lain di mana pH diperlukan untuk menjadi 8.5 ± 0.2 (alkali), kerana bakteria yang bertujuan untuk mengasingkan adalah alkalofil Vibrio cholerae.

Sebaliknya, medium ini boleh digunakan sebagai medium asas untuk ujian penapaian karbohidrat.

[TOC]

Asas

Peptonas menyediakan nutrien yang diperlukan untuk pembangunan bakteria, terutamanya asid amino nitrogen dan pendek rantaian, manakala natrium klorida mengekalkan keseimbangan osmotik.

Di samping itu, medium membolehkan menyebarkan, homogen dan membaiki sel -sel bakteria yang telah rosak dengan penyerahan kepada proses perindustrian.

Oleh kerana pencairan ideal, dengan berkesan menggantikan penyelesaian fisiologi (SSF) atau penyelesaian redaman fosfat (PBS).

Pertumbuhan bakteria menjadi jelas dengan pemerhatian kekeruhan yang sama.

Penyediaan

Penyediaan buatan sendiri (bukan komersial)

Timbang 1 gr peptone dan 8.5 gr natrium klorida, larut dalam 1 liter air suling. PH mesti diselaraskan hingga 7.0. Untuk ini anda boleh menggunakan natrium klorida 1 n.

Boleh melayani anda: tanaman sementara

Persediaan menggunakan medium komersial

Timbang 15 gr medium dehidrasi dan larut dalam satu liter air suling. Homogeneize campuran. Sekiranya perlu, campuran direbus selama 1 minit untuk membantu jumlah penyelesaian. Hidangkan dalam 100 ml balang atau 10 ml tiub yang diperlukan. Autoclavar pada 121 ° C selama 15 minit.

Sejuk dan gunakan di peti sejuk. PH akhir medium ialah 7.2 ± 0.2.

Warna medium dehidrasi adalah cahaya dan beige yang disediakan jelas amber.

Persediaan untuk ujian penapaian

Kepada penyediaan sebelumnya - selepas mensterilkan - karbohidrat perlu ditambah kepada kepekatan akhir 1%, ditambah dengan penunjuk Andrade (asid fuchsin) atau fenol merah (0.018 g/l). Tiub harus diletakkan loceng Durham untuk pemerhatian pembentukan gas.

Varian air peptonada lain

-Buffered Peptonada Water

Ini mengandungi kasein enzimatik yang dihidrolisiskan, natrium klorida, fosfat dihydrogenik kalium dan hidrogen natrium dodecahydrate natrium fosfat. PH akhir ialah 7.0 ± 0.2.

Untuk menyediakan, berat 20 gr dari medium yang kering dan larut dalam 1 liter air suling. Tinggalkan selama kira -kira 5 minit. Panaskan dengan 1 minit sehingga dibubarkan sepenuhnya.

Tuangkan balang yang mencukupi mengikut keperluan. Steril menggunakan autoklaf pada 121 ° C selama 15 minit.

-Alkaline Peptonada Water

Timbang 25 gr medium dehidrasi dan larut dalam 1 liter air. Teruskan seperti yang diterangkan di atas. PH berkisar antara 8.3 hingga 8.7.

Gunakan

Inokulum dilakukan dengan meletakkan sampel secara langsung.

Ia digunakan untuk mencairkan sampel, terutamanya apabila disyaki bahawa mungkin ada bakteria yang rosak. Secara umum, pencairan adalah 1:10 dan 1: 100.

Boleh melayani anda: Mengapa kulat tidak menghasilkan makanan mereka sendiri?

Ia diinkubasi selama 24 jam dalam aerobiosis pada suhu 35-37 ° C.

Sampel najis

Untuk sampel najis untuk mencari salmonella, penggunaan air buffered atau buffered disyorkan sebagai alat pra-enrique.

Untuk melakukan ini, teruskan seperti berikut:

Sekiranya najis dibentuk untuk mengambil 1 gr sampel. Sekiranya mereka cair, ambil 1 ml najis dan gantung dalam tiub dengan 10 ml air peptonada buffered. Dalam kes swab rektum, muat turun bahan yang terkandung di dalam tiub dengan air buffered peptonada.

Dalam semua kes, campurkan dan homogenkan sampel dengan baik.

Inkubasi pada suhu 37 ° C selama 18 hingga 24 jam. Selanjutnya sub-budaya dalam sup pengayaan sebagai sista sup selenito atau sup tetration di 37 ° C selama 18-24 jam. Akhirnya tumbuh dalam media selektif untuk Salmonella, seperti Agar SS, Agar XLD, Hektoen Agar, antara lain.

Sampel makanan

Air peptonada digunakan sebagai alat pengayaan atau sebagai pencairan yang mudah, tetapi jika spesies salmonella dicari ia digunakan sebagai alat pra-enrique, seperti yang telah digambarkan.

Dalam makanan, teruskan seperti berikut:

Untuk makanan pepejal menyesal 25 gr sampel dan untuk makanan cair, ukur 25 ml yang sama. Letakkan bahagian ini dalam balang yang mengandungi 225 ml air peptonada. Campurkan dan homogenkan sampel.

Jika disyaki bahawa beban mikrob adalah tinggi, siri atau pelarut perpuluhan boleh dijalankan untuk memudahkan kiraan jajahan yang membentuk unit (UFC).

Bilangan pelarut bergantung kepada jenis sampel dan pengalaman analisis.

Jika sebaliknya disyaki bahawa beban mikrob sangat rendah, tidak perlu melakukan pencairan. Selanjutnya, subjektif dalam media selektif.

Boleh melayani anda: Catalase: ciri, struktur, fungsi, patologi

Dalam kes makanan dari laut, seperti makanan laut, ikan, antara lain, mencari Vibrio cholerae atau spesies lain Vibrio, air peptonada diselaraskan kepada pH 8.5 (air peptonada alkali) harus digunakan (alkali peptonada).

QA

Dari setiap lot yang disediakan mesti mengeram dua tiub tanpa inokulasi selama 24 jam dalam aerobiosis pada suhu 37 ° C. Masa sudah berakhir, kekeruhan atau perubahan warna tidak boleh diperhatikan.

Kawalan yang diketahui juga boleh digunakan untuk menilai keberkesanannya:

Untuk ini, anda boleh menggunakan strain bakteria berikut: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella typhimurium ATCC 1428, Salmonella Enteritidis ATCC 13076.

Dalam semua kes, perkembangan mikrob yang memuaskan dijangka, yang diperhatikan oleh kekeruhan alam sekitar.

Batasan

-Medium dehidrasi sangat hygroscopic, jadi ia mesti disimpan dari kelembapan.

-Medium tidak boleh digunakan jika ada jenis kemerosotan yang diperhatikan.

-Medium budaya kering harus disimpan antara 10 - 35 ° C

-Medium yang disediakan mesti disimpan disejukkan (2-8 ° C).

Rujukan

1. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B dan Velázquez atau. Teknik untuk analisis mikrobiologi makanan. 2009, ed 2. Fakulti Kimia, UNAM. Mexico. Versi untuk Pentadbir Manual dan Dokumen (AMYD) Fakulti Kimia, UNAM 1. Terdapat di: http: // depa.Fquim.Unam.mx
2. Laboratorium Britania. Buffered Peptonada Water. 2015. Terdapat di: Britanialab.com
3. Makmal Neogen. Air Peptonada. Terdapat di: FoodSafety.Neogen.com
4. Laboratorium Britania. Air Peptonada. 2015. Terdapat di: Britanialab.com
5. Makmal Merck. Peptonada Buffered Water. Terdapat di: Merckmillipore.com
6. Makmal Conda Pronadisa. Alkaline Peptonada Water. Terdapat di: Condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.Ke. Argentina.