Tincion dari Yayasan dan Teknik Capsula

The Pewarnaan kapsul Ini adalah teknik pewarna yang berbeza yang memiliki harta yang menonjolkan struktur polysaccharide yang mengelilingi bakteria dan ragi tertentu yang disebut kapsul. Ia digunakan di makmal klinikal untuk membantu diagnosis patologi tertentu yang disebabkan oleh mikroorganisma yang dilekatkan.

Ia juga digunakan dalam makmal pengajaran untuk demonstrasi struktur morfologi ini kepada pelajar kerjaya sains kesihatan, seperti: ubat, bioanalisis, kejururawatan, atau sitoteknologi, antara lain.

Klebsiella pneumoniae smear dicelup dengan pewarnaan kapsul. Kaedah dakwat India dengan safranin. Sumber: a.A.V [domain awam]

Terdapat beberapa teknik mudah untuk menunjukkan kehadiran kapsul dalam mikroorganisma yang memilikinya, ini adalah: pewarnaan negatif, pewarnaan Anthony dan varian yang menggabungkan dua sebelumnya.

Pewarnaan negatif digunakan terutamanya dalam sampel CSF apabila kehadiran yis disyaki Cryptococcus neoformans. Ragi ini adalah penyebab meningitis yang kerap.

Teknik ini menggunakan dakwat nigrosin atau cina dan berdasarkan penciptaan antara bahagian bawah penyediaan dan kapsul yang tidak dapat ditembusi dari mikroorganisma. Latar belakang dicelup gelap dan kapsul tidak berwarna. Dengan cara ini struktur ini diserlahkan.

Bagi teknik Anthony, boleh dikatakan bahawa kebanyakannya digunakan dalam makmal pengajaran untuk menunjukkan struktur polysaccharide dalam bakteria seperti Klebsiella pneumoniae, Streptococcus pneumoniae dan Neisseria meningitidis.

Penggunaan teknik ini untuk tujuan diagnostik sangat jarang berlaku, kerana terdapat ujian rutin lain yang membolehkan mikroorganisma ini dikenal pasti.

[TOC]

Asas

Kapsul adalah struktur kuat sifat polysaccharide. Ini melindungi mikroorganisma phagocytosis, dan oleh itu adalah struktur yang sukar untuk menembusi.

Itulah sebabnya kapsul stainion berdasarkan kontras. Pewarna noda bahagian bawah penyediaan sementara kapsul tidak berwarna.

Oleh itu, dengan teknik -teknik ini kapsul mudah dikenali. Sekiranya mikroorganisma tidak mempunyai kapsul, ia tidak akan dapat dibezakan dengan jenis warna ini, kerana semuanya akan dicelup dari warna yang sama.

Ia dapat melayani anda: struktur homolog dan analog (dengan contoh)

Semua teknik yang digunakan untuk mewarnai kapsul mempunyai asas yang sama walaupun mereka menggunakan warna dan prosedur yang berbeza.

Teknik parke pewarnaan kapsul

-Pewarnaan Anthony

Pewarnaan Anthony menggunakan kaca violet sebagai pewarna. Ini akan mewarnai latar belakang badan dan warna violet bakteria.

Sebaliknya, 20% sulfat tembaga digunakan. Ini berfungsi sebagai larutan basuh, ia.

Bahan

- Susu shortasolate.

- Lamina mudah alih.

- 1% kaca violet.

- 20% tembaga sulfat.

- Mikroskop optik.

- Minyak rendaman.

Prosedur

Teknik ini terdiri daripada:

1. Memupuk mikroorganisma dalam susu linesolate selama 36 jam.
2. Letakkan setitik tanaman di hujung lembaran pemegang objek dan di sebelah meletakkan setitik kaca violet, campurkan dan lanjutkan dengan akhir slaid lain.
3. Luaran dan tidak memperbaiki panas.
4. Basuh dengan penyelesaian sulfat tembaga 20%, biarkan di luar rumah.
5. Perhatikan mikroskop dengan objektif rendaman. Cari ke arah keterlaluan yang dilanjutkan.

Penting untuk tidak menggunakan haba atau memperbaiki, atau kering, kerana ini merosakkan kapsul. Dan tidak mencuci dengan air.

Tafsiran

Susu yang pendek adalah medium budaya yang sangat baik kerana ia memberikan nutrien yang diperlukan untuk mikroorganisma untuk membangunkan kapsul yang menonjol.

Sebaliknya, susu litmolen akan membentuk latar belakang tebal dan padat yang akan dicelupkan ungu bersama dengan badan bakteria, tetapi kapsul yang mengelilingi mikroorganisma tidak berwarna. Oleh itu, halo yang jelas diperhatikan di sekitar badan bakteria.

Boleh melayani anda: faktor yang mempengaruhi aktiviti enzimatik Perwakilan grafik pada pemerhatian mikroskopik Klebsiella pneumoniae yang dicelup dengan pewarnaan Anthony. Sumber: Dibuat oleh pengarang MSC. Marielsa Gil.

Kelebihan

Ia adalah teknik mudah untuk dilakukan. Ia tidak memerlukan penetapan.

Begitu juga, perlu diperhatikan bahawa media kultur lain boleh digunakan, tetapi medium dengan susu lebih disukai kerana ia mempunyai kelebihan yang memberikan kapsul yang lebih menonjol.

Kekurangan

Ia adalah teknik yang lebih susah payah daripada pewarnaan negatif, dan untuk visualisasi ia memerlukan menunggu persiapan kering.

-Pewarnaan negatif

Bahan

- Lembaran slaid.

- Sederhana Budaya dengan Mikroorganisma.

- Dakwat cina atau nigrosin.

- Mikroskop optik.

- Salin fisiologi.

Prosedur

Letakkan setitik garam fisiologi pada penutup dan larut sebahagian kecil tanaman mikroba. Penting bahawa penyediaannya tidak terlalu tebal. Kemudian letakkan setitik dakwat Cina atau nigrosine dan campurkan.

Kemudian lembaran penutup diletakkan pada penyediaan tanpa melebihi cecair. Ia diperhatikan pada mikroskop yang memberi tumpuan terlebih dahulu pada sasaran 10x dan kemudian berlalu ke 40x.

Teknik ini juga boleh digunakan pada sampel CSF secara langsung. Ia.

Kelebihan

Ini adalah kaedah yang mudah untuk melaksanakan dan pada masa yang sama ekonomi. Ia tidak memerlukan penetapan, atau pengeringan penyediaan.

Kekurangan

Ia mempunyai kelemahan yang harus diperhatikan di mikroskop sebelum penyediaan kering, kerana jika ini berlaku mikroorganisma akan berkontrak, yang akan membuat visualisasi sukar.

Sebaliknya, positif palsu boleh berlaku jika penganalisis tidak berpengalaman, kerana leukosit biasanya mengelirukan ragi.

Pemerhatian ragi dengan kapsul dengan teknik Cina atau nigrosin harus dianggap sebagai diagnosis yang menganggap Cryptococcus neoformans Sehingga ia ditunjukkan dengan penanaman.

Ini kerana terdapat ragi lain yang boleh menjadi punca meningitis dan bukan hanya Cryptococcus neoformans, seperti genus Candida dan Rhodotorula, serta spesies lain Cryptococcus.

Boleh melayani anda: coenzyme asetil ke

Tafsiran

Sekiranya terdapat mikroorganisma kapsul, latar belakang gelap akan diperhatikan, dengan badan telus yang terapung di dalam cecair, menonjolkan kehadiran kapsul.

Neoformans kapsul Cryptococcus dicelup dengan dakwat Cina. Sumber: Foto Kredit: Penyedia Kandungan: CDC/DR. Leanor Haley [Domain Awam]

-Teknik dakwat India

Teknik ini juga boleh dilakukan dengan nigrosin. Ini adalah gabungan teknik yang dijelaskan sebelumnya. Teknik ini menggunakan dakwat violet crystal dan india atau nigrosine.

Badan bakteria mengambil warna ungu kaca ungu kerana ia dimuatkan secara negatif, sementara warna nigrosin bahagian bawah smear. Sekiranya bakteria mempunyai kapsul, ia akan dilihat sebagai halo telus di sekitar mikroorganisma.

Kristal Violet boleh digantikan oleh mana -mana pewarnaan ini: safranine, fuchsin asas atau metilena biru.

Bahan

- Kaca Violet.

- Dakwat nigrosine atau India.

- Lembaran slaid.

- Mikroskop.

Prosedur

- Memupuk mikroorganisma dalam medium budaya.

- Letakkan setitik tanaman di hujung lembaran slaid dan di sebelah meletakkan setitik dakwat India atau nigrosine, campurkan dan lanjutkan dengan akhir slaid lain.

- Udara kering dan tidak memperbaiki panas.

- Tutup dengan larutan kaca violet setiap 1 minit, basuh dengan air suling tetapi sangat halus (jet lembut), biarkan di luar rumah.

- Perhatikan mikroskop dengan objektif rendaman. Cari ke arah keterlaluan yang dilanjutkan.

Tafsiran

Badan bakteria ungu dan latar belakang gelap akan diperhatikan. Kapsul, jika ada, akan berwarna di sekitar bakteria.

Rujukan

1. Covadonga A, Silóniz M, Serrano S. Teknik Mikrobiologi Asas. Pemerhatian bakteria. Mengurangkan (biologi). Siri mikrobiologi. 2010; 3 (5): 15-38. D
2. López-Jácome L, Hernández-Durán M, Colín-Castro C, Ortega-Peña S, Cerón-González G, Franco-Cendejas R. Pewarnaan Asas di Makmal Mikrobiologi. MEDIAGRAPHIC.org. 2014; 3 (1): 10-18. Tersedia di: Metigrafi.com
3. Gil m. Pewarnaan Negatif: Asas, Teknik, Kelebihan dan Kekurangan. Pengangkat.com.
4. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Argentina. Pan -American Editorial S.Ke
5. Tankeshwar a. Capsule Stain: Prinsip, Prosedur dan Hasil. 2019. Panduan Mikrobiologi Perubatan. Tersedia di: MicrobeOnline.com