Vogel-Johnson Agar Apa, Yayasan, Penyediaan, Kegunaan

Dia Vogel-Johnson Agar Ia adalah cara budaya yang kukuh, selektif dan pembezaan, yang dirumuskan khas untuk pengasingan Staphylococcus aureus. Medium ini dicipta oleh Vogel dan Johnson pada tahun 1960 dari pengubahsuaian Telurito Glycina Agar yang dirumuskan pada tahun 1955 oleh Zebovitz, Evans dan Niven.

Pengubahsuaian terdiri daripada meningkatkan kepekatan manitol yang ada di alam sekitar dan dalam penggabungan penunjuk pH. Formula semasa terdiri daripada tripteína, ekstrak yis, mannitol, dipotassium fosfat, litium klorida, glisin, fenol merah, agar, larutan telurit 1% kalium.

Harus diingat bahawa ada media lain yang, seperti agar vogel-Johnson selektif untuk pengasingan S. Aureus, seperti Mannitol Agar dan Baird Parker Agar. Dalam pengertian ini, boleh dikatakan bahawa asas Vogel - Johnson bersetuju adalah campuran antara Mannitol Agar dan Baird Parker Agar.

Pada yang pertama jajahan S. Aureus Mereka dibezakan oleh fermentol. Sebaliknya, di tempat kedua S. Aureus Ia dicirikan dengan mengurangkan teluro ke teluro dan membentuk koloni kelabu menjadi hitam. Kedua-dua sifat itu diperhatikan di Vogel-Johnson Agar.

Medium ini, seperti rakannya, berguna untuk mengesan Staphylococcus aureus Dalam sampel makanan, kawalan kesihatan produk perindustrian dan sampel klinikal.

Asas

Sumbangan nutrien

Medium Vogel - Johnson mengandungi ekstrak triptein dan yis; Kedua -dua bahan menyediakan asid amino rantai panjang yang berfungsi sebagai sumber karbon dan nitrogen yang diperlukan untuk pertumbuhan bakteria. Bakteria yang mampu berkembang dalam medium ini akan mengambil nutrien bahan -bahan ini.

Ia dapat melayani anda: Fauna dan Flora Laut Peru

Kuasa terpilih

Vogel - Johnson Agar dapat menghalang pertumbuhan bakteria negatif Gram dan juga beberapa gram positif, memihak kepada perkembangan staphylococci koagulase positif. Bahan inhibitor adalah potassium tellurite, lithium chloride dan glisin.

Kuasa pembezaan

Bahan yang menjadikan medium pembezaan ini adalah mannitol dan potassium tellurite. Manitol adalah karbohidrat, dan apabila asid yang ditapai dihasilkan yang membuat medium dari merah ke kuning, yang berlaku berkat kehadiran penunjuk pH pH merah.

Walaupun, telurit tanpa warna apabila ia dikurangkan menjadi teluro percuma logam, mengambil warna kelabu gelap.

Dia Staphylococcus aureus menuai mannitol dan mengurangkan teluro ke teluro. Itulah sebabnya koloni biasa S. Aureus Dalam medium ini mereka kelabu atau hitam dikelilingi oleh medium kuning.

Bakteria yang tumbuh dalam medium ini dan tidak mengurangkan telurit atau penapaian mannitol, akan membentuk koloni telus yang dikelilingi oleh medium merah, bahkan lebih sengit daripada warna asal, kerana alkalinisasi medium dengan penggunaan peptones.

Sebaliknya, bakteria yang mengurangkan telurit tetapi tidak fermente manitol akan tumbuh sebagai koloni kelabu atau hitam yang dikelilingi oleh medium merah yang sengit.

Sekiranya medium disediakan tanpa penambahan potassium tellurite, koloni S. Aureus Mereka akan berkembang sebagai koloni kuning, dikelilingi oleh medium kuning, seperti yang berlaku di Mannitol Agar yang masin.

Baki osmotik dan ejen padu

Dipotassium fosfat mengekalkan keseimbangan osmotik medium dan menyesuaikan pH ke neutral 7.2. Sementara agar memberikan konsistensi yang kukuh kepada medium budaya.

Ia boleh melayani anda: Flora dan Fauna dari Mexico City

Penyediaan

1% P/V Potassium Telurite Solution

Penyelesaian ini tidak termasuk dalam persekitaran yang kering, kerana ia tidak boleh disterilkan dalam autoklaf. Atas sebab ini ia disediakan dan ditambah ke medium yang sudah disterilkan.

Beberapa rumah komersial menjual penyelesaian kalium telurit 1% yang sedia untuk digunakan. Jika anda ingin menyediakan di makmal, teruskan seperti berikut:

Timbang 1.0 gr gralium telurite dan mengukur 100 ml air sulingan. Larutkan kalium telurit di bahagian air dan kemudian selesaikan jumlah air sehingga mencapai 100 ml. Steretkan penyelesaian dengan kaedah penapisan.

Vogel-Johnson Agar Base

Timbang 60 gr medium dehidrasi, dan larut dalam 1 liter air suling. Campuran dipanaskan untuk mendidih untuk membantu penyelesaian lengkap. Semasa proses pembubaran, medium sering gelisah.

Mensterilkan dalam autoklaf 15 paun tekanan dan 121 ° C selama 15 minit. Keluarkan dari autoklaf dan biarkan berdiri sehingga medium mencapai suhu anggaran 45 hingga 50 ° C. Tambahkan 20 ml penyelesaian Telurite Potassium sebelum ini disediakan pada 1%.

Campurkan dan tuangkan plat steril petri. Biarkan menguatkan dan memerintahkan dalam plat terbalik.

PH akhir medium yang disediakan mestilah pada 7.2 ± 0.2.

Sebelum menyemai sampel, anda mesti menunggu plat mengambil suhu persekitaran.

Warna medium yang disediakan berwarna merah.

Gunakan

Walaupun ia boleh digunakan untuk pengasingan S. Aureus Dalam apa -apa jenis sampel, kebanyakannya digunakan untuk analisis mikrobiologi produk farmaseutikal, kosmetik dan makanan.

Ia boleh melayani anda: SGLT (protein pengangkutan natrium-glukosa)

Disyorkan bahawa inokulum menjadi padat. Penyebaran boleh dilakukan dengan strying dengan pemegang platinum atau dengan permukaan dengan spatula drigalski.

Plat diinkubasi pada 35-37 ° C selama 24 hingga 48 jam dalam aerobiosis.

QA

Untuk melakukan kawalan kualiti ke persekitaran Vogel-Johnson, anda boleh menggunakan kawalan strain berikut:

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Hasil yang diharapkan adalah seperti berikut: untuk strain S. Aureus Pertumbuhan yang memuaskan dengan koloni hitam dikelilingi oleh medium kuning. Untuk S. Epidermidis Pertumbuhan tetap dengan koloni lut atau hitam dikelilingi oleh medium merah.

Juga, kepada Dan. coli Diharapkan akan ada perencatan total, dan untuk Proteus mirabilis perencatan separa atau total; Sekiranya ia tumbuh, ia akan melakukannya hampir tidak dan koloni akan hitam dikelilingi oleh warna separuh merah.

Rujukan

1. Makmal BD. VJ (Vogel dan Johnson Agar). Terdapat di: BD.com
2. Laboratorium Britania. Vogel-Johnson Agar. Terdapat di: Britanialab.com