Media budaya, fungsi, jenis, penyediaan

The Media Budaya Mereka adalah persediaan pemakanan khas untuk pemulihan, pengasingan dan penyelenggaraan mikroorganisma bakteria dan kulat. Media ini boleh menjadi pepejal, cair atau separa.

Louis Pasteur adalah yang pertama menunjukkan bahawa dalam sup yang dibuat dengan kepingan daging rebus, ia disajikan supaya bakteria diterbitkan semula dalam kuantiti yang besar, hingga ke titik sup. Dalam pengertian ini, sup daging pasteur dianggap sebagai medium budaya cecair pertama yang digunakan.

Media Budaya yang Tidak Sedia (Pepejal dan Cecair). Sumber: Flickr

Kemudian Robert Koch, terima kasih kepada bantuan kolaboratornya Julius Richard Petri dan Walter Hesse, membuat kemajuan besar. Yang pertama merancang plat petri, yang masih digunakan hari ini; Dan yang kedua berlaku kepadanya untuk menggantikan gelatin untuk air agar untuk menyediakan media kultur pepejal, yang sangat relevan, kerana jeli itu telah direndahkan oleh beberapa mikroorganisma.

Pada masa ini terdapat banyak jenis media budaya untuk tujuan yang berbeza, oleh itu, ini diklasifikasikan mengikut fungsi mereka: antara yang paling penting, cara penanaman pemakanan, selektif, pembezaan, pengangkutan, pengayaan, pengiraan pengiraan, koloni, penyelenggaraan dan Untuk bukti kerentanan.

Sesetengah media kultur istimewa untuk memerhatikan tindak balas kimia, sangat berguna untuk mengenal pasti mikroorganisma yang terlibat. Antaranya mereka boleh disebutkan: Kigler, Mio, lia, sitrat, antara lain.

[TOC]

Sejarah

Medium Budaya Pertama disediakan oleh Louis Pasteur ketika dia mencuba.

Dia menyiapkan sup dengan kepingan daging dan memerhatikan bahawa selepas beberapa hari setelah terdedah ke udara, dia berubah keruh dan di supnya ada jumlah mikroorganisma yang cukup besar. Pada masa yang sama, sup lain dengan kepingan daging sebelum ini direbus dan ditutup secara hermetikal kekal lutut ketika hari -hari berlalu pada hari -hari.

Ini menarik perhatian banyak penyelidik dan menyedari bahawa mikroorganisma ini bertanggungjawab untuk menguraikan daging dan selain menghasilkan beberapa penyakit.

Atas sebab ini, adalah penting untuk mewujudkan cara untuk menghasilkan semula mikroorganisma ini di makmal untuk mengkaji mereka dengan lebih teliti.

Dalam pengertian ini, Robert Koch memberikan sumbangan yang tidak ternilai dalam peningkatan teknik makmal tertentu, terutama yang berkaitan dengan pengasingan bakteria, ketika ia memperkenalkan konsep medium kultur pepejal.

Pada mulanya dia menggunakan irisan kentang sebagai medium pepejal tetapi kemudian menambah gelatin ke sup daging dengan hasil yang lebih baik. Walau bagaimanapun, ada kalanya jeli cair dan menjadi tanaman cecair. Hari ini diketahui bahawa ini berlaku kerana beberapa bakteria mampu menghidrolisis gelatin.

Pada ketika itu idea menggunakan agar-tuangan, sebatian yang digunakan oleh isterinya untuk menebal gula-gula itu kepada salah seorang kolaboratornya.

Medium budaya asas ini secara beransur -ansur canggih, sehingga sampai ke media kultur yang diketahui hari ini.

Komposisi

Setiap medium mempunyai komposisi yang berbeza, tetapi penting bahawa ia mengandungi nutrien tertentu untuk perkembangan yang baik dari jenis mikroorganisma yang dicari.

Ia juga mungkin mengandungi bahan kimia tertentu yang membantu mendedahkan laluan metabolik yang mempunyai ketegangan tertentu, atau yang membuktikan kehadiran enzim tertentu.

Satu lagi elemen penting ialah penggunaan bahan penyerap kejutan. Ini membantu mengekalkan keseimbangan osmotik media, serta pH.

Mereka juga boleh mengandungi karbohidrat dan penunjuk pH untuk menunjukkan penapaian gula tambahan. Perubahan warna medium akan diperhatikan jika terdapat pengasidan yang dihasilkan oleh penapaian.

Beberapa media budaya mengandungi bahan inhibitor. Bergantung pada bahan yang digunakan, pertumbuhan mikroorganisma akan dihadkan dan yang lain akan disukai.

Jenis Media Budaya

Media penanaman diklasifikasikan mengikut pelbagai kriteria. Ini adalah: mengikut konsistensi mereka, komposisi dan fungsi mereka.

- Menurut konsistensi anda

Cecair

Mereka tidak mengandungi agar -ago. Pertumbuhan bakteria atau kulat dibuktikan oleh kekeruhan sup, yang pada asalnya lutut.

Pepejal

Mereka mengandungi antara 1.5 hingga 2% agar -agar. Campuran kukuh mempunyai permukaan yang menentang anjakan halus pemegang platinum, tanpa dipecahkan.

Semi -solid

Oleh itu, ia mengandungi kira -kira 0.5% agar -agar, ia adalah keadaan pertengahan antara cecair dan pepejal. Sesuai dalam media yang berfungsi untuk melihat motilitas. Mereka juga disyorkan untuk pemuliharaan strain, kerana mereka mengekalkan kelembapan untuk masa yang lama.

Boleh melayani anda: Saltacionisme: Ciri -ciri, Bukti dan Contoh

Biphasics

Mereka adalah cara yang disediakan sedemikian rupa sehingga ada fasa pepejal dan ini medium cecair. Digunakan secara meluas untuk budaya darah.

- Menurut komposisinya

Media Budaya Semula Jadi

Mereka adalah bahan yang diambil secara langsung dari alam semula jadi untuk memupuk bakteria, memberi mereka persekitaran yang paling dekat dengan cara mereka berkembang dalam ekosistem biasanya. Contoh, susu, jus, darah yang dicairkan, serum, dll.

Media Budaya Sintetik

Mereka adalah yang paling banyak digunakan hari ini, mereka adalah cara yang kering.

Media Budaya Semi -Stynthetic

Ia adalah gabungan medium sintetik yang mana elemen semulajadi ditambah untuk memperkayakan medium.

Media Budaya Selular

Mereka adalah cara khas untuk penanaman virus, seperti mikroorganisma ini tidak dapat bertahan di luar sel, mereka mesti mengandungi tisu atau sel hidup, dari haiwan atau tumbuhan.

Contoh: Tanaman buah pinggang monyet selular atau telur embrio.

- Menurut kegunaannya

Pemakanan, selektif, pembezaan, pengangkutan, pengayaan, pengenalan, kuantifikasi koloni, ujian penyelenggaraan dan kerentanan. Akan diterangkan kemudian.

Fungsi

Tidak kira jenis medium budaya, setiap orang mempunyai sesuatu yang sama dan mereka memudahkan atau mempromosikan pembiakan mikroorganisma tertentu. Perbezaannya terletak pada komposisi masing -masing, yang merupakan faktor penentu bagi utiliti akhir yang akan mereka miliki.

Setiap media kultur yang ada direka secara strategik untuk fungsi khusus yang mana ia dicipta, iaitu, semuanya mempunyai asas yang mengawal garis panduan untuk fungsi khusus mereka.

Harus diingat bahawa media kultur yang pernah disemai mesti menjalani keadaan suhu dan oksigen yang sesuai dengan jenis bakteria atau kulat yang anda ingin mengasingkan.

Sebagai contoh, jika anda ingin mengasingkan bakteria anaerobik mesophilic, agar darah dan inkubat dalam keadaan anaerobiosis (tanpa oksigen) pada suhu 37 ° C selama 48 jam selama 48 jam.

Sekarang, jika kulat diperlukan untuk mengasingkan, sabouraud agar dengan antibiotik digunakan. Ia diinkubasi dalam aerobiosis, pada suhu bilik selama beberapa hari, kerana yang terakhir adalah pertumbuhan yang perlahan.

Media kultur berkhasiat sederhana

Seperti namanya, media budaya ini mengandungi bahan pemakanan, seperti vitamin, asid amino, nitrogen dan sumber karbon, di antaranya mereka boleh disebutkan: ekstrak daging atau ekstrak yis, kanji jagung, pankreas dicerna, peptones, glukosa, antara lain.

Mereka juga mengandungi komponen lain yang memberikan keseimbangan osmotik kepada alam sekitar, kerana kebanyakan tanaman memerlukan pH hampir 7.0. Unsur -unsur ini boleh: natrium klorida, disodium fosfat, antara lain.

Pencairan adalah air suling dan media pepejal mempunyai agar-tambah.

Tujuan budaya ini adalah untuk memulihkan mikrobiota bakteria atau kulat yang wujud dalam sampel tertentu. Ia tidak mendiskriminasi antara mikroorganisma, kerana ia dapat menanam sejumlah besar bakteria, kedua -dua gram positif dan gram negatif, serta ragi dan kulat mycelial.

Mereka disyorkan untuk menyemai sampel yang datang dari laman web biasanya steril. Walau bagaimanapun, mereka tidak berkhidmat untuk menuntut mikroorganisma.

Mereka juga berguna untuk penyelenggaraan strain, selagi mereka tidak mengandungi glukosa.

Media Budaya Memperkaya

Sekiranya darah atau darah yang dipanaskan ke media pemakanan yang mudah ditambah, mereka menjadi media yang diperkaya (darah dan coklat masing -masing).

Ini bermakna sangat berguna untuk menanam sampel yang biasanya steril, untuk menyelamatkan strain yang lemah dan untuk mengasingkan mikroorganisma menuntut dari sudut pandang pemakanan.

Media Budaya Selektif

Media Budaya Selektif, sebagai tambahan kepada mengandungi nutrien penting untuk pertumbuhan mikroorganisma tertentu yang menarik, juga ditambah bahan penghalang, seperti antibiotik, antijamur, pewarna, garam hempedu, antara lain.

Bahan inhibitor bertujuan untuk mengurangkan pelbagai jenis strain yang dapat tumbuh, memihak kepada pertumbuhan kumpulan yang sangat istimewa yang ingin menyelamatkan.

Contoh: Sup EC (Khas untuk Jumlah dan Koliform Fecal) atau Sabouraud agar dengan antibiotik (khusus untuk kulat).

Media Budaya Berbeza

Media pembezaan mengandungi unsur pemakanan yang diperlukan untuk pertumbuhan kumpulan mikroorganisma tertentu dan juga mengandungi bahan -bahan yang di hadapan mikroorganisma tertentu akan dimetabolisme atau terdegradasi.

Iaitu, mereka akan menghasilkan tindak balas kimia yang dalam satu cara atau yang lain akan dibuktikan dalam medium budaya.

Ia boleh melayani anda: Zon Photik: Ciri -ciri, Flora Light, Fauna

Beberapa reaksi alkali atau mengasingkan medium dan terima kasih kepada kehadiran penunjuk pH, perubahan ini dapat dibuktikan melalui giliran berwarna di tengah dan koloni.

Oleh itu, di antara sekumpulan bakteria yang besar yang boleh tumbuh dalam medium itu, yang memetabolisme atau menurunkan bahan dan mereka yang tidak melakukannya, hanya memerhatikan warna koloni dan medium.

Sebagai contoh, agar darah membolehkan membezakan bakteria yang menghasilkan hemolisis beta (halo telus) dari mereka yang menghasilkan hemolisis alfa (halo kehijauan) dan dari yang tidak menghasilkan hemolisis.

Media selektif dan pembezaan

Contoh ini adalah apa yang berlaku di MacConkey Agar. Ia selektif kerana ia hanya membolehkan pertumbuhan bacilli negatif gram; Dan ia adalah perbezaan, kerana ia dapat membezakan bakteria penapaian laktosa (koloni warna fuchsia) yang tidak berfungsi (warna merah jambu pucat atau tidak berwarna).

Media Budaya Pengangkutan

Seperti namanya, mereka bermakna digunakan untuk mengangkut sampel yang telah diambil di tempat yang lebih jauh ke makmal yang akan memproses sampel. Cara pengangkutan mengekalkan sampel dalam keadaan terbaik untuk hasil yang boleh dipercayai.

Media kebudayaan ini mempunyai ciri -ciri yang sangat istimewa, kerana mereka tidak dapat melebihi nutrien, kerana populasi bakteria yang ada tetap berdaya maju, tetapi tanpa meningkatkan jumlahnya.

Mereka biasanya media separuh solid, yang membolehkan sampel terhidrasi. Walau bagaimanapun, ia tidak boleh bertaburan untuk menghantar sampel secepat mungkin ke makmal. Contoh Cara Pengangkutan: Medio Stuart, Cary Blair dan Amies.

Budaya separuh dan pengayaan

Media budaya ini cair. Mereka digunakan untuk menyelamatkan patogen tertentu yang pada bila -bila masa mungkin hadir dalam sampel kuantiti minimum.

Ia juga berguna untuk menyelamatkan ketegangan patogen yang mungkin lemah kerana beberapa rawatan sebelumnya diterima. Contohnya: air peptonada, sup tioglycolate dan sup selenito.

Ini bermakna mempunyai bahan penghambatan yang mengelakkan pertumbuhan mikrobiota yang disertakan, dan nutrien tertentu yang memihak kepada perkembangan mikroorganisma yang menarik.

Media penanaman untuk tujuan pengenalan 

Media ini mempunyai bahan yang boleh dimetabolisme secara kimia oleh bakteria tertentu, menghasilkan tindak balas kimia yang menunjukkan kehadiran enzim tertentu atau jalur metabolik.

Oleh itu, mereka digunakan sebagai ujian biokimia yang membantu pengiktirafan genre dan spesies kumpulan tertentu. Ex: Kigler Medium Evidences Jika mikroorganisma dapat menanam glukosa dan laktosa, jika menghasilkan hidrogen dan sulfida gas.

Medium ini mengandungi bahan mendedahkan yang membolehkan memerhatikan tindak balas, seperti penunjuk pH, dan ion besi.

Ujian mudah ini dapat membezakan dua kumpulan besar mikroorganisma bakteria, seperti bakteria yang dimiliki oleh keluarga Enterobacteriaceae bakteria yang disebut tidak berpengalaman.

Bermaksud mengira koloni

Ini adalah cara yang mudah, tidak selektif yang berfungsi untuk kuantifikasi populasi mikrob, seperti akaun standard. Jenis mikroorganisma yang akan tumbuh dalam medium ini bergantung kepada keadaan suhu dan oksigen yang ditubuhkan.

Media penanaman untuk bukti kerentanan

Medium standard untuk tujuan ini ialah Müeller Hinton Agar, ini bermakna sesuai untuk menilai tingkah laku antibiotik yang berbeza terhadap mikroorganisma patogen yang terpencil.

Ia amat berguna dalam bakteria yang sedikit menuntut, sementara dalam menuntut bakteria ia hanya boleh digunakan jika ini ditambah dengan darah.

Penyelenggaraan bermaksud penyelenggaraan

Cara ini bertujuan untuk menghasilkan semula mikroorganisma dan juga mengekalkan daya maju bakteria atau kulat dan juga fungsi fisiologi mereka dipelihara.

Ciri penting ialah jenis medium ini tidak boleh mengandungi glukosa, kerana walaupun ia adalah elemen yang memberikan pertumbuhan pesat, penapaiannya menghasilkan asid yang mengurangkan kehidupan mikroorganisma.

Sesetengah makmal perlu menyimpan mikroorganisma tertentu yang boleh digunakan kemudian dalam kajian penyelidikan, kawalan dalaman atau untuk tujuan pengajaran.

Penyediaan

Pada masa ini terdapat banyak tanda dagangan yang mengedarkan media kultur yang berbeza. Media datang dalam bentuk lyophilized atau dehidrasi, yang terkandung dalam balang cahaya hermetik dan dilindungi.

Setiap medium membawa label yang menentukan nama medium, komponennya, nombor banyak dan berapa banyak untuk menimbang untuk menyediakan satu liter medium budaya.

Boleh melayani anda: evolusi prebiotik: di mana ia berlaku dan apa yang diperlukan

Sebagai pencairan, air sulingan digunakan. Jumlah berat larut dalam satu liter air suling sehingga campuran homogen. Sebilangan besar media dibawa ke autoklaf, 15 paun, suhu 121 ° C, selama 15 minit.

Media cair sudah diedarkan di dalam tiub kerja masing -masing, sementara media pepejal autoklavat di erlenmeyer.

Yang terakhir dibiarkan sehingga mereka mencapai suhu 55 ° C dan dihidangkan di plat Petri di dalam loceng aliran laminar atau berhampiran dengan Bunsen Lighter. Mereka dibenarkan menguatkan dan terbalik dalam peti sejuk.

Terdapat juga media kultur pepejal yang diedarkan dalam tiub, yang membolehkan diri mereka menguatkan sama ada dalam taco (lurus) atau puncak seruling (cenderung).

Sebelum menggunakan mana -mana medium budaya yang disediakan, sama ada pepejal atau cecair, ia mesti membekalkan sebelum menyemai sampel.

Kepentingan

Media kebudayaan sudah pasti alat kerja yang sangat berharga untuk ahli mikrobiologi, kerana mereka memungkinkan pemulihan ejen berjangkit yang pada waktu tertentu mungkin mempengaruhi individu atau mencemarkan makanan, persekitaran atau permukaan.

Dalam pengertian ini, boleh dikatakan bahawa mikrobiologi mempunyai pelbagai bidang, di antaranya adalah mikrobiologi klinikal, perindustrian, alam sekitar, mikrobiologi, antara lain dan dalam semua cara budaya digunakan.

Sudah tentu, jenis medium yang digunakan dalam setiap kes boleh berubah mengikut keperluan dan jenis sampel yang diproses. Kumpulan mikroorganisma yang dicari juga mempengaruhi.

Pengasingan mikroorganisma patogen atau menyebabkan pencemaran adalah sangat diperlukan untuk dapat meletakkan rawatan yang berkesan atau mengamalkan prosedur yang membantu menghapuskan bahan pencemar.

Sekiranya berlaku mikrobiologi klinikal, bukan sahaja penting.

Kajian ini juga menggunakan medium budaya akan membolehkan untuk mengatakan antimikrob mana yang sensitif dan yang tahan atau secara ringkas, yang boleh digunakan sebagai rawatan dan yang tidak.

Oleh itu, media budaya tidak dapat hilang di makmal mikrobiologi, apa pun kawasannya.

Akhirnya, boleh dikatakan bahawa media kultur telah membolehkan kami menyiasat pelbagai aspek, kedua -dua bakteria dan kulat.

Kawalan Kualiti Media Penanaman

Penyediaan dan penggunaan media kultur tidak boleh dilakukan dengan ringan. Di setiap makmal mesti ada apartmen yang menggunakan protokol kawalan kualiti kepada media, setiap kali lot baru disediakan, dan dengan itu menjamin bahawa mereka disediakan dengan betul, steril dan berfungsi.

Untuk menilai kemandulan mereka, satu atau dua cara setiap lot diambil secara rawak dan diinkubasi pada suhu 37 ° C selama beberapa hari (tidak ada pertumbuhan). Untuk memeriksa fungsinya strain rujukan ATCC digunakan (koleksi budaya jenis Amerika) yang ditanam dan berdaya maju dengan sewajarnya.

Pelupusan media penanaman

Setelah menggunakan media kultur, mereka mesti dibuang sedemikian rupa sehingga tidak mencemarkan persekitaran.

Untuk melakukan ini, bahan itu disterilkan dalam autoklaf sebelum dibuang. Selanjutnya, bahan gelas dikeluarkan. Yang terakhir menjadi dibasuh, dikeringkan, disterilkan dan disimpan untuk kegunaan kemudian. Sekiranya menggunakan plat pakai buang, ini disterilkan dan kemudian dibuang dalam beg khas.

Rujukan

1. Mikrobiologi Borrego di Stamps VIII. Robert Koch: Kejayaan Ketekunan (i). SEM 2018, 117 (1): 1-18 Universiti Malaga. Tersedia di: Hari.Uab.Kucing/
2. Volcy c. Kejadian dan evolusi postulat Koch dan hubungan mereka dengan fitopatologi. Kajian Colomb. 2008; 26 (1): 107-15. Terdapat di: Scielo.org.bersama/
3. Burguet Lago Nancy, Castillo Abraham Lourdes. Kawalan Kualiti Media Budaya yang Digunakan dalam Pemantauan Alam Sekitar Kawasan Pengeluaran Klasifikasi. Kuba Rev Hig Epidemiol 2013; 51 (2): 155-160. Terdapat di: Scielo.
4. Bonilla M, Pajares S, Vigueras J, Sigala J, Le Borgne S. Manual bahan didaktik amalan mikrobiologi asas. Universiti Autonomi Metropolitan. Bahagian Sains Semula Jadi dan Kejuruteraan. Unit Cuajimalpa. 2016. Terdapat di: CUA.UAM.mx/
5. Carbajal a. Media Budaya Selular: Kajian. Labome dunia makmal. Pusat Perubatan Universiti Pittsburgh, Amerika Syarikat. 2013 boleh didapati di: es/
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Diagnosis mikrobiologi. Edisi ke -5. Pan -American Editorial S.Ke. Argentina.
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Diagnosis Mikrobiologi Bailey & Scott. 12 ed. Pan -American Editorial S.Ke. Argentina.